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奶牛繁殖的优化

Jain G C

水牛生理和生殖部,ICAR- CIRB,希萨-印度

*通讯作者:
Jain G C
水牛生理和生殖部,ICAR- CIRB,希萨-印度
电话:0166227 6631
电子邮件: (电子邮件保护)

收到日期:2015年6月15日接受日期:2015年8月7日发表日期:8月10日

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摘要

繁殖性能是决定牲畜生产经济性的重要因素之一。导致亚生育力或不孕症的因素大致可分为遗传、生理、营养、心理、环境、病理、心理、免疫不相容和免疫缺陷综合征。考虑到这些因素,我们计划了一个多方面的研究项目,包括1000头杂交奶牛和默拉水牛,50只来自ICAR的NDRI和CIRB研究所的外来杂交山羊,印度Karnal周围32个村庄的几千头农村水牛和奶牛,印度比卡内尔兽医和动物科学学院的30只雄性绵羊,以及来自屠宰场的100只水牛生殖器官。潘纳加尔兽医和动物科学学院的生物计量学。
水牛生殖器生物测定法:确保提高繁殖效率的第一步是对水牛生殖器进行生物测定,以评估人工育种过程中所涉及的必要操作。本研究对100头成年水牛的宫颈、子宫、子宫角、输卵管和卵巢进行了测量,结果表明,这些器官都比国外品种的牛略小。左卵巢平均长2.44cm,宽1.34cm,厚1.58cm,重3.32 gm.右卵巢平均长2.36cm,宽1.37cm,厚1.64 cm,重3.13 gm.[1]。
自体免疫公羊精液的抗原性研究。
自体免疫雄性绵羊精子和精浆抗原的电泳。农场和农村奶牛生殖障碍的诱导和同步发情矫正。监测卵泡和黄体发育过程使用卵巢超声,腹腔镜,手术(开腹)和非手术程序。
收集和保存男女胚浆,超排卵,胚胎收集和移植(ETT), IVM, IVF和克隆。
孕产期、复种、产褥期和产后生殖阶段宏微量矿物质的估计。
基于RIA检测血浆和乳中孕激素的诱导分娩和早期妊娠诊断(EPD
在出生后、生长、青春期、成熟、生殖周期(卵泡和排卵)、产褥期、产后和怀孕的各个阶段监测内分泌资料,包括前列腺素F2α、FSH、LH、雌二醇-17β、孕酮、皮质醇和催乳素。
不同季节体重和断奶对母水牛犊牛内分泌特征的影响。
最近的一些技术和策略,如使用有性生殖的种质、干细胞、自动热检测设备、用激光检测技术进行性别鉴定、(LTD)和喂养生长激素(bST)等,都需要纳入这些计划。然而,基因组学、蛋白质组学和生物信息学的使用无疑将为研究人员提供更好的理解,以提高动物的高效繁殖过程。其他正在出现的辅助参数将是动物园鼻子和公共卫生方面的结合。

关键字

发情,新生儿,青春期,激素,矿物质,超排卵,输卵管通畅,生殖细胞,生物计量学,胚胎,受精,免疫学,培养,克隆,组织病理学,超声检查,放射免疫测定,ETT, IVF, EPD, TPT

简介

繁殖性能是决定牲畜生产经济性的重要因素之一。导致亚生育力或不孕症的因素大致可分为遗传、生理、营养、心理、环境、病理、心理、免疫不相容和免疫缺陷综合征。考虑到这些因素,计划了一个多方面的研究项目,包括1000头杂交奶牛,Murrah水牛,50只来自ICAR的NDRI和CIRB研究所的异国杂交山羊,卡纳-印度周围32个村庄的数千头农村水牛和奶牛,印度比卡内尔兽医和动物科学学院的30只雄性绵羊,以及来自巴特勒(UP)兽医和动物科学学院的100只水牛生殖器官,用于生物测量。

在印度,我很荣幸能够成为评估前列腺素F2α在生长和繁殖各个阶段的杂交奶牛、水牛和山羊的先驱。建立了现代化的设施,通过放射免疫测定(RIA)测量大多数激素,如卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH),催乳素(PRL),生长激素(GH),孕酮(P4),雌二醇-17β(E2),皮质醇和胃泌素,包括和不提取血浆和牛奶。

