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黄荆的植物化学研究及降糖作用

Mishra Pankaj, Saxena Abhishek和Saxena Vikas

印度北方邦巴雷利Rakshpal Bahadur药学院药学研究所药理学系。

*通讯作者:
Mishra Pankaj
印度北方邦巴雷利Rakshpal Bahadur药学院药学研究所药理学系。

收到日期:2013年7月17日接受日期:2013年9月14日

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摘要

研究了黄荆甲醇比例提取物对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠的降糖作用。黄荆提取物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠给药12 h后血糖水平也有极显著降低作用(P<0.01)。

关键字

降糖,黄荆,抗糖尿病活性。

简介

它是一种代谢紊乱,以高血糖、糖尿、高脂血症、负氮平衡为特征,有时还伴有酮血症。毛细血管基底膜增厚、血管壁基质增多、细胞增殖等广泛的病理改变,可引起管腔狭窄、早期动脉粥样硬化、肾小球毛细血管硬化、视网膜病变、神经病变、周围血管功能不全等血管并发症。糖尿病是一组以高血糖为特征的内分泌综合征;脂质、碳水化合物和蛋白质代谢改变,血管疾病并发症风险增加。大多数患者在临床上可以分为I型糖尿病(I型糖尿病以前称为胰岛素依赖型糖尿病(IDDM))或II型糖尿病(II型糖尿病以前称为非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM))。

黄荆属马鞭草科(马鞭科75属近2500种),俗称五叶贞树(Eng), Nirgundi(印地语),落叶灌木,生长于热带至温带地区(从东到西海拔2200米),在荒地上合群生长,也被广泛用作树篱植物。叶掌状排列,有五个小叶,披针形,长4-10厘米,下部有毛,两端尖,白色四边形,有细绒毛,叶具3-5个叶面,小叶披针形(5-10厘米),尖顶小叶(16-32毫米),叶柄长1-1.3厘米,极短叶柄。蓝紫色的花很多。果实多汁,成熟时呈黑色,圆形,直径约4毫米。黄荆茎煎剂用于治疗烧伤和烫伤[1]。

材料与方法

植物材料

植物牡荆采自北阿坎德邦的Haridwar。该植物由新德里国家科学传播和信息资源研究所(NISCAIR)原材料标本馆和博物馆负责人H.B. Singh Scientist F博士鉴定和认证。茎皮在密鲁特绍比特大学药学院风干。和裁判,不。尼斯凯尔/ rhmd /咨询2008 /9/ 1104/135。

提取物的制备

这种药在阴凉处晾干,然后粗磨成粉。粉末材料(100 gm)在索氏仪中依次用石油醚、甲醇和水萃取。通过蒸馏去除溶剂,然后在温度50±50C的水浴中干燥。

萃取物的测定

以黄荆茎皮粉末状部位为研究对象,测定了不同溶剂对黄荆茎皮粉末状部位的浸出物含量。

粗提物的制备

用石油醚(60-800C)、甲醇和水在索氏提取仪中提取粉末状药物(100 g)。继续提取,直到最后一部分洗脱液的几滴在滤纸上干燥时没有留下任何可察觉的残留物。萃取物经过过滤,用蒸馏除去溶剂。浓缩提取物水浴干燥。它被保存在真空干燥器中并称重。

pharmacology-toxicological-studies-Percent-extractive

表1:动力茎皮的萃取率(牡荆牡

石油醚提取物(2.0 g,收率2.07%),甲醇提取物(7.62 g,收率7.9%),水提取物(8.52 g,收率9.51%)。石油醚浸膏呈浅棕色,甲醇浸膏呈深绿色,水浸膏呈深棕色。

定性化学鉴定试验

为鉴别黄荆各种提取物中存在的各种植物成分,进行了以下定性化学试验。

pharmacology-toxicological-studies-chemical-analysis

表2:各种提取物的定性化学分析牡荆牡茎皮

+出席-缺席

这些试验是为了发现活性化学成分的存在,如生物碱、类黄酮、单宁、酚类化合物、皂苷、固定油脂。

柱层析法分离黄荆甲醇提取物

柱层析用硅胶(60-120目)100 g装入合适尺寸的柱中。将甲醇提取物5.0 g溶于甲醇10 ml中,与硅胶g 6.0 g混合干燥。在硅胶G上吸收的干燥提取物转移到所制备的柱的顶部。用极性增加的溶剂以每分钟60滴的速度进行洗脱。各取25ml馏分。采用薄层色谱法对各组分进行监测,并将TLC图谱相同的组分合并。详细情况已列出来表3

