植物化学的分析Kam-sabut,巴豆caudatus geisel

文摘

巴豆caudatus geisel广泛用于印度东北地区在人类治疗一些疾病。本研究的目的是探讨其药用的植物化学的基础。成熟叶的干粉末巴豆caudatus顺序提取在石油醚、氯仿、乙醇和水使用标准协议。树叶的乙醇和水萃取萃取的价值观导致了4.14%和5.9%,而干燥的叶子导致损失20%的水大约6.35%酸和5.95%水溶性灰分的内容。定性的植物化学成分分析的氯仿、乙醇和水提取物的巴豆caudatus使用标准协议进行。分析了这三种提取使用薄层色谱法(TLC)。定性的植物化学成分分析显示,巴豆caudatus叶子含有生物碱,植物甾醇,皂甙,phlobatannins,心脏苷、黄酮类化合物、酚和萜类化合物。然而,单宁的缺席时很显眼的。不同化学成分的薄层色谱分析显示存在由不同的射频值表示不同的薄层色谱斑点在众多溶剂系统。目前的研究表明,巴豆的药用价值caudatus在于不同的代谢产物如生物碱的存在,植物甾醇,皂甙,phlobatannins,心脏苷、黄酮类化合物、酚醛树脂和萜类化合物,已报告拥有多样化的药用价值。

关键字

巴豆caudatus、生物碱、植物甾醇皂苷、Phlobatannins心脏苷和黄酮类化合物。

介绍

使用植物作为医学的最早的文字记录可以发现在古老的印度教经文,《梨俱吠陀》,这可以追溯到公元前3500年到公元前1800年的另一个主要经典文本提供的详细描述在700年药草和使用医疗的形式不同的药物包括阿达婆吠陀(公元前1200年),Charak Samhita和Shusrut Samhita(公元前1000 - 500)(1]。已知最早的书面医疗处方的草药疗法治疗各种疾病大约是四千岁,可以发现在闪米特人的粘土书写板2]。这是曼德拉草的时候工厂规定对于缓解疼痛,姜黄血液凝结,菊苣植物的根治疗胆囊疾病,而生蒜循环障碍。

替代和补充医学的使用收到刺激时,他承认这些系统为人类医疗保健的方法之一在本世纪第一个十年3]。草药的流行一直在增加全球由于人们日益认识到天然产物毒性较低,不具备任何已知的副作用比合成药物,这可能是由于他们的生物起源。植物来源的使用在现代医学被认为在19世纪早期,曾导致了隔离从鸦片的吗啡4]。此后几个化合物隔绝自然或人类医疗保健(植物产品5]。隔离和表征药物活性化合物的药用植物继续直到今天,希望寻找更好的无毒的药物和治疗各种疾病。这导致了艺术的应用程序的技术标准化的草药和隔离生物活性分子可以作为分析指标。植物来源的药物发现的成功导致了主要在抗癌和抗菌药物的发展5]。

的巴豆caudatus geisel(家庭大戟科)传统上用于治疗一些人类健康疾病。它被用作湿敷药物治疗发烧和扭伤在亚洲各个地区。它还可以用于治疗肝脏疾病。Croton caudatus的根是泻药和它的根,茎和叶都是单独使用,甚至整个工厂也用于医药目的由于低毒性(6]。巴豆caudatus相当广泛的东南亚和发现在斯里兰卡,不丹、婆罗洲、缅甸、Indo-Myanmar地区,Java,老挝,马来西亚,尼泊尔,巴基斯坦,菲律宾,新加坡,苏门答腊、泰国和越南。Chin-Kuki,曼尼普尔邦的居民和米佐拉姆邦用巴豆caudatus geisel长期以来医疗。它被用作一个傣族民族主义传统医学,其茎和叶用于治疗疟疾、热心的发热、抽搐、风湿性关节炎、和麻木7]。成分之一是齐魏柯滕子湾,这是一个著名的公式由中国傣族用于治疗疼痛和胃部疾病(8]。树叶已经应用于受伤的伤口已经溃烂了头来抵御蛆虫。Hmar语言中,它被称为是“Ranlung damdawi”(Ranlung =蠕虫,damdawi =医学),在曼尼普尔人在Thadou-Kuki语言“勇Khullokpi Khagilaikoi”和“Ganthan卢”。汁/从树叶中提取的口服第一次尝试Saikot, Churachandpur的曼尼普尔区Chawilen先生自己,因此也被称为“Chawilen damdawi(医学)”之后,他和它传统上被称为“Kam-Sabut”。它通常生长在泥炭沼泽,落叶和茂密的树冠常绿森林。有时,它生长在边缘地区沿着河流或小溪大片。由于它的广泛使用在这个印度作为传统医学的一部分,本研究进行探讨植物化学物质出现在巴豆caudatus体外。

