花生多基因转基因在抗非生物胁迫方面优于传统单基因性状的研究进展

摘要

花生是世界上第三大油籽作物，生长在干旱和半干旱地区。作物生长在雨养条件下往往暴露在恶劣的环境中非生物压力这严重影响了作物生产和产量。在作物中引入抗逆性性状可以提高作物的抗逆性，减轻作物在胁迫条件下的产量损失。的成功繁殖开发耐胁迫作物品种的方法是由几个研究领域的努力确定的，包括植物生理学分子生物学等遗传学．此外，育种计划的其他主要限制是物种壁垒和基因组不相容。因此，利用新的分子生物学工具揭示耐胁迫的重要机制，并通过转基因方法过表达胁迫特异性基因来改造耐胁迫作物仍然是一个可行的选择。本文主要综述了花生转基因作物在干旱、盐和氧化胁迫等非生物胁迫下，通过过度表达调控代谢途径、细胞成分和胁迫响应途径的候选基因而获得的抗干旱、盐和氧化胁迫转基因作物。综述了转基因花生事件的意义和性状能力对提高花生非生物胁迫耐受性的重要性。本文还着重介绍了花生转基因事件研究的新进展以及多基因转基因与单基因转基因相比在提高花生非生物耐受力方面的新颖性。

关键字

花生,基因转移，非生物胁迫，共表达，多基因转基因

简介

非生物压力是主要的制约因素作物生长在干旱和半干旱地区，改变植物内部稳态并对生长和生产力产生不利影响的植物[1-3.］．在非生物胁迫中，干旱和盐碱化在自然系统和农业系统中较为普遍，严重影响作物品质，造成重大产量损失;因此，获得了研究人员的极大关注[4，5］．亚洲、非洲、南美和北美等半干旱热带地区是花生种植的主要地区，产量占全球总产量的60%，干旱和盐碱化是影响花生产量和质量的主要压力源[6-8］．植物适应了不同的非生物胁迫耐受机制来应对变化环境通过改变细胞代谢维持细胞膨胀，渗透调节等条件[9]，转录因子编码基因的差异表达[10]、生物合成途径中的关键酶[11，12]以及与压力感知和细胞信号传递有关的蛋白质[13，14］．

花生(花生)是继大豆和油菜籽之后的第三大油料作物，全球产量6066万吨，全球种植面积为3220万公顷，平均产量为1.88吨/公顷。印度是仅次于中国的第二大花生生产国，产量为685万吨，种植面积为580万公顷[15］．它是主要的食用油料种子作物之一，含有40-50%的油脂、蛋白质(22-30%)、矿物质(P、Ca、Mg和K)、碳水化合物和维生素(E、K和B组)，也可用作牲畜饲料[16-19］．落花生广泛种植在世界干旱和半干旱地区的雨养条件下;由于它的生产取决于一个特定地区的年降雨量，而该地区的年降雨量不时变化，因此它更容易受到干旱、盐度、高温和重金属胁迫等非生物胁迫[20.-22］．

在这种情况下，需要使用可靠的技术来提高花生在非生物胁迫条件下的生产力，以获得最大的成功率来应对这些不利条件。传统技术存在许多局限性，如物种障碍、基因组不亲和、授粉等，使其无法开发理想的作物农艺特征(23，24］．基因工程方法已被证明比传统方法更通用和相对更快，并有助于克服开发具有所需性状的作物植物的所有障碍[25-27］．几位研究人员[28-36]通过基因工程的方法，将tf基因和代谢途径的关键酶等不同基因渗透到花生中，成功开发出了抗不同生物和非生物胁迫的转基因花生。

非生物胁迫耐受性是一个多基因性状，涉及不同的信号级联和机制。尽管过度表达单基因的转基因植物取得了成功，但这并不足以实现作物对非生物胁迫的预期耐受性，因为这是一个复杂的现象，因此需要在各种代谢途径和数量性状中共表达多个基因[37］．在过去的二十年中，研究人员一直致力于通过引入多个基因(多基因转移，MGT)而不是单基因转移来开发具有更多耐受性性状的转基因[38-41］．拟南芥等模式植物中多个基因的共表达[42]、烟草[43，44]显示出比单基因转基因更强的抗非生物胁迫能力，在玉米等作物植物中也报道了类似的结果[45]，甘蔗[46]和花生[47，48］．