奶牛的生殖障碍和产后生育状况

在NDRI Karnal India进行了为期三年的调查,调查了荷斯坦黑斑和泽布(KF 756)、布朗瑞士和泽布(KS 677)、萨希瓦尔(145)和默拉水牛(492)的产产期和产后生殖疾病患病率,发现KS、KF、萨希瓦尔和默拉水牛的患病率分别为38.1%、26.7%、15.9%和15.7%。在包括水牛在内的Zebu动物中,流产和死产形式的产前损失也较低。然而,与杂交奶牛相比,默拉水牛难产率更高(2.6%)。因此,很难提出任何假设,说明与KF相比,KS的杂交具有更高的生殖障碍率[2].

水牛生殖器的生物特征

确保提高繁殖效率的第一步是对水牛生殖器进行生物测定,以评估人工繁殖过程中所涉及的必要操作,并监测受精后的所有事件。本研究对100头成年水牛的宫颈、子宫、子宫角、输卵管和卵巢进行了测量,结果表明,这些器官都比国外品种的牛略小。左卵巢平均长2.44 cm,宽1.34 cm,厚1.58 cm,重3.32 gm,右卵巢平均长2.36 cm,宽1.37 cm,厚1.64 cm,重3.13 gm [1].

产后奶牛发情的诱导

产后30天常规定期检查,Lugols碘(10-20 ml, 0.5%)灌洗,每虚弱两次,在未出现生殖器感染的情况下,尝试使用催情药物如Prajana, Uteroline, Fertivet, Secrodyl, Folligon/PMSG和前列腺素F2α(lutalyze)。表现出生殖器感染的动物在子宫内应用(I/U) lugols溶液10- 20ml(0.5%),隔天使用两次,在某些情况下,在最后一次应用lugols溶液后使用催产素50iu I/m, I/U隔天注射三次胰霉素200万(20ml)或土霉素(10ml),或gentamycin(2-5 ml)或两次注射metrijet (Intervet),最后注射PGF2α 25 mg,间隔12天两次注射。与其他药物相比,PGF2α在诱导发情同步方面的反应总体上非常令人鼓舞。还在数百头农村、农场饲养和杂交饲养的奶牛、水牛和山羊中进行了试验,这些奶牛在PGF2α处理后96小时内产生反应[3.].由于早期胚胎死亡造成的损失非常严重,可能是降低奶牛、水牛和山羊繁殖效率的主要因素,因此对这些出现这种问题的动物进一步进行了超声波、内窥镜(在某些情况下)、剖腹探查、输卵管开放和原子光谱仪的矿物剖面和RIA的生殖激素剖面的筛选。

水牛产后卵巢反应的诱导

采用Gn-Rh-200 μg (n=8)、Lutalyse-25 mg I/m (n=26)、foligon -500 IU (n=11)、750 IU (n=14)、1000 IU (n=8)和Synchromate-B耳内植入物(n=8)诱导产后水牛奶牛发情。将处理组的卵巢总体活性与未处理组(n=60)进行比较,发现Gn-Rh、Lutalyse、Folligon各组、Synchromate- B和对照组的发情反应分别为37.5、50.0、18.0、63.0、50.0、25.0和26.7% [4].

奶牛产后子宫内膜炎

在Karan Swiss(123)、Karan Friesian(91)、Sahiwal(7)奶牛和水牛(23)的产后子宫内膜炎病例中尝试了由不同药物组成的宫内治疗。使用的药物为美妥捷(n=17)、土霉素液(n=53)、倍他定(n=22)、老兵LA (n=81)、呋瑞亚(n=7),临床治愈平均时间分别为16、18、20、18、19天,各治疗组在产后子宫内膜炎病例中差异无统计学意义[5].