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表3:甲醇提取物的柱层析

甲醇提取物的薄层色谱

采用硅胶G板对不同组分进行薄层色谱分析。试验了下列溶剂体系,具体情况见表3.6

pharmacology-toxicological-studies-solvents-ratio

表4:不同溶剂配比的薄层色谱

在溶剂中尝试了A, B, C, I, L和N,发现最令人满意。斑点的检测是在紫外光下观察出现荧光斑点的地方。TLC图谱相同的5 ~ 10组分混合。分数36-40和41-45表示没有。小浓缩物中的化合物没有被用于进一步的研究。馏分5-10的残渣保存在氯仿中,氯仿在底部沉积成粉红色固体,在薄层色谱上显示单个斑点[23.]。

黄荆甲醇提取物分离物的表征

传统上,许多不同的显色反应和溶解性被用来表征不同类型的化学成分。这些已经在标准文本参考中描述过。

在用于表征和确定成分结构的各种光谱技术中,如FTIR光谱,NMR光谱和质谱。

黄荆茎皮甲醇提取物的分离物

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图1:木脂素的化学结构(Negundin A)

动物

以100 mg/kg体重为剂量的干燥提取物用于瑞士白化小鼠的抗糖尿病活性研究。实验前后取体重相同的雄性瑞士白化病小鼠,用单盘天平22-28 g进行研究。将动物置于清洁的代谢笼中,在控制温度(27±20℃)和光照周期(12小时)下饲养。光和12小时。黑暗)。喂食标准颗粒饲料(Gold mohar品牌,立顿印度有限公司)和水。该议定书已由机构动物伦理委员会批准。登记no.837 / ac / 04 / CPCSEA。

药物

这些药物用于糖尿病的诱导,均来自不同的制药机构;

pharmacology-toxicological-studies-List-Chemicals

表5:化学品清单

植物提取

黄荆茎皮甲醇提取物及分离化合物(黄荆素A)。

链脲霉素

链脲佐菌素(STZ)是无色链霉菌的天然亚硝基脲产物。通常情况下,单剂量(25 mg/kg体重)腹腔注射对β细胞产生直接毒性作用,导致48-72 h内坏死,引起永久性高血糖。STZ破坏胰岛细胞的核DNA链。

格列本脲

单剂量格列本脲可刺激胰岛素从胰腺快速释放。它作用于β细胞膜,增强钙离子通过细胞膜的通量,从而导致脱颗粒。长期给药后,格列本脲的胰岛素抑制作用下降,但葡萄糖耐量的改善得以维持。因此,它是一种口服降糖制剂,具有有效的降糖作用。

小鼠被分为以下几组。

组我6只小鼠作为正常对照组,每天只给蒸馏水。

第二组用6个STZ剂量(25mg/kg)诱导糖尿病小鼠,作为糖尿病对照组,仅给予蒸馏水。

第三组用STZ诱导的糖尿病小鼠6只,口服黄荆茎皮甲醇提取物100 mg/kg体重,连续15 d,每日1次。

第四组用STZ诱导的糖尿病小鼠6只,口服黄荆茎皮甲醇提取物分离物奈果丁A,剂量为100 mg/kg体重,连用15 d,每日1次。

V组6只STZ诱导的糖尿病小鼠给予格列本脲(GBC),剂量为10 mg/kg体重,连续15 d,每日1次。15天后终止中药治疗实验,进行观察。实验前后采用单盘天平测量体重。试验第0天和第15天用血糖仪测定血糖水平,采用条带法,尾尖取血。通过轻轻按压大鼠的尾部和背部收集新鲜尿液。在实验第0天和第15天用酮条检查尿中葡萄糖和酮。实验结束后,将各组小鼠麻醉后解剖。将胰腺和肝脏固定在bouin液中,并进行组织学准备。切5μ厚切片,用苏木二烯和伊红染色。统计分析是在(事后邓尼特多重比较检验)的帮助下完成的。 Animal housing, care and application of experimental procedures were in accordance with institutional animal ethic guidelines . [245678

