真菌的杀灭幼虫的潜在的银纳米粒子对这种致倦库蚊幼虫(II和III龄)

文摘

银纳米粒子(AgNPs)是合成使用点青霉和进一步的特点是紫外可见分光光度计,扫描电子显微镜(SEM),能源色散x射线光谱学和傅里叶变换红外(FTIR)光谱支持纳米颗粒生物合成的真菌。合成AgNPs进一步追究其抗菌和杀灭幼虫的蚊子的活动。AgNPs治疗引起相当大的反对第二和第三龄幼虫死亡率的这种致倦Culix 24小时后曝光。然而,需要更高浓度的AgNPs诱导死亡率比2日龄对3龄。一般来说,脂质和蛋白质含量是减少幼虫组织AgNPs治疗后;而碳水化合物被发现增加的水平。AgNPs表现出抗菌活性对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和志贺氏杆菌沙门氏菌。特性研究表明,点青霉生物合成银纳米粒子通过减少硝酸银纳米银离子。它可以得出结论,真菌的快速合成银纳米粒子将有助于为蚊虫控制利用纳米技术开发生物过程。

关键字

硝酸银,点青霉,这种致倦Culix矢量控制、丝虫病

介绍

蚊子继续成为世界头号向量传送humanndnimal疾病;ndre突出讨厌昆虫evenfter巨大努力根除或控制的1]。库蚊蚊持续bitend humanndnimals引起疼痛。库蚊quinquefasciatusre尤其是负责丝虫病的传播。淋巴丝虫病的已知象皮病largelyffected近14亿人生活在全球73个国家(2]。世界卫生组织(WHO)宣布mosquitoesre人类敌人数量第一个目前估计,50 - 100 individualsreffected由蚊子传播的疾病(3]。几种方法包括使用化学pesticidesredapted controlnd theffected地区根除蚊子种群。然而,合成化学农药对环境造成更多的伤害,人类lifend其他非目标生物是不容易降解4]。Inddition,这种致倦库蚊蚊不幸更倾向于开发resistancegainst杀幼虫剂叫currentlyvailable。真菌生物合成的纳米颗粒是一个最好的生物方法准备银纳米粒子(5]。因此,银纳米粒子,温和的材料表现出许多好处eco-friendlinessnd更好的兼容性方面根除蚊子幼虫阶段(6]。两naturalnd larvicidalctivity合成农药的机理仍不清楚支持矢量控制策略的科学证据。因此,调查基本生化参数(蛋白质、carbohydratend脂质内容)杀虫剂对昆虫的需要小时(7]。

病原菌的影响一般质量lifend口腔健康导致慢性conditionsnd系统性疾病(8]。因此,目前的工作是指定调查thentimicrobial银nanoparticlesgainst微生物的影响等Staphylococcusureus,大肠杆菌,沙门氏菌typhimuriumnd沙门氏菌志贺氏杆菌。

材料和方法

Synthesisnd银纳米粒子的表征

银纳米粒子的合成:点青霉文化生长inppropriate媒介,直到它达到固定相。在持续7天,真菌在新媒介文化是separatednd种植了3天准备纯培养。孵化,滤液的纯真菌文化(4.5毫升)和0.5毫升1 mmgno wasd₃nd在黑暗条件孵化瓶银纳米粒子的生物合成。

表征纳米粒子

紫外可见spectralnalysis是由使用紫外可见分光光度计,UV159 (Elico),配备与石英比色皿。纯银离子的还原反应的监控通过测量紫外可见光谱mediumt孵化24小时使用smallliquot samplet 200 - 800 nm。合成纳米粒子通过扫描电子显微镜(SEM),能量色散x射线Spectroscopynd傅里叶变换红外(FTIR)光谱。

筛选larvicidalctivity的银纳米颗粒

2^ndnd 3^{理查德·道金斯}在明星的这种致倦库蚊幼虫从国家疾病控制中心采购,Mettupalam,哥印拜陀,Tamilnadu。幼虫被维护在托盘包含蒸馏waternd提供酵母。真菌synthesizedgNPs larvicidalctivity的评估被世界卫生组织方法和轻微的修改(9]。不同的测试浓度ofgNP为2^nd龄幼虫(1.1 0.5 ppm 0.7 ppm, 0.9 ppm, ppmnd 1.3 ppm)和第三龄幼虫(1 ppm, 2 ppm, 3 ppm, 4 ppmnd 5 ppm)在200毫升蒸馏水的准备。五个复制包含20个幼虫受到杀灭幼虫的生物测定forll测试concentrationnd对照组(蒸馏水)。死亡率是recordedfter曝光时间24小时。

