研究和评论:微生物学和雷竞技苹果下载生物技术杂志》上
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P - ISSN: 2347 - 2286
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Kiros Haddish Tesfamariam*
生物科学和生物技术学系Mekelle理工学院,Mekelle大学,埃塞俄比亚
收到日期:13/08/2015;接受日期:26/05/2016;发表日期:06/06/2016
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乳酸,一般用于食品、化工和制药行业,最近收到关注的生产可降解材料。有机酸的有效生产成本,廉价的原材料是一个关键的输入。因此,本研究论文目的在通过分批发酵乳酸的生成两个碳水化合物丰富的废弃物特别是kalanchoa thrysflora和仙人掌属植物ficus-indica l .(通常在埃塞俄比亚北部发现,提格雷区)通过使用Lactoctobacillus杆菌作为起动文化。结果表明,在发酵时期(6天时间),最大乳酸生产注意到第三天(对数生长期),在这个阶段贝尔水果皮水解产生约8.4 g / L乳酸和铅锡皮水解产生的5.8 g / L乳酸。因此,这项研究线索智者的过程和环境的朋友雇佣方式的水果废弃物对环境有益的用途而不是处理他们。
Ficus-Indica L。kalanchoa thrysflora,Lactoctobacillus杆菌、乳酸
乳酸(LA)是一个广泛的认识有机酸和被瑞典化学家舍勒透露。它可以由发酵过程和/或化学过程。它有很多食品自然和成品的微生物发酵。这也是最重要的代谢中间物大多数生物,从糖酵解高等生物(微生物1]。
自然有两种类型的光学异构体的乳酸尤其是D (−) LA和L (+)。L(-)类型的洛杉矶是最常见的,它可以发现在许多食品和药品D-isomer损害人类[2]。
一些传统的野生水果被非洲的许多民族(例如埃塞俄比亚北部)可以基于水果行业的良好来源但同时这些行业有自己的污水,产生大量的废物,带来了严重的环境污染问题。然而,当正确运用这些类型的水果废弃物可以填补许多社会差距。这是因为这些废物有非常丰富的碳水化合物,因此他们可以作为很好的营养来源相关发酵微生物的生长,这一过程的最终产品在本研究可以在大量生产拉。
因此,本研究旨在评估皮的利用废物的镀锡和贝尔水果作为拉生产发酵利用来源Lactoctobacillus杆菌起动文化和它的线索智者的过程和环境的朋友雇佣方式的水果废弃物对环境有益的用途而不是处理他们。
起动器文化
纯培养的收购Mekelle大学兽医的拼贴画医学,埃塞俄比亚。这种细菌被接种亚文化圈在30毫升的夫人(汤)由以下:1.0%蛋白胨,鸡蛋中提取0.8%,0.4%酵母提取物、2.0%葡萄糖0.5%醋酸钠,0.1% polysorbate80, 80年(也称为渐变),0.2%磷酸氢二钾,柠檬酸triammomium 0.2%, 0.02%硫酸镁七水硫酸锌,四水硫酸锰1.0%琼脂0.005%,pH值调整到6.2 25°C)。然后,这种媒介被允许在扶轮孵化瓶在37°C六天时间。在这之后,温度、pH值和盐浓度的有效增长l .杆菌进行了优化。在这里,文化l .杆菌应变是在37°C孵化时间五天的三个优化流程。pH值用于优化2,4,6,8,氯化钠的浓度用于优化分别为2%,4%,6.5%和10%,细菌的细胞密度在测量了这些优化OD 600海里的连续5天。最后优化设置的温度范围10°C, 15°C, 37°C和45°C的pH值下7。细菌的细胞密度在这个阶段还研究了通过测量OD在600 nm连续五天完成(3]。
估计酸形成
酸的形成l .杆菌脱脂牛奶是由(4详细修改和酸性的活动是由牛奶的pH值的变化中10% (w / v)。用酸度计,pH值测量是接种牛奶介质在不同时期尤其是0,2,4,6小时。
胞外多糖的估计形成
每股收益形成的l .杆菌应用技术进行了(5]LTV琼脂板和孵化30°C 48小时。
蛋白质水解过程的估计
24小时老0.1毫升肉汤培养的l .杆菌被接种到牛奶中,孵化在37°C 48小时。之后,区观察这种细菌的抑制增长的板块是由(6]。
淀粉分解过程的估计