催情药物在农村奶牛体内的比较疗效

与农场饲养的动物相比,农村奶牛(2843)生殖障碍的总体发生率非常低。对1712只非循环品种的奶牛进行卵巢按摩、宫颈涂碘漆、Herbogyne胶囊、含碘漆的可可片、CL去核、含碘漆的矿物混合物、维生素A和D3和矿物混合物8种处理,诱导发情率分别为40%、51%、52%、47%、79、47、62和44%。然而,在用矿物混合物处理的动物中,受孕率出现了不同的趋势,这些矿物混合物包括lugols油漆(70)、Herbogyne胶囊(60)、宫颈上的lugols油漆(57)、古柯片(56)、维生素a和D3(54)、CL去核(33)和矿物混合物(27%)[6].

减少奶牛重复繁殖的药物疗效比较

为了尽量减少发病率,对329只重复繁殖的奶牛进行了各种药物治疗,这些奶牛表现出病理和形态上的生殖器状况。这些重复繁殖的动物被进一步分为两组,表现出轻微感染程度的动物(组1)和表现出亚临床和非特异性病理状况的动物(组2)。分别给予I/U型液态土霉素溶液、Mast - alone-U、苯青霉素G钠和0.5%的lugols溶液。另一组224只没有生殖器感染史的动物在常规人工智能期间给予P4、HCG和催产素I/m。两组的反应都是在42天内受孕的基础上记录的(2个发情周期)。0.05%鲁戈洛斯碘溶液的效果最好(67%),其次是液体土霉素和苄青霉素G钠(52 ~ 53%)和单用Mast - u(41%)。而第二组的反应是125 mg P4(68%)最有效,其次是HCG(65%)和催产素(64%)。本研究提示,在重复养殖的奶牛中,轻度感染的动物和未感染P4和HCG的动物使用lugols碘溶液可将发病率降至最低。然而,还需要进一步的试验来证实这些发现[7].

输卵管效力试验

在一些重复繁殖的动物中进行了腹腔镜输卵管通畅试验,即使经过治疗和四次授精也没有受孕。用50ml注射器将温和的蓝色染料溶液(50ml)注入子宫-输卵管交界处。在所有这些情况下,染料通过整个输卵管到达卵巢绒毛和腹腔,确保输卵管没有堵塞。做这个实验只是为了确定受孕失败是否因为动物输卵管的一些堵塞。

早期妊娠诊断(EPD)基于牛奶和血浆P4水平

通过不经提取和纯化的直接RIA法估计羊奶中P4水平以监测山羊和水牛的早期妊娠。采集山羊交配后第19、21、25和27天的乳汁样品(各20 ml)。妊娠山羊乳汁中P4浓度极显著(P>0.01),在妊娠中期达到峰值(39.49±3.23 ng/ml)。该测试的准确度为100%(13/ 13,10 / 10,6 / 6,4 /4),以7.25 ng/ml或以上的水平作为怀孕的指示[8].在水牛奶中进行的类似试验也得到了几乎相同的结果[9].

山羊分娩诱导

8只妊娠山羊在预产期前10天分别给予PGF2α(甲诺前列素20 mg)和地塞米松(地塞米松20 mg)终止妊娠。对照组(n=4只)不进行任何处理。所有被诱导的山羊与健康的孩子都有正常的玩笑。PGF2α和地塞米松诱导的山羊分娩时间分别为35.3 h和54.66 h。对照组和诱导组胎盘在诱导后2 ~ 5小时内脱落。男女儿童相应体重平均为3.22 kgs,差异无统计学意义[10].

奶牛胚胎移植技术

1988 ~ 1994年,采用FSH-P、FSH-E、PMSG、OVAGEN、FOLLITROPIN和SUPEROV (n=256)不同组合、不同剂量模式的超排卵方案,监测Murrah水牛卵巢活性和发情表达,用于超排卵和胚胎移植研究。在这133头水牛中,在第一次授精的第5、6和7天进行了非手术冲洗Figures.1-8.此外,在此期间还对24头非超排卵的正常循环水牛进行了冲洗。PGF2α给药后48-60小时和60-72小时,分别观察供体和受体发情的表达。捐献者在发情期开始后接受三次授精。卵泡和黄体的整体卵巢反应分别为0.3和2.03,Follitropin诱导组的反应最大(n=35) [11-14].