材料和方法

实验

Croton caudatus是收集并分析了其乙醇提取物对各种植物化学物质的存在如下所述

收集和提取

的成熟和未受感染的叶巴豆caudatus geisel家庭(大戟科)收集从Saikot Churachandpur曼尼普尔区在旱季。Kumar辛格教授发现的植物是一个著名的曼尼普尔邦大学的分类学者英帕尔印度和它进一步验证了植物的调查,印度西隆。清洁和未受感染的叶子是传播的不锈钢托盘和允许在黑暗的阴影在室温下干燥清洁和卫生条件,避免入口的昆虫,动物,真菌和无关的地面材料。排气和自由空气循环是允许的。干的叶子在磨粉在室温下。叶粉100克的样品提取的顺序与石油醚、氯仿、乙醇和水在索氏仪器(9]。提取当时集中在减压干燥和储存在-80°C,直到进一步的使用。一个近似的收益率为26%。

水分含量的测定:

测定挥发性物质的量(即。,water drying off from the drug) in the drug is a measure of loss after drying of substances appearing to contain water as the only volatile constituent. The powdered leaves of Croton caudatus were weighed, placed (without preliminary drying) in a tared evaporating dish, dried at 105˚C for 5 hours, and weighed once again. The moisture content was calculated as percentage with reference to the initial weight. The moisture content was calculated using the following formula:-

水分含量=

在Pw = preweighed样本

弗兰克-威廉姆斯=最终干燥样品的重量

W =总重量的样品

灰值:灰值包括道达尔和酸不溶性灰分测定估计总额中的无机盐药物。火山灰内容保持点火后的植物材料是由两种不同的方法测量总和酸不溶性灰分的内容。

总灰分:方法措施点火后剩余材料的总量包括生理上的灰,来源于植物组织本身和“non-physiological灰”的残留异物(如沙子和土)坚持植物表面。

过程:两克的地面脱水材料巴豆caudatus在之前点燃准确称重,测定皮重坩埚。材料作为一个传播甚至层和点燃温度逐渐增加到500 - 600°C,直到它变成了白色,表明碳的缺失。坩埚冷却,重。总灰分含量的百分比是根据以下公式计算。

在Pw = Preweighed坩埚

弗兰克-威廉姆斯=最终包含灰坩埚的重量

W =植物粉材料的总重量

酸不溶性灰分:沸腾后的残留物获得总灰分与盐酸稀释,并点燃。点火后剩下的不溶性物质测定二氧化硅的存在。

过程:25毫升盐酸是添加到包含总灰分的坩埚,轻轻覆盖着手表玻璃和煮5分钟紧随其后加入5毫升的热水坩埚。不溶性物质收集在一个无灰的滤纸,用热水洗净,直到滤液成为中性的。包含不溶解物质的滤纸被转移到原始的坩埚,干在热板和点燃。坩埚是允许在一个合适的干燥剂冷却30分钟,立即和残留重。酸不溶性灰分的数量计算毫克/克风干材料根据公式:-

Pwb =最终的重量和总灰分坩埚吗

澳洲公平工作委员会=最终的重量和酸不溶性灰分坩埚

W =植物粉材料的总重量。

萃取值:这些都是用来确定数量的物质溶于溶剂使用包括酒精和水。酒精和水溶性抽提的百分比计算,作为标准。

测定醇溶萃取:

过程:5克的风干粗粉材料浸渍在100毫升酒精为二十四小时在一个封闭的锥形瓶,频繁晃动在前六小时,允许代表18小时之后是迅速过滤小心避免溶剂损失和25毫升的滤液蒸发干燥在105一个‹šC测定皮重卡的浅盘,重。醇溶采掘的百分比计算,参照脱水材料。

