雷竞技苹果下载研究和评审:《药理学杂志和药理学
菜单类e-ISSN:2321-6182p-ISSN:2347-2332
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| Pan-Jun刘一号小明杨一号*岳英2叶立刘一号叶贤思3中生张一号 |
| 对应作者小明工程学院江苏大学电话:+86511887801电子邮件:ZJYXM2003@hotmail.com |
| 接收者:27/02/2016接受者:20/03/2016发布日期:27/03/2016 |
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ginkols是生物活性复合物ginkgobilobaL.显示优异外语法活动性关于结构-活动关系研究,四种ginkgol单片机(C13:0,C15:1-QQ8,C17:2-Q9,12,C15:0)和二种ginggol异构体(C17:1-QQ10,C17:1-QQ12)相继隔离并识别HPLCMTT解析结果显示所有gingol单片展出细胞毒性反HepG2和HGC细胞Ginkgol单片带不饱和侧链比饱和侧链产生强抑制效果IC50码ginkgolC15:1-QQ8C172-QQ912C171-QQ10C171:1-QQ12HpG2和HGC细胞序列:5.69和3.9419.95和11.09GinkgolC15:1-QQ8显示最小IC50值最强细胞毒性GinkgolC17:1二联ginkgolC17:2双倍保证金接近ginggolC17:1双倍保证金
关键字 |
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| ginkgobilobaL.Ginkgol隔离识别反语法活动 | ||||||||||||||
导 言 |
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| ginkgobiloba公元前2亿年一号..提取集ginkgobiloba树叶(EGb)含有生物活性成分,如tepene三角形和flavo阿尔茨海默氏病心血管疾病痴呆症内存缺失和脑力缺省[2..现今EGb法系欧洲和美国最常用草药法3..三类乙醇(gincoliste酸、cardanols和cardols)据报告存在于Ginkgo并因不同制造过程而在不同商业提取物中发生[4-6..雷竞技网页版产生接触过敏的乙醇已被确定为EGb中的危险成分,大多数制造商应在EG761处理期间清除[7..Ginkgo alkylphens口服毒性从未得到确凿证明8-10多数供应商将其内容限制为5ppm提取11,12..然而,报告了若干治疗性期望效果Ginkgoakylphenols,如抗氧化活动、抗扰活动13-15..这些突出生物活性使人们有兴趣研究乙基苯酚结构及其潜在应用,将其作为治疗剂处理癌症以及其他疾病 | ||||||||||||||
| ggnclipse酸衍生物6-kylsalcyclication,方链从13到17不等,长度为0、1或2双联结gglice酸可转换成gggnols(3-alkylphenols)16..前次研究表明ginkgols也显示极佳抗癌效果和可移植性,然后ginkgolC13:0,C15:1和C17:1分离antiproliferation对癌症细胞效果测试17..ginkgolC17:1不是单化学物质,显示两个峰值(1:1),GC-MS分析中完全相同质谱17..ginkgolC17:1异构体尚未分离和识别,其生物活性至今也未比较 | ||||||||||||||
| ginkgolC17:1单片用预设HPLC分离ginkgolC17:1和其他ginggol单片机等异构体通过分片收集净化并隔离复合结构通过UV、IR、GC-MS一号H-NMR和13C-NMR反语义活动比对MTT解析 | ||||||||||||||
成果和讨论 |
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预设隔离 |
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| 显示隔离程序图1Ginkola酸提取并转换成gingols17..ginggols由预设HPLC分离18号..最优分离过程在WelchUntimateAQ-C上实现18号HPLC流水meOH-H列2O8614v24mL/min在最优条件下,68分内分离ginggol并显示五大吸附峰值预分色谱图图图2)为了获取单化学物质,对每个峰分收集发自图2峰值1-4对称,但第五峰值显示为肩峰值,表示它不是一个复合体第五峰依序划分为7分数:58.5-59.0、59.0-60.7、60.7-62.3、62.3-63.4、63.4-64.3、64.3-666.0和66.0-67.5分钟所有分数均通过分析HPLC分析,分数显示单对称形状并合并保留时间四种复合物(G-1、G-2、G-3和G-4)相继从顶点1-4获取,G-5和G-6同时从顶点5获取HPLC六类化合物纯度显示图3. | ||||||||||||||
识别gingols |
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| GC-MS进一步识别这些复合物的纯度图4)G-1、G-2、G-3、G-4、G-5和G-6总离子色谱显示图4A-4F都显示成单对称峰值六大复合物纯度分别为100%、98.1%、100%、100%、96.7%和99% | ||||||||||||||