生化参数的估计

治疗后24小时内,幼虫被从测试solutionnd与冰冷的生理盐水洗。幼虫组织匀浆(10%)0.25米冷冻蔗糖溶液中制备了均质器。匀浆是centrifugedt 700 x g 10分钟removell细胞碎片。上层清液wasdopted估计的总碳水化合物,脂类,蛋白质,lkaline phosphatasendcid磷酸酶。参数进行了一式三份。

估计总蛋白质的

洛瑞的方法wasdopted估计蛋白质含量的幼虫。反应的蛋白质Folin-Coicalteu成为紫蓝色正比于登山proteinsnd readt 620海里。进一步计算蛋白质浓度与光密度(10]。

估计总碳水化合物的

碳水化合物是纳尔逊(估计方法所描述的11]。蛋白质被逐出组织homogenatend滤液含有葡萄糖排得减少衬底加热withlkaline铜reagentnd随后withrsenomolybdate试剂处理。蓝色因此发达readt 540 nmnd蛋白质含量进行了计算。

估计脂质

总脂质在幼虫组织估计Bragdon[方法后12]。脂质含量是分开non-lipid组件氯仿-甲醇solutionnd脂质在thequeous阶段降低了sulphuriccid -重铬酸混合物。合成绿色measuredt 600 nmnd脂质浓度的计算。

Antimicrobialctivity ofgNP

In-vitrontimicrobial筛查的银纳米颗粒是由盘使用Staphylococcusureus扩散法,大肠杆菌,沙门氏菌typhimuriumnd沙门氏菌志贺氏杆菌(13]。穆勒Hintongar(尼古拉斯)获得Hi-media(孟买)是用于培养基的制备。卡那霉素(30μg /盘)秉承积极控制。

结果和对比

紫外-可见光谱

还原硝酸银的银纳米颗粒在接触真菌被逐渐增加的颜色表示发展从无色tolmost红棕色(图1)。银纳米粒子(AgNPs)合成了P。青霉素主要是紫外-可见光谱的特征。国民生产总值呈现典型的频谱maximumbsorption在250到400纳米的范围。表面等离子体的光谱ttribute响应(SPR)当electronsre ongNPs进行表面金属纳米粒子的性质。这些uniquend可调光学特性由于SPR取决于大小,shapend颗粒大小分布的纳米银离子的14]。减少银离子尤其measurednd监控用紫外可见spectrumnalysis稀释银纳米颗粒样品(图2)。

相对应的频谱展品bandt 1635.64 cm - 1 primarymide组(强峰);同样的存在bandst 1381.64 cm - 1代表了硝基化合物主要包括(CN) nd secondarymines (NH)伸展振动的蛋白质。强劲的苯基环化合物表明蛋白质与银纳米粒子的出现。蛋白质的作用是必要的reductionnd cappinground P.notatum纳米粒子合成。FTIRnalysis显然表明proteinnd其他有机化合物从P。青霉素可能参与formationnd稳定ofgNPs。P.notatumreleases the extra cellular proteinsnd enzyme molecule to stabilize nano silver ions inqueous medium [15]。

扫描电子Microscopynalysis

银纳米粒子的表征使用SEMnalysis透露,theverage银离子的大小范围从70纳米到90纳米。SEM resultslso演示的存在rodsnd六角形状ofgNPs P.notatum合成。

能量色散x射线能谱法

EDAX光谱表现出峰值表明银、氯、钙、sodiumnd氧物种。这证明了一代银nanoparticleslong thection与其他离子的真菌在中。

Antibacterialctivity银纳米粒子

Thentibacterialctivity determinedt银纳米粒子的5种不同concentrationsgainst四菌株(Staphylococcusuries thyphinurium沙门氏菌,大肠colind沙门氏菌志贺氏杆菌)的磁盘扩散methodnd结果进行了综述表1。Thentibacterialctivity被发现ofgNPs浓度增加而增加。的最大抑制区18毫米0.05 exhibitedtμg ofgNPsgainst E。杆菌紧随其后。auries、沙门氏菌、志贺氏杆菌的抑制区14毫米,17.4毫米17毫米。沙门氏菌,Shigelland E。杆菌比S.auries更敏感。effectiventibacterialctivity是由于银纳米粒子克服细菌细胞的屏障wallnd因此抑制细菌生长的16]。

Larvicidalctivity ofgNPs

2^ndnd 3^{理查德·道金斯}这种致倦库蚊幼虫龄期阶段服用增加浓度(0.5,0.7,0.9,1.1 1.3 ppm)屏幕幼虫死亡率的银纳米粒子。76.4%的死亡率指出当处理0.5 ppmgNP反对2^nd龄幼虫;而死亡率百分比被发现增加89.7% t 1.3 ppm ofgNPs治疗(表2)。LC₅₀和信用证_90年值2^nd龄幼虫分别是0.44 ppmnd 1.13 ppm。