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图1:超排卵和胚胎评价。

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图2:超排卵和胚胎评价。

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图3:超排卵和胚胎评价。

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图4:超排卵和胚胎评价。

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图5:超排卵和胚胎评价。

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图6:超排卵和胚胎评价。

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图7:超排卵和胚胎评价。

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图8:超排卵和胚胎评价。

超排卵期水牛和山羊卵泡和黄体发育的超声检查

在12头水牛给予卵泡刺激素(follitropin 30 mg) 8小时前后,每天进行一次经直肠超声检查,以筛选卵泡总数及其发育阶段。有2个或更多黄体的水牛被认为是反应者。应答者与无应答者中、大卵泡数及总卵泡数差异有统计学意义(P<0.05),而小卵泡无统计学意义。该研究表明,产前卵泡池负责大卵泡的发展,注定排卵。大卵泡与黄体的相关系数分析为正(r=0.47)。该技术有助于确定发情周期黄体期CL的实际数量和卵泡发育模式[15].用PMSG、HCG和PGF2α对超排卵山羊进行了类似的试验。通过剖腹手术(外科手术)和测量卵泡的大小(毫米)来研究反应。16].

不同收集方法对水牛、山羊和绵羊卵母细胞的提取效果

采用三种不同的方法从附近屠宰场采集的水牛卵巢中提取卵母细胞。对卵巢进行切片(N=131)、卵泡穿刺(N= 86)和卵泡抽吸(N= 80)。与卵泡穿刺(2.6个)和抽吸(1.7个)相比,切片技术不仅产生了显著(P<0.01)更多(5.7个)的卵母细胞,而且还获得了优质的卵母细胞。然而,与其他技术相比,切片和抽吸技术所花费的时间更多。当对绵羊卵巢进行切片技术以获取卵母细胞时,也发现了类似的观察结果[17-19].然而,采用卵泡穿刺技术收集山羊卵巢(n=347),因为收集的卵母细胞用于体外受精研究的成熟过程[20.].

与可育和非可育授精相关的水牛小母牛宏微量矿物剖面的监测。用原子吸收光谱仪测定了饲养后水牛母牛体内钙(Ca)、铁(Fe)、锌(Zn)、铜(Cu)、锰(Mn)和钴(Co)的循环水平。在受精前沉降的可育母牛中,平均为48.42±1.27、1.04±0.05、0.54±0.02、0.76±0.02和0.01±0.00 μg/ml;在受精后未沉降的母牛中,平均为46.31±1.06、1.01±0.06、0.65±0.04、0.76±0.09和0.02±0.00 μg/ml。妊娠第1、3、17、21天Zn水平显著降低(p<0.5) [21].

在正常和有流产、死产和胎膜保留的产褥期问题的奶牛中,也测量了与产褥期和产后问题相关的铁、锌、铜、锰和镁(Mg)的杂交奶牛在产后40天的水平。正常犊牛分娩当天Fe、Zn、Mn、Co、Mg的平均含量分别为3.2±0.9、0.8±0.1、1.3±0.4、2.7±2.1和63.5±6.4 μg/ml,与有生殖问题的奶牛相比,正常犊牛分娩当天的Fe、Cu含量更高。正常犊牛锌和锰含量较低,而正常犊牛和异常犊牛镁含量没有变化。而保留胎膜的奶牛锌、铁、锰、铜含量较低。该研究表明,在杂交奶牛中,微量矿物质的含量在保留胎膜方面起着一定的作用[22].在12头Murrah型农村水牛、5头复种水牛和4头杂交奶牛的血浆中,在每周间隔的28天内,以及在复种奶牛和水牛的第1、3、6、10、13、16、19、22和25天内,测量了与牛的无性繁殖和复种问题相关的各种矿物质含量。

农村水牛中Mn、Cu、Mn、Zn和Fe的平均含量分别为1.66、0.98、0.65、1.45和1.68 μg/ml。复种水牛和杂交奶牛的总水平分别为52.33、1.34、0.50、0.88、1.64和52.1、0.99、0.52、0.96和2.1 μg/ml。与发情周期的其他日子相比,复种水牛(第1天)的铜、锌水平和复种奶牛(第1天)的铜、锰、锌、铁水平分别较低。研究表明,重复繁殖的水牛和奶牛发情日微量矿物质浓度较低与受孕失败有一定的关系,需要进一步的试验。

