显微镜下注射的Reelin mPFC治疗小鼠的记忆力衰弱

描述

Reelin,一个巨大的网格细胞外蛋白质协助指挥神经元多功能性和智力。一些调查表明,Reelin破碎,因为变量,例如,转换质量RELN或Reelin清晰度低,与精神分裂症相关(SCZ)。最近宣布,显微镜下注射Reelin进入脑室抢先phencyclidine-initiated知识和切实的引擎控制短缺。

Reelin改善行为异常SCZ的生物模型。在当前的审查,我们评估的影响重组Reelin显微镜下注射到平均前额叶皮层(mPFC)不寻常的做法促使mk - 801, n -甲基- d受体坏人(1]。显微镜下注射的Reelin mPFC阻断了衰弱的承认mk - 801治疗小鼠的记忆在聪明的文章承认测试(NORT) [2]。话又说回来,一个类似的治疗不影响短缺触觉发动机控制和瞬时记忆pre-beat克制,Y-labyrinth测试,分别。建立的神经基质反应Reelin, c-Fos-positive细胞的数量没有真正解决。大幅扩张c-Fos-positive细胞mPFC mk - 801治疗小鼠相比,saline-treated老鼠,这变化是窒息的显微镜下注射Reelin mPFC。一个K2360/2467A Reelin被忽视,不能将其受体增强mk - 801 - NORT促使知识短缺。这些结果建议Reelin抢先mk - 801提示确认内存衰弱,跟进其受体来抑制神经行动在老鼠的mPFC [3]。

老鼠被安置在最极端的集会6生物每个封装和跟上正常12 h光/暗周期(9:00-21:00光周期)在一个一致的温度23°C。食物和水都可以不是必不可少的。雄性C57BL / 6 j小鼠(20 - 25克;日本SLC、有限公司、日本静冈县)年龄在7和9周的被利用在行为和免疫组织化学检查。

mk - 801 (Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州)被分解在0.015毫克/毫升,注入生理盐水腹腔内的体积(i.p) 10毫升/公斤(0.15毫克/公斤,i.p)。mk - 801是一个孤独的输液前30分钟pre-beat克制(PPI)测试,Y-labyrinth测试,或教学课程在聪明的项目确认测试(NORT)。综述,所有Reelin清晰度发展整合一个PA标记N端。野外(WT) Reelin-PA标记和K2360/2467A (K2A) Reelin清晰度的发展在向量phCMV3幸运由博士j .高木涉(大阪大学)。建立phCMV3-K2A Reelin-PA标签,K2A Reelin subcloned进的萨利·地区phCMV3-WT Reelin-PA标签。准备重组Reelin, Expi293F™清晰度框架(热费希尔科学、沃尔瑟姆,MA)使用。Expi293F™细胞转染的三个完整的鼠标Reelin构建:WT, cleavage-safe P1244D / D2689K (PDDK)狂4]。

结论

精制中聚集后4天,在3000 g离心5分钟,消除细胞和垃圾。上层清液在暗中策划着对PA标签柜台代理代理覆盖点(和光纯化学公司,富士胶片kouichi大阪,日本)提炼Reelin重组。精制Reelin是集中在10-overlap Amicon超集中器(默克公司,达姆施塔特,德国)。评价重组Reelin的集中化,sds - page和执行ox-like血清蛋白(BSA)作为控制。

引用

1. 迪西尔AMF, et al。Reelin和大脑发育。Nat Neurosci.2003牧师;4:496 - 505。
2. Darcangelo G, et al。卷取机鼠标:解剖变异。Int一般牧师。2005;71:383 - 417。
3. 尹浩然,小川。卷取机上相关的基因抗原cajal-retzius神经元是一个关键分子的层状组织皮层神经元。神经元。1995;14:899 - 912。
4. 邱女士,et al .认知破坏和改变海马突触功能Reelin haploinsufficient老鼠。一般人学习Mem.2006; 85:228 - 242。