同样的死亡率3^{理查德·道金斯}龄幼虫被治疗评价较高的浓度范围(1、2、3、4和5 ppm)。范围为3^{理查德·道金斯}龄幼虫在试点研究固定观察的基础上。国民生产总值只有40% mortalitygainst 3展出^{理查德·道金斯}龄larvaet 1 ppm浓度;然而死亡率百分比被发现增加以浓度依赖方式(表3)。最大larvicidalctivity(92%)被发现时要注意处理5 ppmgnp。LC₅₀和信用证_90年值银nanoparticlesgainst第三龄幼虫分别指出2.3 ppmnd 4.4 ppm。

的结果,很明显,最高浓度是诱导所需最大mortalitygainst 3^{理查德·道金斯}2龄幼虫相比^nd龄幼虫。这可能是由于structuralnd功能开发2^nd龄增长tottain 3^{理查德·道金斯}龄阶段。得出了银纳米颗粒浓度建议施加toxicitygainst发达幼虫阶段一致。

Kovendan etl证明20%死亡率是施加在治疗20 ppm植物extractgainst 1^圣龄幼虫。发现了相同的提取mortalityt展览89%浓度100 ppm (17]。许多研究证明,比例在蚊子的幼虫死亡率成正比杀虫剂,从而诱导毒性的浓度(18]。银纳米粒子合成的潜在广泛的真菌等Diatum capillum, Chryosposium tropicumnd点青霉发表了克里斯蒂娜第2013 Thangaraj ramasamy 2013。研究人员已清楚地表明,早些时候0.9 ppmnd 4 ppmgNPs展出mortalitygainst 2 85%^ndnd 3^{理查德·道金斯}龄幼虫。这显然表明nanoparticlesgainst毒性剂量依赖的两个不同阶段的蚊子幼虫(19]。

AgNP诱导生化参数的变化

碳水化合物含量在3^{理查德·道金斯}龄幼虫组织被发现从13.3毫克/克(控制)增加到19.33毫克/ 5 ppmgnps gft治疗。同样,碳水化合物2的水平^nd龄幼虫组织被观察到14.67毫克/克1.3 ppmgnp(处理时表2和3)。注意到,碳水化合物含量相对较高的处理幼虫比未经处理的幼虫。这些观察结果表明碳水化合物水平thegNP处理幼虫组织增加2^ndnd 3^{理查德·道金斯}龄幼虫的蚊子当处理增加了银纳米粒子的浓度。幼虫可能无法tossimilate食物从而增加碳水化合物的水平在他们的组织20.]。杀灭幼虫的应力诱导bygNP可能增强肝糖分解导致高血糖症(21]。

治疗后与银纳米颗粒,脂质水平被发现在3 90%和73%^{理查德·道金斯}nd 2^nd龄幼虫组织与控制幼虫相比。脂质含量的显著减少表明thegNP的负面影响在脂质metabolismnd脂质过氧化作用。应力诱导蚊子幼虫可能负责theltered能量代谢导致增加脂质catabolismnd下降脂质水平(22,23]。类似的负面影响在马拉松对待昆虫的卵母细胞脂质消耗,脂肪bodiesnd血淋巴是主要的发现24]。

总蛋白质含量是降低2^ndnd 3^{理查德·道金斯}当处理不同剂量ofgNP龄蚊子的幼虫。然而,减少蛋白质的水平在3相对较小^{理查德·道金斯}这种致倦库蚊的幼虫阶段。体壁larvaenddult蚊子是由chitinnd其他蛋白质whichre structuralnd功能特性。在我们的研究中,我们观察到治疗withgNP导致死者幼虫damagend破裂。观察到的结构畸形可能是由于减少了蛋白质在thegNPs对待幼虫与未经处理的控制蚊子的幼虫(相比25- - - - - -26]。杀虫干涉的激素调节蛋白质合成的干扰可能会导致正常的蛋白质代谢,rupturend破坏幼虫体内(23]。纳米颗粒诱导intoxicationnd生长阻滞在蚊子的幼虫阶段被发现与生物化学变化特别是总数的减少或增加蛋白质,碳水化合物lipidnd toscertain functionalnd生理相互作用[27- - - - - -31日]。

结论

基于p .青霉素银纳米粒子诱导mortalitygainst 2一致^ndnd 3^{理查德·道金斯}这种致倦Culix幼虫阶段。生化参数等脂质,proteinnd碳水化合物水平werelso那些嘹亮的歌与银纳米粒子的幼虫组织中毒。合成银纳米粒子werelso发现拥有相当大的抑制effectgainst细菌生长。总之,研究表明,P。青霉素合成银纳米粒子可用于控制vectornd媒介传播疾病。

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