体外成熟(IVM)和受精(IVF)

在常规的非手术冲洗和收集水牛胚胎期间,试图使未受精卵受精。卵母细胞成熟和胚胎发育的培养基为T CM-199+10%水牛发情血清。以高质量精液为大剂量,在BSA含量为20 mg/ml、肝素含量为10 μg/ml的BO培养基中孵育3小时后,将附精子的卵母细胞转移到成熟培养基滴液中继续发育。每隔一天更换成熟培养基,在相差显微镜下观察卵母细胞的卵裂情况,培养9天[20.].然而,现在已经在培养条件下取得了足够的进展,这样不成熟的卵母细胞现在可以在体外(IVM)中提取和成熟。

克隆

这是一种无性繁殖形式,后代的所有基因都来自单个个体的细胞:在胚胎移植的常规工作中,人们试图从一些水牛卵泡中产生克隆,以便以更快的速度繁殖优越的种质。通过穿刺技术,使用非常细的针和消毒注射器抽吸卵裂球。收集的卵裂球然后按照体外受精技术进行培养。

通过胚胎移植技术在水牛中诞生的小牛

总共有122个胚胎被恢复,其中72个被移植到68个同步受体中。受者在胚胎移植的第55天至第60天进行了妊娠状态检查,到目前为止,15头水牛宣布怀孕(FSH-P组9/36,Follitropin组6/28),正常犊牛(4公7母)。公、母犊牛初生体重29 ~ 35 ~ 22 ~ 26 kg,妊娠期313 ~ 305 d。然而,在FSH-P、卵泡和卵泡超排卵的水牛中,没有观察到排卵反应的显著差异[23].

杂交奶牛围产期和产后的血液学特征

研究了24头存在流产(6头)和死产(5头)问题的杂交奶牛在分娩40天的血红蛋白(Hb)、填充细胞体积(PCV)和差异白细胞计数(DLC)。Hb内容(g %)被发现低牛曾流产(10.3±1.1)和扔仍然出生牛犊(10.2±0.6)在产犊的日子比较正常弗PCV的值(11.0±0.4)%(34.0 + _4.5±和淋巴细胞百分比(48.1±5.3)较低和中性粒细胞(41.7±5.6%)和嗜酸性粒细胞(3.0±1%)高流产奶牛分娩那天相比正常弗有平均水平的PCV 39.9±1.4,62.1±2.9,淋巴细胞中性粒细胞26.8±2.4,嗜酸性粒细胞1.8±0.6%。在产后第1天至第40天,两类奶牛的血液学指标均无明显波动。然而,KS牛的PCV(45.6%)和Hb(11.8%)水平高于KF牛(PCV 42.5%, Hb10.6%)。还观察到,流产和死产的奶牛都患有子宫炎后胎盘潴留(72.8%),而正常分娩的奶牛的发生率仅为18%,这需要进一步研究[24].

水牛、杂交公牛和公羊(雄性绵羊)的精液采集、评估和冷冻

在报告所进行的研究中,采用电射精、外科手术和人工阴道(AV)技术收集不同物种的动物精液。电射精法多用于公羊[25]及其他动物的人工阴道法[26].而手术方法仅用于从公牛的睾丸中采集精液。采集的精液进行体积、颜色、密度、质量活性、pH值、精子浓度和异常精子率检测。从结果可以看出,每天采集精液,持续2-3周(11-25天),实验期间精液量和精子浓度均未出现恶化。在常规冷冻试验中观察到,使用6%甘油水平的水牛精液具有更好的冷冻性[27].

精液和睾丸匀浆自体免疫对精液质量和睾丸组织学的影响

将10只大公羊(n=10)分为3组,分别作为对照(n=2)、免疫1组(n=6)和免疫11组(n=2),每隔3 d用弗劳德助剂与精液和睾丸匀浆进行s/cut免疫,为期1个月。免疫I组公羊在第7天后进行最后一次注射,免疫II组公羊在第6次注射后15天进行最后一次注射。两组免疫公羊的精子浓度均显著下降,异常精子数增加。组织学检查显示,睾丸水肿,间质组织纤维化,生精小管扩张,支持细胞和生精细胞变性,基底膜增厚,生精能力下降。然而,对照组的公羊在任何水平上都没有表现出任何变化,只有一只公羊的支持细胞出现了一些空泡化[25-27].