到目前为止，关于花生转基因耐非生物胁迫的综述报道主要集中在干旱和盐度[6］．因此，有必要对其他非生物胁迫耐受性事件和近年来花生转基因的研究成果进行文献综述。本文以干旱、盐碱、高温、氧化胁迫等方面的研究为例，综述了花生非生物抗逆性转基因的技术和性状研究进展。本文重点介绍了转基因技术在开发多基因转基因方面的进展，即通过插入多个基因来获得具有抗非生物胁迫能力的花生转基因。本文共讨论了17种花生转基因，这些转基因是通过单基因和多基因调控而获得的，这些基因被报道参与各种非生物胁迫耐受机制(表1）.

表1:利用基因工程技术开发了花生转基因作物，以适应不同的非生物胁迫。

花生转基因单基因抗非生物胁迫

抗旱性

异戊基转移酶(IPT)是细胞分裂素生物合成途径的关键酶，也被报道参与了干旱胁迫的耐受。成熟条件下过表达拟南芥IPT基因和胁迫诱导启动子SARK [49]导致更高的光合效率，与实验室和野外条件下干旱胁迫下的野生型植物相比，这与提高生物量有关。在减少灌溉条件下，这些转基因作物的气孔导度和蒸腾效率也较高[50］．Bhatnagar等人[51]通过在两种不同启动子下过表达胁迫诱导转录因子基因DREB1A，开发了花生转基因;a). CaMV35s启动子和b). rd29A作为胁迫诱导启动子在种子萌发四周后表现出不同的生长模式。在水分胁迫条件下，转基因植物的蒸腾效率高于野生型植物，产量较高[52］．在rd29A启动子下过表达DREB1A也能提高收获指数，并与较高的根冠比相关[53]，并在渗湿计系统中显示出较好的深层根系[54］．AtDREB1A在干旱敏感花生品种GG20中过表达可提高保水能力，通过脯氨酸积累提高叶绿素含量渗透调节[55］．曼朱拉莎等人[56]过表达了一种植物DNA解旋酶基因PDH45，并报道了转基因花生在水分胁迫下增加了内在细胞水平的耐受性，还报道了转基因的绿色性质，通过保持优越的叶肉效率和低Δ13 C，可用于衡量水分利用效率(WUE)。NAC转录因子基因AtNAC2在花生中过表达后，在水分胁迫条件下，与野生型相比，花生的保水能力增强，保持绿色，膜损伤减少[57］．过表达MuNAC4转基因花生表现出比野生型植物更强的侧根发育、渗透调节和更好的抗氧化防御机制，从而增强了对干旱的耐受性[32］．

甘露醇，一种相容的溶质，据报道在植物缺水胁迫时积累[58］．Bhauso等人[59]转化了一种细菌mtlD基因，该基因编码甘露醇1-磷酸脱氢酶，该酶可将甘露醇1-磷酸转化为甘露醇[60]变成落花生。mtlD基因过表达转基因甘露醇生物合成量比野生型增加1.3 ~ 1.8倍，与耐旱性呈正相关。这些mtlD过表达的花生转基因材料也被报道保持得更好光合作用在干燥实验中，与野生型植物相比，机械和减少了氧化损伤[61］．从大叶花生(Macrotyloma uniflorum)中分离到一个新的植物特异性转录因子WRKY3，用于花生转基因的开发。在干旱胁迫条件下，MuWRKY3转基因基因通过积累渗透物、ROS清除系统和抗氧化机制提高了细胞水平的耐受性[62］．

