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国际创新研究期刊》的研究在科学、工程和技术

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棕榈油蛋糕:一个潜在的基质LAsparaginase生产

Ch V萨提亚*c·阿,d .斯里兰卡Rami Reddy
  1. 生物技术中心,化学工程系,工程学院,安得拉邦大学维萨卡帕特南003年- 530年,美联社——印度
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文摘

L-asparaginase是已知的药物治疗癌症尤其是急性lymphoblatic白血病。在这项研究中,高水平的生产得到L-asparaginase的曲霉菌wentiiin固态发酵利用农业工业废物如椰子油、棕榈油、白人和黑人芝麻油蛋糕。棕榈油蛋糕显示最大酶生产曲霉菌wentii作为底物源在固态发酵(SSF)。48 h在有氧条件下发酵时间与含水率为89.51%,培养液体积V / W 30%社保基金出现最佳酶生产。最佳温度和pH值对酶活性分别为34摄氏度和5.8。

关键字
固态发酵、棕榈油蛋糕、天冬酰胺酶、曲霉菌wentii

我的介绍。
L-asparaginase吸引了太多的关注,因为它作为有效治疗代理人对淋巴细胞性白血病和其他癌症(1)人。从正常细胞癌细胞差异化表达减弱Lasparagine(2、3)。因此,他们不能生产L-asparagine,主要取决于L-asparagine从循环浆池(2)。
L-asparaginase生产使用微生物系统吸引了相当多的关注,由于成本效益的,自然环保。各种微生物如丝状真菌,酵母,细菌已被证明是有益的这种酶的来源(4、5、6、7、8)
SmF技术成本密集型,高度有问题,知之甚少单元操作(9),社保基金提供了大量优势深层发酵(SmF)。社保基金不应被视为一种技术,这种技术可以取代SmF。固态发酵是一种非常有效的技术,产品的产量相比,高出许多倍,在SmF(10),并且它还提供了许多其他优势(11)。
本研究的目的是产生L-asparaginase曲霉菌wentii棕榈油蛋糕由固态发酵。

二世。材料和方法
微生物和培养条件:曲霉菌wentii NCIM 941年获得国家工业微生物(NCIM)的集合,浦那(wasmaintained马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,在370摄氏度的环境中,存储在冰箱和亚文化每月。
种子的制备中
分生孢子悬浮液制备刚提高了四天的旧文化的曲霉菌wentii和接种达到毫升asparagines-dextrose-salts汤含有L-asparagine(1.0%)、葡萄糖(0.2%),kH2PO4 (0.05%)、MgSO4.7H2O(0.01%)和pH值调整到7.2 (12)。基板:本地可用的椰子油蛋糕,棕榈油蛋糕,黑麻油蛋糕和白芝麻油蛋糕从M / S的事迹杜尔迦企业榨油机和接地。地面材料收集,在社保基金作为衬底。
通过固态发酵酶生产
5克的油饼摄于250毫升厄伦美厄烧瓶和滋润4毫升0.01磷酸盐缓冲剂(pH值6.5)。彻底混合发酵媒体被高压灭菌法灭菌15分钟15 psi, 1210 c,然后接种1毫升的先前准备的真菌悬挂在370 c所需的时间。粗酶的提取、重数量发酵底物的混合磷酸盐缓冲剂(1:5)(13、14)。均质混合,过滤,滤液离心机,用于酶测定得到上清液。
定量分析的估计L-asparaginase活动:
确定酶活动,5毫升文化的肉汤被撤回的无菌烧瓶在每一个24小时的间隔。肉汤使用Whatmann滤纸过滤。1,然后在9000 rpm离心机8分钟(14)。上层清液从而获得被用作L-asparaginase测定粗提取液。测定酶进行了按Imada et al . (15)。
国际单位
酶活性表现在国际单位。L-asparaginase IU之一是酶的释放量1μmole氨/ mL / min(μmole /毫升/分钟)

三世。结果与讨论
在社保基金,选择一个合适的底物发酵过程的一个关键因素。在目前的研究中,在四个基质筛选(图1)棕榈油蛋糕a wentii给最高酶生产。发酵参数的优化研究进行了使用棕榈油蛋糕的衬底L-asparaginase的生产。
图像
培养时间的影响,水分含量、温度、pH值对L-asparaginase生产
曲霉属真菌物种
社保基金进行了一段144 h。在每24 h和发酵的玻璃瓶被酶提取做了如前所述。酶生产显示增长关联性随着发酵时间的进行和最大酶生产(73.251 IU) 48小时后观察。(图2).Similar观测报告Alberdon席尔瓦桑托斯等为生产L-asparaginase al13曲霉菌terreus 48 h。
生产中不同含水量是用来确定其对天冬酰胺酶产量的影响。观察最大酶产量为89.51% (v / w)和82.353 IU的酶活性(图3)。含水率社保基金的一个关键因素,因为媒体的水分决定了微生物的生长和酶产量(16)
孵化温度是另一个重要的因素,从而影响酶生产的社保基金。最大酶生产84.954 IU被记录在34摄氏度和生产减少温度超过34摄氏度(图4)。
研究了pH值影响L-asparaginase活动使用0.1米磷酸缓冲在不同pH值的5.7 - -8.0和最大酶活性与pH值5.8,90.025 IU得到逐步减少在低pH值,以及在更高的价值急剧下降(图5)。pH强烈影响许多酶的细胞生长和产品的生产过程和传输。类似的观察报告Abha Mishra17 pH值6.5的生产L-asparaginase fromAspergillus尼日尔在固态发酵。
图像
图像

四。结论
在目前的调查,L-asparaginase活动的最大值后获得优化的发酵参数(89.954 IU),这显然证明了空间探索丝状真菌等治疗酶的生产L-asparginase使用社保基金。
L-asparaginase可以从低成本生产的未经处理的生物质残留没有补充加强增长或生产。社保基金披露的可能性有效利用石油蛋糕通过生物技术手段增加价值。这些过程有助于减少生产费用。
研究表明,选择合适的基质和生物加上流程级别优化显著提高酶产量。开发一个天冬酰胺酶生产过程基于棕榈油蛋糕底物使用曲霉菌wentii在社保基金是经济上有吸引力的,因为它是一种廉价且容易获得的原料在农业为基础的国家。

确认
作者Ch V萨提亚是感谢科技部,新德里女性科学家(WOS-A)下的金融援助计划。

引用
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