用凝胶扩散法和免疫电泳法对公羊精子和精浆进行抗原分析

对不同品种(外来和本地)公羊的精子和精浆抗原进行双凝胶扩散和免疫电泳分析,发现不同品种公羊的精浆抗原模式不同,反映了同一种不同品种间的遗传差异。因此,首次可以从公羊精液中获得免疫指纹,这在育种实践中具有重要意义[28].

公羊精液蛋白和血清蛋白电泳

用琼脂凝胶电泳分离俄罗斯美利奴公羊、朗布叶公羊和赤驼羊(各6种)的蛋白质与精子、精浆和血清。精浆蛋白中共检测到6种蛋白质成分(3种主要蛋白质和3种次要蛋白质),精子蛋白中共检测到4种蛋白质成分(2种主要蛋白质和2种次要蛋白质)。精浆和精子中的白蛋白含量低于血清。而公羊精子蛋白中球蛋白含量远低于精蛋白和血清蛋白[29].

从出生到青春期前列腺素F2α和激素的监测

孕酮:从出生到第3天(n=67)对水牛母犊牛进行P4筛选,平均浓度为0.27±0.07 ng/ml。在30月龄时,该水平在035±0.14至0.67±0.08 ng /ml之间波动。然而,30个月后,在表现出周期性的动物中逐渐增加到0.8±0.10 (n=29),然后在怀孕的小母牛中增加到1.18±0.15 (n=14)。不同年龄组间差异极显著(P<0.01,n = 404)。且在对季节、体重、断奶组和未断奶组犊牛的影响进行方差分析时也发现显著性[30.].

Estradiol-17β

在出生后的前12个月,该水平在6.8 pg/ml到12.8 pg/ml之间波动,然后从181天到270天下降到361-450天的最低水平4.5±2.6 pg/ml (P>0.05)。然后,在青春期期间,该水平缓慢上升,11.76 pg/ml的水平使小母牛达到周期性[30.].

促黄体激素

新生犊牛(1 ~ 3日龄)与出生犊牛(1 ~ 30日龄)相比具有极显著差异(P>0.01)。LH水平逐渐下降。然而,超过30月龄的月经期母牛和非月经期母牛在这一水平上无显著差异。然而,在3-6月龄时,浓度从1.09±0.07ng/ml (n=53)波动到0.57±0.14 ng/ml (n=15),然后在9-12月龄时逐渐上升(0.74±0.10 ng/ml, n=27)。然而,循环母牛和非循环母牛的总体平均水平无显著差异[30.].

前列腺素F2α

在哺乳和不哺乳的水牛犊牛中观察到PGF2α浓度的显著差异,而在不哺乳的犊牛中更高,如[31-33].然而,当监测不同年龄组、体重、断奶犊牛和季节时,没有观察到特定的水平变化规律,但在湿热月份观察到水平略有上升[34].

皮质醇激素

皮质激素谱用直接RIA测定,不提取血浆。新生儿血浆皮质醇水平在出生后立即升高(19.60±0.61 ng/ml (n=19),出生后明显下降。犊牛鼻后15 ~ 180天的平均水平在2.31 ~ 1.06 ng/ml之间波动,青春期前的平均水平在2.24 ~ 3.73 ng/ml之间波动,青春期前后的平均水平在4.51 ~ 7.19 ng/ml之间波动。然而,孕妇(至第22天)与非孕妇之间并无显著差异[33].

水牛小母牛发情期和怀孕早期的激素状况

孕酮:孕酮的平均浓度在发情前3天最高(0.72±0.22 ng/ml),然后在发情第一天约09.00小时(排卵前后)下降至最低(0.22±0.03ng/ml(P<.0.01),发情后第2天略有上升,表明CL的形成开始,如[34].直到受精后第22天,妊娠动物体内的维生素d水平逐渐显著升高(<0.01)。34].