耐盐应力

关于花生抗盐胁迫转基因的报道只有两篇。Vadawale等人[63]过表达了一种功能性酶胆碱氧化酶(COX)，据报道，这种酶与甜菜碱生物合成有关。甜菜碱是植物在非生物胁迫下合成的渗透保护剂之一，主要是在盐胁迫下[64］．他们报告了转基因植物在100 mM NaCl胁迫下的存活率，而未转基因植物则表现出叶片边缘卷曲和烧焦的现象。他们将这些结果与COX基因的过表达和甜菜碱合成的增加联系起来[63］．在150 mM NaCl胁迫下，表达AtNHX1的花生植株生长良好，光合速率、气孔导度和蒸腾速率较高[65］．盐生植物Salicornia brachiate过氧化物酶(pAPX)基因的过表达使花生在150 mM NaCl胁迫下的叶绿素含量和RWC高于WT，电解质泄漏减少[35］．

抗多种非生物胁迫

干旱和盐度是主要的非生物胁迫;大约8.3亿公顷。均受到土壤盐度的影响[66]影响到印度约761万公顷土地[67]在世界范围内，20%的陆地表面在任何时候都受到干旱的影响[68］．因此，开发具有多重非生物胁迫耐受性的花生转基因作物对作物改良具有重要意义。

NHX1是Na⁺/小时⁺反转运蛋白存在于液泡膜上，参与钠的区隔化⁺离子进入液泡，对植物细胞有害[69］．拟南芥NHX1基因在花生中过表达可以通过吸收更多的Na来提高耐旱性和耐盐性⁺在胁迫条件下，液泡中脯氨酸的积累比野生型植物多。在高浓度NaCl (200 mM)胁迫和干旱胁迫下，转基因植株也能存活，而WT植株则无法存活[28］．另一种来自拟南芥液泡膜蛋白H⁺-焦磷酸酶是一种由AtAVP1编码的质子泵，通过农杆菌介导的基因转化将其转移到花生中，与野生型相比，转基因花生在干旱和盐胁迫下均保持了形态性状。胁迫条件下转基因植物较高的叶绿素含量、光合效率和蒸腾速率均支持上述结果[70］．Tiwari等人[71]通过过表达SbASR-1基因，开发了花生转基因技术。SbASR-1基因是从咸水杨(Salicornia brachiata)中克隆的，该基因编码脱落酸胁迫成熟1 (ASR-1)蛋白，是LEA家族中的一组蛋白。与野生型植物相比，在盐胁迫和干旱胁迫条件下，转基因植物的叶绿素含量减少较少，保水能力较高，脯氨酸、可溶性糖等溶质相容性更好。花生中Prd29A: AtHDG11基因盒的过表达导致多个非生物耐胁迫基因的上调[72]，它们负责抗氧化酶的表达、相容溶质的积累、ROS清除酶以及在干旱和盐胁迫条件下提高内在水分利用效率的基因。在干旱和盐胁迫条件下，这些发现与更健康的形态性状和产量呈正相关[72］．

据报道，在LEA启动子下过表达BcZAT12的花生转基因在NaCl和PEG胁迫下通过积累更多的脯氨酸和提高渗透调节和保水能力，赋予了多重非生物胁迫耐受力。这些转基因也显示了增加的表达抗氧化剂酶系统和更好的表型性状，如较少的叶片枯萎，这与胁迫条件下较少的叶绿素减少有关[73］．真核翻译起始因子基因(eIF4A)狼尾草glaucumSanthosh Rama Bhadra Rao等人报道转化为花生并赋予非生物耐受力[74］．在模拟胁迫条件下，通过保持较高的膜完整性和优越的表型性状，转基因植株保持了较高的叶绿素保留率，增加了抗氧化酶的表达，并改善了水分保持性。