测定水溶性萃取

过程:5克的粗粉风干材料浸渍在100毫升chloroform-water(0.1%)在一个封闭的瓶24 h,频繁震动直到6小时可以代表另一个18个小时。之后迅速过滤,预防措施以避免损失的溶剂蒸发和25毫升的滤液蒸发干燥在105一个‹šC配衡的平底浅盘,重。水溶性采掘的百分比计算,参照风干材料。所有的测试都是一式三份。

植物化学的筛选:植物化学的筛选不同的提取进行了各种各样的植物化学物质的存在使用标准程序下面描述。

生物碱:0.5 g的提取是溶解在10毫升的酸化酒精、煮和过滤,滤液的5毫升,2毫升的稀氨水添加添加5毫升氯仿紧随其后。混合物轻轻动摇了提取生物碱的基础。10毫升的氯仿层进一步提取乙酸和分成两部分。一部分是与梅尔混合试剂,而另一部分是与Draggendorff混合试剂。成立一个奶油(Mayer试剂)或红棕色沉淀(Draggendorff试剂)表明了生物碱的存在(10,11]。同样的,其他两个管海格和瓦格纳的试剂添加和黄色和棕色沉淀的外观显示乙醇提取的生物碱的存在巴豆caudatus。

丹宁酸

约0.5克的干粉状样品是煮20毫升的水在试管和过滤。几滴0.1%氯化铁是添加到滤液。褐色的形成绿色或深蓝色的颜色表明了单宁的存在(10,11]。

Phlobatannins

Croton caudatus是煮的水提物和1%盐酸溶液和沉积的红色沉淀表示phlobatannins[的存在10,11]。

皂苷

通常2 g的样本粉煮20毫升蒸馏水的水浴10分钟,趁热过滤和冷却之前进行以下测试:

起泡:3毫升的滤液稀释10毫升蒸馏水和动摇了2分钟。一个相当稳定的泡沫的形成表明滤液中皂苷的存在。

乳化:3毫升以上滤液稀释至10毫升通过添加7毫升蒸馏水,混合着3滴橄榄油和大力动摇了几分钟。相当稳定的乳状液的形成表明了皂苷的存在(10- - - - - -12]。

类黄酮

黄酮类化合物的存在决定在所有使用三种不同的提取方法10,11,13]。5毫升稀氨水的添加到每个提取的水滤液的一部分的集中H紧随其后₂所以₄。站在黄色的外观(消失)在每个提取黄酮类化合物的存在。

几滴1%铝溶液添加到每个滤液的一部分。一个黄色的颜色表明黄酮类化合物的存在。

部分每个植物粉加热10毫升的乙酸乙酯在蒸气浴3分钟。混合物过滤和4毫升的滤液与1毫升的稀氨水动摇。一个黄色的颜色表明黄酮类化合物的存在。

类固醇

类固醇的存在是由添加2毫升的乙酸酐为0.5 g乙醇提取的巴豆caudatus加入2毫升硫酸紧随其后。改变从紫色到蓝色或绿色在一些样品表明类固醇的存在10,11]。

萜类化合物

4毫克的植物提取物处理0.5毫升氯仿乙酸酐和0.5毫升,其次是浓硫酸的缓慢增加。红紫色或蓝色的发展表示萜类化合物的存在(10,11]。

Salkowski测试:5毫升的每个提取与2毫升氯仿混合,仔细覆盖3毫升浓硫酸。红棕色沉淀的形成在接口表示萜类化合物的存在(10]。

心苷(Keller-Killani测试)

通常5毫升每个提取处理2毫升的冰醋酸包含一滴氯化铁溶液下铺设的1毫升的浓硫酸。棕色环的出现在接口表示deoxysugar的存在,这是一个特点强心甾(10,11]。

植物化学物质的定量测定

生物碱:叶粉5克的巴豆caudatus重进烧杯250毫升和200毫升的10%乙酸乙醇添加。瓶了,允许代表4 h和过滤。滤液集中在水浴原始体积的四分之一,这集中氢氧化铵添加删除明智,直到完全沉淀。整个解决方案是允许解决沉淀收集和洗稀释氢氧化铵和过滤。残渣中含有生物碱,这是干,重10]。

类黄酮:10 g的叶粉巴豆caudatus反复提取100毫升80%甲醇水溶液在室温下。整个解决方案是通过绘画纸滤纸过滤没有42(125毫米)。滤液后来转移到坩埚和蒸发干燥在水浴和重14]。