24小时的旧文化l .杆菌被接种淀粉琼脂板和允许孵化30°C 48小时。然后,盘子被碘溶液洗15分钟,观察到抑制的形成区域的板,以确保淀粉分解过程完成之前(6]。
脂类分解估计
24小时老夫人0.1毫升肉汤培养(汤)的文化l .杆菌被接种到三丁酸甘油酯琼脂板和允许孵化在37°C 48小时。之后,区观察这种细菌的抑制增长的盘子下面相同的方式与7]。
调查的发酵的碳水化合物
汤夫人含有酚红的0.04 g / L,这是作为酸碱指示剂,但缺乏葡萄糖是第一个准备。然后,以下所有构成的1%(葡萄糖、半乳糖、果糖、乳糖、麦芽糖、菊糖和木糖)添加到汤测定发酵的碳水化合物。
发酵的皮
两个本地可用的皮特别贝尔水果市场(Edagahamus)和镀锡手动收集Edagahamus的高地,Wolwallo,埃塞俄比亚北部第一次准备。然后,这些皮是用作拉基板生产用乳杆菌作为起动文化。
测定总糖皮
蒽酮法被用来确定整个糖组成的两个样品的皮。
剥玉米胚芽蛋白酶解物的准备发酵
每个皮废料的10 g热压处理过的在121°C 15分钟。然后,200毫升蒸馏(免费)污染水被添加到皮样本。然后煮30分钟的80°C。冷却后,它是由棉布过滤。然后1%的盐酸v / v是添加到滤液和热压处理过的30分钟的121°C。最后,水解过程进行了水解和皮的pH值适应6 - 6.8曹和卡索的降水4产生这种调整避免了与第一Whatmann滤纸过滤。为完成的8]。
准备启动文化
的l .杆菌文化是包含两个剥玉米胚芽蛋白酶解物的MRS培养基中培养。然后,媒体被保存在室温下孵化的目的在旋转瓶180 rpm 2天作为接种体用于进一步的研究。
制备发酵媒体
200毫升的过滤消毒剥玉米胚芽蛋白酶解物被添加到50毫升无菌培养基夫人2锥形烧瓶。然后,5%的文化l .杆菌被接种每个皮水解和允许在37°C扶轮孵化器孵化(180 rpm) 5天。然后,这些细菌水解皮的的消费和生产拉每天进行评估。
评估底物的消耗
Dinitrosalicylic比色法被用来估计剩余的还原糖含量发酵汤(描述9]。
评估生产乳酸
拉生产主要是通过评估确定的可滴定酸度日常通过滴定发酵培养基发酵培养基对1 M氢氧化钠用酚酞作为指示剂(3]。
复苏的乳酸
LA发酵肉汤中可用的数量被恢复使用乳酸钙沉淀方法(10]。这些晶体是另外使用phydroxy二苯方法用于验证的描述(11]。
6的pH值,温度37°C和百分之二的氯化钠被发现是最优的生长条件l .杆菌这研究强烈赞同其他(先前所做的研究1]。需要评估的属性细菌尤其是起动文化l .杆菌做是为了健身用作的发酵剂的选择批处理的皮。基于这一过程中,酸形成的估计细菌6小时后从0.46到0.67不等。发酵剂的能力的速度酸化剂大多是选择(如l .杆菌),都是潜在的分批发酵过程中节省时间(12]。需要确定EPS的活动是因为他们的重要性在调质剂和稳定剂的粘度增加最终产品;他们还帮助在蛋白质和胶束的刚性加强网络(13]。的蛋白质水解过程l .杆菌菌株接种到牛奶介质板的目的是为了确保周围明确区殖民地的出现。这些活动对细菌的生长至关重要的蛋白质丰富的基质和的发展至关重要感官不同的发酵产品的特征。发酵发生之前,一些酶预处理和水解过程是非常重要的基于淀粉的基质l .杆菌菌株不能降解淀粉和柜内的这项研究中,淀粉酶的生产并没有发生。lypolysis过程的调查是为了批准,当这种细菌作为起动文化对人类食品,因为它有能力降低脂质时采取的形式在少量食物。它可以进行lypolytic活动下降的体内,帮助人类的体内胆固醇水平。
的图1下面说明的评价还原糖根据dinitrosalicylic比色方法。这带来了一个缓慢减少糖的糖含量由于消费由起子培养细菌的碳水化合物是主要的供应制造的。
图1:估计还原糖。
评估生产乳酸
目前的研究表明l .杆菌被用作起动文化的发酵两个皮(6天)的持续时间和最大酸生产中注意到第三天(对数生长期)发酵过程如下图中表示(图2)。从两个皮,贝尔水果皮水解产生大约8.4 g / L的洛杉矶和铅锡皮水解物产生了5.8 g / L。LA内容的巨大的减少后第三天是因为限制数量的还原糖的批处理中,这是一个迹象表明细菌的到来的静止和下降阶段。
图2:估计的生产。
获得的最大拉制造是贝尔的水果皮水解物(8.4 g / L),而铅锡皮水解产生5.8 g / L的洛杉矶。因此,这项研究线索智者的过程和环境的朋友雇佣方式的水果废弃物对环境有益的用途而不是处理他们。