花生抗非生物胁迫的多基因转基因研究

非生物胁迫宽容是一个复杂的现象，涉及到许多基因及其产物的参与[75，76］．科学家们通过操纵参与生化途径的单个基因或调控下游基因，在几种植物物种中开发了数百种转基因技术。这些转基因成功地赋予了对特定胁迫的耐受性，但没有达到所需的多重胁迫耐受性水平[77］．为了获得作物的多重抗胁迫能力，研究人员致力于将多个基因同时引入植物系统。目前研究人员主要采用的多基因转移方法有三种:常规方法、再转化和共转化，其中共转化是可靠且省时的选择[78］．共转化是指采用多点克隆方法将两个或两个以上的基因同时由一个单独的载体携带，或将所有基因同时由一个载体携带。在多位点克隆策略中，两个或多个基因通过经典的限制消化和连接反应或涉及重组的先进网关克隆技术连接在一个载体上。多基因转移在作物植物中的应用已有多篇报道，本文综述了利用多基因转移实现花生抗非生物胁迫转基因的研究进展。

普鲁特维等人[47]利用改良GATEWAY克隆技术，在本构启动子CaMV35s下共表达拟南芥TF基因AtDREB2A、AtHB7和AtABF3，构建了花生品种TMV2 [37]并赋予转基因植物更好的耐旱性和耐盐性。这些TFs基因的共表达有助于减少细胞膜损伤并保持较高的叶绿素含量。他们还改变了几个下游基因的表达，这些基因涉及获得性耐受力(GRX，醛还原酶，丝氨酸苏氨酸激酶样蛋白，Rbx1，脯氨酸氨基肽酶，HSP70, DIP和Lea4)，渗透压产生显示了在应激条件下提高的细胞水平耐受力。同时表达从不同来源植物中克隆的Alfin1、PgHSF4和PDH45基因，并在3种不同表达元件下过表达，构建了花生多基因转基因。在缺水条件下，转基因植株表现出较野生型植株更高的生长和生产力，从而提高了抗逆性。在水分胁迫下，转基因植株根系生长加快，冠层温度降低，RWC提高。转基因植物表现出乙烯利和甲基紫精诱导的氧化胁迫耐受性提高，tf对几种胁迫响应基因的下游调控揭示了转基因植物通过减少氧化损伤来增强抗旱性[48］．

结论

目前综述了花生转基因中过表达酶、渗透保护剂和转录因子编码基因的研究进展，这些基因在干旱、盐度和氧化应激等非生物胁迫中起调控作用。与单基因转基因相比，表达多基因的转基因植物被证明具有更高的抗非生物胁迫能力。因此，多基因转基因技术是提高花生等半干旱作物非生物胁迫耐受性以克服气候变化不利条件的可行选择。多个基因的叠加和表达也提供了对多种非生物胁迫的耐受性。此外，多基因策略的优势在于它具有成本效益，节省时间，减少了几个可选择标记的使用，而且多个基因叠加在一起可以最大限度地减少基因在后代中分离的机会。

鸣谢

BV非常感谢CSIR-SRF奖学金(编号:09/383(0051)/2016-EMR-I)， CS感谢DBTGOI的财政支持(BT/PR15503/AGR/02/913/2015)。日期:09-05-2017)。AMAJS承认来自新德里UGC的DS Kothari博士后奖学金(BL/16-17/0364)。