薄层色谱分析:薄层色谱是一个简单和快速的技术是能够确定组件的数量出现在解决方案,帮助找到一个合适的溶剂通过柱层析法分离组件以及监控反应的进展。乙醇提取被发现在许多薄层色谱板(默克公司印度加尔各答),1毫米直径以上盘子的底部并放在不同的移动阶段。提取被允许继续吸附剂(固定)根据使用的溶剂系统阶段。几个组合增加溶剂的极性进行评估作为薄层色谱的流动相运行来确定不同提取物的成分的数量巴豆caudatus。不同的溶剂系统作为薄层色谱的流动相,由正己烷(n HX):乙酸乙酯(层)(7:3)己烷:乙酸乙酯(9:1)苯(C₆H₆):丙酮(我₂有限公司)(9.5:0.5)、氯仿(CHCl₃):甲醇(甲醇)(3:2)、二氯甲烷(DCM):甲醇(甲醇)(宣告)、二氯甲烷(DCM) /甲醇(9:1)(甲醇):氯仿:甲醇:乙酸(3:1.5:0.5)、氯仿:乙酸乙酯(9:1),石油醚:乙酸乙酯(3:2),甲苯:氯仿(3:2)。旅行距离的测量一种化合物被认为是Rf值。在每种情况下的斑点在紫外光照射下可视化。

结果

植物化学的分析的结果的巴豆caudatus介绍表1 - 5和数字1 - 4。

表1:干燥失重的百分比新鲜的叶子巴豆caudatus。

表2:干树叶粉的物理化学参数巴豆caudatus。

表3:收益率的各种干叶子提取物粉末的巴豆caudatus。

表4:巴豆属植物化学的分析结果caudatus树叶。

表5:定量测定生物碱和黄酮的含量巴豆caudatus。

萃取的价值观

25公斤的干燥巴豆caudatus离开了20公斤的干叶子,重量减轻,这是由于其含水量(≈20%的损失表1)。

干叶子的分析巴豆caudatus显示存在9.6%水分;总灰分11.65%;6.3%实灰;水不溶性灰分5.95%。ethanol-soluble Croton caudatus叶子含有4.144%,水溶性抽提14.856%,分别为(表2)。

10公斤的干叶粉的提取了676克的氯仿提取物、750克乙醇提取和800克水提物(表3)。

植物化学的分析

初步的植物化学成分筛选不同提取物的巴豆caudatus显示生物碱的存在,植物甾醇,皂甙,phlobatannins,心脏类黄酮苷,酚醛树脂和萜类化学实体,而单宁完全缺席(表4和图1)。

化学成分的定量测定表明,巴豆caudatus包含0.136%±0.1和类黄酮生物碱和0.32%,分别为(表5)。

评估各种巴豆提取物caudatus显示不同的植物化学的组件的存在显示不同数量的点在薄层色谱板和不同距离的旅行(Rf值)在众多溶剂系统。所有提取的TLC概要的巴豆caudatus介绍(图2 - 4)。

讨论

植物能合成各种复杂分子的营养、压力应对、国防和新陈代谢的副产品。这些分子是有用的作为各种人类疾病的疗法。植物的植物化学分析中扮演一个重要的角色在组合化学在药物开发和新药的发现。不同的植物化学物质或药效基因的存在使植物的重要来源各种人类疾病的药物治疗。植物通常包含各种植物化学物质包括生物碱、丹宁酸、黄酮类化合物和其他多酚类化合物,被施加一个明确的生理生化作用后的人类,他们的政府15]。

包含生物碱的植物起到了关键的作用在人类疾病的治疗中出现以来,人类的历史。从植物中提取生物碱已经在现代医学用于治疗癌症。巴豆caudatus包含0.14%的生物碱含量及其传统的用来治疗癌症可能是由于生物碱的存在。药用生物碱具有多样化的活动和一些植物提取生物碱包括长春花生物碱,taxens,足叶草毒素、喜树碱等用于治疗不同的癌症在人类在现代医学16,17]。使用可卡因和吗啡等生物碱作为局部麻醉剂,兴奋剂和止痛药18,19]。同样,咖啡因,尼古丁,抗疟药奎宁也充当兴奋剂(20.- - - - - -22]。