Estradiol-17β

在发情期和排卵期,平均血浆雌二醇浓度在3.8 ~ 30.4 pg/ml之间(P<0.05),其中第0天的07.00 hr为一个大峰,第+ 1天的15.00 hr和07 hr为22.5和21.4 pg/ml,第+ 1、+2和0天的03.00、09.00和0.09 hr分别为15.4、14.8和15.5 pg/ml。34].然而,在未怀孕的小母牛中,该水平从第1天到第11天下降,怀孕的小母牛没有太大变化[35].

促黄体激素

各组动物LH水平随采集天数和采集时间的不同有较大波动(P<0.05),且均在发情的不同天数达到峰值。两头动物在第1天(排卵日)出现5.0 ng/ml和39.7 ng/ml的峰值,而一头水牛在发情第1天(排卵前日)观察到62.9 ng/ml的峰值。然而,怀孕和未怀孕母牛的整体LH水平没有显著差异[34].

前列腺素F2α

PGF2α的平均水平在0.05 ~ 1.75 ng之间。发情前第2天至发情后第3天Ml,与+3天差异有统计学意义(p<0.05),发情后05.00小时+1。然而,所有的主要高峰都出现在发情期结束和排卵前第1天15.00小时和17.00小时,如[34].妊娠母猪之间PGF2α水平的逐日比较表明,仅发情第13、22、16和7天的PGF2α水平显著(P<0.05)和(P<0.01)高于非妊娠母猪发情第5天和第16天的PGF2α水平[34].

皮质醇激素

在受精后至22[33]天的样本中,未观察到怀孕和未怀孕母牛的皮质醇水平无显著差异。

水牛PGF2α、LH、Estrdiol17-β和孕酮的排卵变化及激素谱

本研究旨在探讨排卵期间外周血PGF2α、LH、Estradiol17-β与孕酮水平的时间关系。选取三头产乳水牛,分别在发情期的-5、-4、-3、-2、-1、+2和+3天每天抽血,在发情期的前16小时内每小时抽血4次。在发情期和排卵期剩下的时间里每两个小时。PGF2α水平从第1天开始在第3天的05.00小时显著升高(P<0.05),而所有动物的LH水平在收集的天数和时间间隔之间波动很大(P<0.05),高峰出现在第+1天(排卵日)。雌激素峰值出现在第0天07.00 h。在第+1、+2和0天,分别在03.00、09.00和09.00小时出现了15.4、14.8和15.5 pg/ml的小峰。孕酮水平在发情前第3天最高,在排卵前后第1天逐渐下降(P<0.01) [34].

年龄、断奶、季节和体重对生长中的水牛小母牛孕酮、雌二醇-17β和LH水平的影响:研究了年龄、断奶、季节和体重对水牛小母牛新生期、围产期和青春期前后孕酮、雌二醇和LH水平的影响。所有水牛在30月龄后才开始发情,发情当日黄体生成素和雌二醇水平较高,孕酮水平较低。不同季节和断奶对黄体酮水平影响极显著(P<0.01),而雌激素水平受断奶影响极显著(P<0.01),且在不同季节和体重间存在差异。黄体生成素水平在不同年龄及体重之间有显著差异(P>0.01) [36].

发情期农村水牛促卵泡激素、孕酮和雌二醇- 17 β的激素特征

选用12头4 ~ 7岁Murrah型水牛,采用RIA技术进行激素监测。每隔一周收集一次样本,为期28天。FSH水平和雌二醇- 17-β分别在5.5-6.2 ng/ml至7.6-15.0 pg/ml之间波动。而孕酮的循环水平在2.3 ng/ml至4.3 ng/ml之间,但在发情当天,孕酮水平急剧下降至0.4 ng/ml, FSH (48.5 ng/ml)和雌二醇-17β (50.1 pg/mg)急剧增加[37].

保留胎膜的杂交奶牛产后雌二醇-17 β水平

在15头KS、KF杂交奶牛和10头未保留胎膜的动物中,估计了雌二醇-17 β的循环水平。激素是在第O天估计的,被认为是在产后6-24小时,1、3、5、7、15、20、30和40天之间。在动物分娩当天记录了30.0 pg/ml和17.1 pg/ml的水平,没有保留FM。在分娩后,两组的水平都逐渐下降。研究表明,较低水平的雌二醇-17 β可能是KS和KF杂交动物FM滞留的原因[38].