参考文献

1. Barnabas B等。干旱和热胁迫对谷物繁殖过程的影响。植物细胞环境。2008;31:11-38。
2. Boyer JS和Westgate ME。在有限的水条件下，粮食产量会增加。中国科学(d辑)，2004;
3. Boyer JS。植物生产力与环境。科学。1982;218:443 - 448。
4. Verslues PE，等。量化抗旱性的方法和概念，盐和冻结，影响植物水分状况的非生物胁迫。植物J. 2006;45:523-539。
5. Mahajan S和Tuteja N.寒冷，盐度和干旱胁迫:概述。生物化学学报，2005;
6. Krishna G等。花生基因工程研究进展综述。中国生物技术学报，2015;13(2):344 - 344。
7. Reddy TY和Anbumozhi VRV。花生(Arachis hypogaea L.)对干旱胁迫的生理反应及其改良——综述植物生长学报。2003;41:75-88。
8. Wright GC和Nageswara Rao RC。花生水关系。见:花生作物-改进的科学基础(Smartt J Edn)。伦敦:查普曼和霍尔出版社，1994年;第281-325页。
9. 渗透调节是支持植物生产的主要干旱胁迫适应引擎。中国生物医学工程学报，2017;
10. Kasuga M，等。通过单一胁迫诱导转录因子的基因转移提高植物的耐旱性、耐盐性和抗冻性。中国生物工程学报。1999;17:287-291。
11. 脱落酸的生物合成和分解代谢。植物学报，2005;
12. 姚东，等。转录酶分析揭示了盐胁迫在棉花(Gossypium hirsutum L.)根部调控的生物学过程和关键途径。基因组学。2011;98:47-55。
13. Shinozaki K和Dennis ES。细胞信号和基因调控信号转导和基因表达谱的全局分析。植物学报，2003;6:405-409。
14. 朱军。植物盐胁迫与干旱胁迫信号转导。植物学报，2002;
15. http://www.fao.org/faostat/en/#data.QC
16. 艾伦ON和艾伦EK。豆科。一本关于特点、用途和结节的资料书。威斯康星大学出版社，麦迪逊，威斯康星州。1981; p: 812。
17. Dwivedi SL，等。基因型和环境对花生含油量、油质参数的影响及其相关性花生科学1993;20:84-89。
18. Knauft D和Akins OP.种质改良和育种的最新方法。在:花生科学的进展(Pattee HE和Stalker IIT Edn)。静:然后。1995; pp: 54 - 94。
19. Savage GP和Keenan JI。花生仁的成分及营养价值。见:花生作物:改进的科学基础(Smart J Edn)。查普曼和霍尔，伦敦，1994;第173-213页。
20. Cuc LM，等。新型微卫星标记的分离、鉴定及其在栽培花生多样性评价中的应用。BMC植物生物学，2008;8:55。
21. 梅斯ES，等。花生(Arachis hypogaea L.)栽培抗锈病和晚叶斑病种质资源的SSR分析Euphytica。2006;152:317 - 330。
22. Nareshkumar A，等。pb胁迫对两个花生品种生长和矿质状况的影响。植物科学进展(英文版);
23. Sharma KK和Ortiz R.在半干旱热带地区应用遗传转化改良作物的计划。中国生物医学工程学报。2000;36:83-92。
24. 跟踪者HT和莫斯JP。花生属的物种形成、细胞遗传学及利用。Adv Agron, 1987;41:1-40。
25. Bansal S，等。高粱(sorghum bicolor L. moench) var. m35 -1 γ-kafirin基因的分离和短暂胚乳表达，用于转基因基因的渐渗分析。中国农业科学(英文版)，2008;
26. Basu S，等。植物对干旱胁迫的适应。F1000 Res. 2016;5:1-10。
27. https://www.farmprogress.com/management/traditional-plant-breeding-vs-genetic-engineering-primer
28. Asif MA，等。在转基因花生(Arachis hypogaea L.)中，AtNHX1基因的表达增强了花生的耐盐性和耐旱性。生物工程学报。2011;49:250-256。
29. Bhatnagar M，等。一种花生无标记转基因植株的高效生产方法。植物学报，2010;29:495-502。