皂苷是一类triterpinoids发现在一些植物和主要包括糖苷配基,指定配基或皂角苷配基,半个共价链接到一个或更多的糖。皂苷的存在已被证实在巴豆caudatus在这个调查。皂苷是由植物主要作为防御武器对病原体和食草动物和他们一直归因于具有不同的生物活性包括杀菌、杀虫、化感作用和molluscicidal [23- - - - - -25]。皂甙被发现拥有immunoadjuavant、抗菌、抗真菌、抗病毒、antiprotozoal,抗氧化,抗癌免疫刺激性、低血糖、溶血性和膜permeabilizing活动(26- - - - - -30.]。发现了皂苷抑制血管生成和发挥抗癌活动通过抑制细胞周期和诱导细胞凋亡在培养细胞系(31日]。的使用巴豆caudatus作为一个医学治疗某些疾病和抗癌作用可能是由于它所宣称的皂苷的存在。

0.32%黄酮的存在表明,巴豆caudatus富含抗癌和伤口愈合活动传统上认为它可能是由于黄酮类化合物的存在。这个论点是由先前的黄酮类化合物已被报道具有抗菌,抗真菌,抗肿瘤,止泻剂,抗炎,antithrombogenic, antiosteoporotic、抗病毒和放射防护活动32- - - - - -39]。类黄酮(黄酮和黄烷醇)已报告作为抗氧化剂(32,40]。黄酮类化合物也作用于酶系统极度参与炎症反应的启动和维护。已报告类黄酮抑制乙酰转移酶()和磷脂酶A2 (PL2)活动41- - - - - -43]。黄酮类化合物被发现阻碍EC粘附的血小板功能和基因表达的蛋白质(44。45]。已报告类黄酮预防动脉粥样硬化的发展(46,47]。上面列出的所有活动中类黄酮的药用活动的支持巴豆cadautus。

植物甾醇是Croton caudatus的主要成分之一,它在人类传统用于减轻疼痛。植物甾醇的报道发挥抗肿瘤药,抗炎和镇痛活动(48- - - - - -50支持传统使用的巴豆caudatus缓解疼痛。低血糖,hypocholesterolemic和激素像植物甾醇人类活动在人类已报告(51- - - - - -52]。类固醇是用于抗炎、镇痛药物在现代临床研究(53]。植物甾醇也发现活跃与肥胖和动脉粥样硬化(54,55]。

心苷的存在的确认巴豆caudatus表明其传统使用人类作为抗癌剂的存在可能是由于心脏苷,心脏苷以来发现早在1967年发挥抗癌效果。最近的研究表明,心脏苷对HT29细胞毒性效应,HCT116、CC2结肠癌细胞系(56]。同样,心脏苷显示活动对各种癌症包括乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤、胰腺癌和肺癌、白血病、神经母细胞瘤和肾腺癌(57]。除了癌症治疗心脏苷一直用于治疗心脏疾病如心脏衰竭和心房心律失常(57),他们的行为通过抑制Na + / K + atp酶。临床试验表明,政府的心脏苷,地高辛和化疗有积极的影响对整体生存群乳腺癌、直肠癌、头部和颈部,肝细胞癌患者58]。

传统上,巴豆caudatusgeisel var. tomentosus一直用于治疗疟疾、热心的发热、抽搐、风湿性关节炎、和麻木7]。树叶也给杀死sore-worms猪和牛59]。进一步调查这个物种的化学成分已经隔离了一个新的黄酮1,连同九已知的(60]。存在的各种植物化学物质包括生物碱、植物甾醇,皂甙,phlobatannins,心脏苷、黄酮类化合物、酚类和萜类化合物,可能负责各种医疗活动巴豆caudatus,这是传统上用于治疗一些疾病。

植物化学的分析和各种巴豆提取物的薄层色谱分析caudatus透露,它包含生物碱、植物甾醇,皂甙,phlobatannins,心脏苷、黄酮类化合物、酚和萜类化合物和这种植物的药用活性可能是由于一个或多个这样的植物化学物质的存在也由于这些药效基因的共同行动。

确认

作者感谢大学拨款委员会对金融支持见格兰特。F.4-3/2007 (BSR) / 11 - 116/2008 (BSR)和F.4-10/2010 (BSR)和生物技术部门见批准号BT / 60 /不/真沸点/ 2011),印度政府,新德里进行这项研究。

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