超排卵水牛和山羊的性腺激素概况

在第110-12天,间隔12小时监测使用促卵泡激素超排卵的默拉水牛的孕激素水平。在给予follitropin前,其浓度为2.23 - 7.74 ng/ml,在给予PGF2 α后24小时开始下降,发情当天最低为0.33±0.16 ng/ml,在周期中期逐渐增加至6.87±3.46和9.06±1.68ng/ml,如[39].1986年,在使用PMSG、HCG和PGF2α超排卵的山羊中也进行了类似的试验,在整个试验期间(从第0天到第10天),观察到雌二醇-17 β的水平为4.16至10.94 pg/ml,而在卵泡直径为2- 8mm的山羊中,雌二醇-17 β的浓度为15.10至60.11 pg/ml。然而,孕激素水平非常低,在周期的第3天为0.11,第10天为0.80 ng/mg [40].

催乳素激素

催乳素水平在发情期和分娩当天显著升高,随后在发情期和产后下降。但发情期母牛血清中该物质的含量(104.80±17.23 ~ 165.72±22.56 ng/ml)比重复繁殖周期水牛(21.99±0.72.59 ~ 56.0±33.81 ng/ml)高约3 ~ 4倍[41].

山羊繁殖不同阶段的激素情况

监测绵羊发情周期、妊娠早期、妊娠、分娩和产后外周血黄体酮、雌二醇-17β和皮质醇浓度。未孕山羊发情当天孕激素水平很低(0.25±0.15 ng/ml),在黄体期后期逐渐上升至峰值(2.77±1.18 ng/ml),在发情周期第19天急剧下降。在妊娠第75天(6.2±0.61 ng/ml),该水平持续升高,然后在怀孕当天突然下降。雌二醇-17 β和皮质醇水平表现出不同的变化趋势,在发情期较高,怀孕早期逐渐下降,怀孕当天急剧上升。然而,在怀孕早期,全脂牛奶中的孕酮比血浆中的孕酮高10倍。本研究表明,RIA监测激素可用于监测山羊生殖事件和早期妊娠诊断(EPD)相关激素的微观水平[42].

山羊妊娠期血浆孕激素水平

杂交山羊妊娠90天后血浆孕酮浓度在妊娠后期在1.9±0.24 ~ 2.57±0.59 ng/ml之间波动,但在分娩当天有所下降,产后进一步略有下降[43].

山羊妊娠期和围产期血浆esradiol-17 β水平

孕早期第1天血浆雌二醇-17 β水平持续下降至(9.72±5.23 ~ 5.93±1.78 pg/ml,第9 ~ 17天平均水平为(17.84±3.00 ~ 6.33±3.12 pg/ml),产后19天显著升高至43.88±15.86 pg/ml。因此,可以推断雌二醇-17 β水平的突然升高是山羊分娩行为的原因[44].

引产山羊的激素状况

分别在第23天、20天、17天、14天、11天、8天、5天、2天、1天(开玩笑前)、开玩笑当天(第0天)和开玩笑后第1天、2天、4天、7天、10天、13天和16天抽取血液样本。开玩笑当天各组皮质醇和雌二醇17b水平均升高(P<0.05),孕酮水平均降低(P<0.05)。然而,在开玩笑当天,地塞米松诱导山羊的皮质醇浓度没有增加。研究表明,PGF2α和皮质激素可成功终止山羊的预备妊娠,如[9].

未来的计划

最近的技术和策略,如使用有性生殖的种质,干细胞,DNA血统,自动热检测设备,性别鉴定的激光检测技术,(LTD),和喂养生长激素(bST)是一些需要纳入这样的计划。然而,基因组学、蛋白质组学和生物信息学的使用无疑将为研究人员提供更好的理解,以提高动物的高效繁殖过程。其他正在出现的辅助参数将是动物园鼻子和公共卫生方面的结合。

确认

我感谢NDRI&CIRB主任和兽医与动物科学学院院长Pantnagar和Bikaner- India为开展研究工作提供了所有设施。

参考文献

全球科技峰会