30. 朱毅，等。花生(Arachis hypogaea L.)转化效率的提高及转基因拷贝数的实时定量PCR测定。中国生物医学工程学报，2013;29(3):366 - 366。
31. Iqbal MM，等。水稻几丁质酶基因在转基因花生(Arachis hypogaea L.)中过表达可提高花生对叶斑病的抗性。生物工程学报，2012;
32. Pandurangaiah M，等。大毛茛(Macrotyloma uniflorum Lam。Verdc)。花生NAC转录因子(MuNAC4)具有增强的耐旱性。生物工程学报。2014;56:758-769。
33. 花生转化烟草几丁质酶基因:转化子对叶斑病的可变反应。中国植物科学，2001;26(2):344 - 344。
34. 沙玛KK和anjaaya V.通过农杆菌介导的基因转化生产花生转基因植株的一种有效方法。植物科学，2000;39(4):344 - 344。
35. 辛格N，等。过氧化物酶体抗坏血酸过氧化物酶(SbpAPX)基因异位过度表达使转基因花生(Arachis hypogaea)具有耐盐性。基因。2014;547:119 - 125。
36. Tiwari S，等。从诱导启动子中表达δ‐内毒素Cry1EC可保护花生(Arachis hypogaea L.)植物的昆虫。中国生物医学工程学报(英文版)，2011;
37. Vemanna RS，等。一种改良的用于植物基因巩固的多位点Gateway克隆策略。生物工程学报，2013;
38. 转基因植物中的基因堆叠——21世纪植物生物技术的挑战。植物科学与技术，2005;3(2):344 - 344。
39. Naqvi S，等。越多越好:植物的多基因工程。植物科学进展，2010;15:48-56。
40. Le Martret B等。烟草叶绿体转化基因编码脱氢抗坏血酸还原酶、谷胱甘肽还原酶和谷胱甘肽s转移酶，显示出改变抗氧化代谢和提高非生物胁迫耐受性。中国生物技术学报，2011;9:366 - 366。
41. Zorrilla-Lopez U，等。利用多基因转化工程植物代谢途径。中国生物医学工程杂志，2013;
42. Babitha KC，等。AtbHLH17和AtWRKY28的共表达使拟南芥对非生物胁迫具有抗性。转基因res 2013;22:327-341。
43. Garg B等。PDH45与EPSPS基因同时表达可提高转基因烟草的耐盐性和抗除草剂性。中国植物科学，2017;8:364。
44. Singla-Pareek SL，等。烟草中乙醛酶途径的基因工程可以增强其耐盐性。美国国家科学研究院。2003; 100:14672 - 14677。
45. Nguyen TX，等。T3型玉米(Zea mays L.)中HVA1和mtlD基因的基因聚合使其具有耐旱和耐盐能力，同时增加了作物生物量。Int J Agron, 2013;2013: 598163。
46. 奥古斯丁SM等。过表达EaDREB2并与豌豆DNA解旋酶基因(PDH45)聚合可增强甘蔗(Saccharum sp . hybrid)的耐旱性和耐盐性。植物细胞。2015;34:247-263。
47. Pruthvi V等。同时表达非生物胁迫应答转录因子AtDREB2A、AtHB7和AtABF3可以提高花生(Arachis hypogaea L.)的耐盐性和耐旱性。公共科学图书馆，2014;9:e111152。
48. Ramu VS，等。与特定干旱适应性性状相关的调控基因同时表达，提高了花生的干旱适应性。中国生物工程学报，2016;14(2):344 - 344。
49. Rivero RM，等。水分亏缺时细胞分裂素依赖性光呼吸和光合作用的保护。植物学报。2009;30:1530-1540。
50. 秦浩，等。花生异戊烯基转移酶基因(IPT)在田间条件下的调控表达显著提高了耐旱性和产量。植物科学进展。2011;
51. Bhatnagar-Mathur P，等。胁迫诱导AtDREB1A基因在转基因花生(Arachis hypogaea L.)中的表达提高了限水条件下的蒸腾效率。植物细胞，2007;26:2071-2082。
52. Bhatnagar-Mathur P，等。过表达DREB1A转录因子的转基因花生在干旱胁迫下产量较高。Mol Breed. 2014;33:327-340。
53. Shridhar Rao J，等。在间歇性干旱胁迫下，过表达rd29A: DREB1A基因的转基因花生获得了更好的根芽比，从而提高了收获指数。中国农业科学，2012;10:1-7。