体重

糖尿病的特点是体重减轻。给药后链脲佐菌素可显著降低小鼠体重。与正常对照组相比,这种减少通常具有统计学意义。

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表6:甲醇提取物和尼古丁A处理小鼠第0天体重(gm)的变化。

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表7:甲醇提取物和尼古丁A处理小鼠第15天体重(gm)的变化th

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表8:甲醇提取物和尼古丁A处理小鼠0 ~ 15日体重变化(gm)及剂量mg/kgth的一天。

血糖水平

糖尿病的特点是血糖水平升高。链脲佐菌素可使小鼠血糖水平明显升高。与正常对照组相比,这通常是有统计学意义的。

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表9:乙醇提取物的作用牡荆牡正常对照组、糖尿病对照组和链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠0 d空腹血糖水平(mg/dl)。

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表10:乙醇提取物的作用牡荆牡7日正常对照组、糖尿病对照组和链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠空腹血糖水平(mg/dl)th的一天。

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表11:乙醇提取物的作用牡荆牡对照组、糖尿病对照组和链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠15日空腹血糖水平(mg/dl)th的一天。

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表12:乙醇提取物的作用牡荆牡正常对照组、糖尿病对照组和链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠0 d空腹血糖水平(mg/dl)th第15天th的一天。

统计分析

数值为每组五只动物的平均值±标准差。结果采用单向方差分析(ANOVA)进行事后Dunnett多重比较检验。均数之间的差异被认为是显著的(p < 0.01)。

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图2:直方图显示血糖水平的变化后,处理的甲醇提取物牡荆牡STZ诱导糖尿病小鼠血糖水平的影响。

A(正常),B(糖尿病),C(标准),D(甲醇提取物),E(分离物)。

结果与讨论

从黄荆干皮的石油醚、甲醇和水提物中提取。产量分别为2.07%、7.9%和9.51%。STZ诱导(25mg/kg体重)小鼠体重较紫荆、紫荆甲醇提取物减轻。

对照组小鼠体重在第15天无显著性变化(-0.5 mg)。糖尿病对照组小鼠体重在两周后出现下降(-0.6)。糖尿病对照组血糖水平升高与正常对照组相比具有高度静态显著性。口服黄荆甲醇提取物后,糖尿病小鼠升高的血糖水平有所下降。将糖尿病动物与药物治疗动物进行比较,发现第15天血糖水平急剧下降。

确认

作者非常感谢执行主席veena mathur女士,neeraj saxena博士,rakshpal bahadur小组主任,bareilly,我们也衷心感谢vikas saxena博士的宝贵建议。

参考文献

  1. Kokate CK, Purohit AP, Gokhale SB.生药学。《琅琊榜》,浦那,2002,20,p124。
  2. Prasad SK, Kulshreshtha A, Qureshi TA。链脲佐菌素诱导糖尿病白化大鼠的抗糖尿病作用。中国农业科学。2009;8(5):551-557。
  3. Bansod MS, Harle UN。植物化学成分、传统用途和药理特性综述。Pharmacologyonline。2009;1:286 - 302。
  4. 杨晓明,王晓明,王晓明,王晓明,等。苦楝果抗糖尿病活性研究进展。中华民族药典杂志2003;88:45-50。
  5. 肉桂叶乙醇提取物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的抗糖尿病作用、活性部位的分离及毒性评价印度药典,2003;35:290-296.-
  6. 王丽娟,张志刚,张志刚,等。木香叶对糖尿病大鼠的抗糖尿病作用。国际糖尿病杂志。2008;16:17 -122。
  7. 库马尔A, Ilavarasan R, Jayachandran T, Deecaraman M, Aravindan P, Padmanabhan N,等。Syzygiumcumini及其分离物对链脲霉素诱导的糖尿病大鼠的抗糖尿病作用。中国医学杂志,2008;2(9):246-249。
  8. 王志强,王志强,王志强。芦荟对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠的抗糖尿病作用及器官组织学的影响。中国生物医学工程学报,2008;44(8):1070-1076。
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