54. Vadez V等。DREB1A促进花生深层根系发育，增加水分胁迫下的水分提取。植物学报。2013;15:45-52。
55. Sarkar T，等。胁迫诱导表达AtDREB1A转录因子的转基因花生(Arachis hypogaea L.)对土壤水分亏缺胁迫具有耐受性。前沿植物科学，2016;7:935。
56. Manjulatha M，等。豌豆DNA解旋酶(PDH45)在花生(Arachis hypogaea L.)中过表达可提高细胞水平对干旱胁迫的耐受性和生产力。生物工程学报。2014;56:111-125。
57. Patil M，等。花生(Arachis hypogaea L.)过表达AtNAC2 (ANAC092)可提高非生物胁迫耐受性。植物生物技术，2014;8:161-169。
58. 王毅，等。法尼基化在植物抗旱性和产量保护中的分子剪裁。植物学报，2005;43:413-424。
59. Bhauso TD，等。花生过量表达细菌mtlD基因可通过甘露醇积累提高抗旱性。ScientificWorldJournal。2014; 2014:125967。
60. 耐应力代谢工程:安装渗透保护剂合成途径。植物学报。2000;86:709-716。
61. Patel KG，等。在土壤水分亏缺胁迫下，过表达mtlD基因的转基因花生(Arachis hypogaea L.)的光合、生理生化和产量参数均有改善。中国植物科学，2017;8:1881。
62. Kiranmai K，等。一种新的WRKY转录因子MuWRKY3 (Macrotyloma uniflorum Lam.)Verdc.)增强了转基因花生(Arachis hypogaea L.)植株的抗旱性。植物科学，2018;9:346。
63. Vadawale A，等。花生GG20的cox基因转化及其耐盐性研究。中国生物医学工程杂志，2012;
64. Hayashi H，等。具有胆碱氧化酶细菌基因(codA)的转基因拟南芥种子在高盐条件下的萌发率提高。植物学报1998;111:357-362。
65. Banjara M，等。拟南芥钠/质子逆向转运蛋白基因(AtNHX1)在花生中的表达及其耐盐性研究植物生物技术，2012;6:59-67。
66. 马丁内斯-贝尔特兰J和曼祖尔CL。世界盐度问题概述和粮农组织解决这一问题的战略。见:美国加州河滨市国际盐度论坛论文集。2005年,页:311 - 313。
67. 辛格R，等。落花生品种在种子萌发和幼苗早期生长期间对盐度敏感性的变化。中国农业科学，2007;5:1-7。
68. Burke EJ，等。利用哈德利中心气候模式模拟全球干旱的最近演变和对21世纪的预测。水文气象学报。2006;7:1113-1125。
69. Yamaguchi T和Blumwald E.开发耐盐作物:挑战和机遇。植物科学进展，2005;
70. 秦浩，等。拟南芥液泡H⁺花生中-焦磷酸酶基因AVP1可提高花生的耐旱耐盐性。植物学报，2013;7:345-355。
71. Tiwari V，等。从盐生植物Salicornia brachiata克隆的SbASR-1基因的渐渗增强了转基因花生(Arachis hypogaea)的耐盐性和耐旱性，并作为转录因子发挥作用。科学通报。2015;10:e0131567。
72. Banavath JN，等。胁迫诱导的AtHDG11过表达可提高花生(Arachis hypogaea L.)的抗旱和耐盐能力。前沿化学，2018;6:34。
73. 在非生物胁迫下表达ZAT12转录因子基因的转基因花生(Arachis hypogaea L.)的特性(博士论文)。JAU, JUNAGADH。2017; p: 174。
74. Santosh Rama Bhadra Rao T，等。灰蓝狼尾草真核翻译起始因子4A (PgeIF4A)的表达提高了花生的耐旱性、盐度和氧化应激能力。中国植物科学，2017;8:453。
75. 梅泽T，等。植物抗旱性工程:发现和定制基因，开启未来。生物技术。2006;17:113-122。
76. 朱镕基JK。植物的非生物胁迫信号及其响应。细胞,2016;167:313 - 324。
77. Varshney RK，等。多变气候下用于作物改良的农业生物技术:希望还是炒作?植物科学进展，2011;16:363-371。
78. 高尔P和辛格AK。作物耐非生物胁迫的单基因与多基因转移方法。In:对抗植物非生物胁迫耐受性的生化、生理和分子途径。2018年,页:255 - 275。