| 六大复合体结构由UVIR识别一号H-NMR13C-NMR光谱学表1和GC-MS图4)内表1中,一号六大复合物H-NMR光谱数据显示存在甲类H级约0.90ppm,t,J=6.8Hz3HH级约1.30ppmb)和一一三代苯H级7.15t,J=7.6Hz一号H6.76dJ=7.6Hz一号H,6.66m,2H)ppmHyxyl组的存在经其广强VEO-H振荡IR频谱3330cm-1校验表1和碎片峰值108(cresol)图4)UV光谱最大值(MEOH)=275nm完全相同表1)所有数据显示六大复合物为3-alkylphenol19号,20码..方块链长度或方块链双联保数和位置不同 | ||||||||||||||
| 长度和不饱和程度 Alkyl链由数据推导一号H-NMR13C-NMR和分子离子峰值内图4A-4FG-1、G-2、G-3、G-4、G-5和G-6分子离峰值(m/z 276、302、328、304、330和330)对同单链C13:0、C15:1、C17:2、C15:0、C17:1和C17:1G5和G6用同质谱分析假设两种复合物与异构物相匹配,双联度分布于不同位置或cis-trans异构 | ||||||||||||||
| 以确认G-2(C15:1)、G-5(C17:1)和G-6(C17:1)双联结的确切位置双联结氧化分解4和 NaIO4产品配加3OH)2BF3并用GC-MS分析它们的甲酯产品图5)ellkyl链中双联结位置从氧化产物之分子离峰推导出[20码..举例说NMR信号G5H级5.36(2H)C级ppm显示alkyl链双联结双联结位置确定为++10-C17:1图5B)ekenyl碳检测C级ppm27.2双联保21号..G5识别为3-[(10Z)-thapadecylG2和G6双联结确定为+8-C15:1和+12-C17:1图5A并5C)G-2识别为3-[8Z-pentecenyl]phenol和G-6识别为3-[12Z-hetadecenyl19号-22号.. | ||||||||||||||
| G-1、G-3和G-4光谱数据与前几份报告一致[19号-22号..确定这些复合物分别为3-三十二苯酚、3-[9Z、12Z-heptadecieny]phenol和3-pentecylphenol结构公式列入图6. | ||||||||||||||
| 六大复合物中3-三丁基苯酚和3-二丁基苯酚分别为白粉、3-[8Z-五丁基]苯醇、3-[9Z、12Z-heptadecieny]phenol和3-[12Z-hetadecenyl]phenol为轻黄油 | ||||||||||||||
ginggol单片机抗扰 |
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| ginggol单片对癌症 HepG2、HGC和SW480细胞的抑制效果通过MTT方法测试所有测试单元均用六片集中度5、10、20、20和40微克/毫升处理48小时结果表明所有ginggol单片机对HepG2和HGC细胞产生显著增益效果,但对SW480细胞显示增益效果并负抑制率图7)必须指出,不同的癌症细胞对生物活性化合物的敏感度各不相同。IC50码六单片值C13:0,C15:1-QQ8,C17:2-Q912C15:0C17:1-QQ10C17:1-QQ12表2:43.28和37.98微克/毫升,5.69和3.97微克/毫升,19.95和11.09微克/毫升,38.94和29.73微克/毫升,19.79和10.22微克/毫升,22.76和11.4微克/毫升HGC细胞对低IC所有ginkol单片比较敏感50码值比HepG2单元格Ginggol带不饱和alkyl侧链显示HepG2和HGC细胞毒性比饱和侧链细胞高ginkgol单片链显示最大抗振活动Lee等人报告类似工作[23号CacanolC15:1显示比CacanolC17:1A549MCF-7细胞更强阻抗GinkgolC17:1-QQ10操作比ginggolC17:1-QQ12HGC和HepG2手机高ginkgolC17:2+912双倍保证金比ginkgolC17+1单双倍保证金没有表现出更强的细胞毒性并前研究显示GinkgolC17:1混合由两种异构体组成比ginkgolC15:1单片对A549、U251和SMMC7721细胞[17..假设:gingol异构体C17:1-QQ10和C17:1-QQ12对gingolC17:1混合物产生协同效应 | ||||||||||||||
警告段 |
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材料和化学 |
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| 阳光驱动ginkgobilobaL.arcognosy实验室药学院识别出2012年10月中国江苏省收集的sarcotoas旁听器样本存放中国江苏大学药学院药房 | ||||||||||||||
| 甲醇(HPLC级)从中国药厂有限公司购买瓦哈净化水(HangzhouWaha集团有限公司)用于HPLC实验本研究使用的其他化学物均分析等级,除非注明DMEM和胎儿牛血清从Gibco购买3-(4)5-二甲基二联二-二-二)-2-5-二联二苯并二联二联二联二联3OH)2BF314%(批号101624954)从Sigma购买 | ||||||||||||||
概论分析 |
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| UV2450光谱仪获取UV光谱仪(Shimadzu,日本)使用甲醇作为溶剂f-IR光谱录入Nicolet470FT-IR光谱仪 | ||||||||||||||
| 由G1311A泵和G1314bVWD检测器(美国AgilentCorp.)组成并用1260HPLC系统执行所有实验Agilent Chemstation软件B.02用于数据采集处理SHIMADZUShimp打包VP-ODSC18列(250毫米x4.6毫米5m)分析移动相位使用1.0ml/min流水ginkgol值为275纳米 | ||||||||||||||
| GC-MS分析使用ITQ100选择检测器并用TREGCULtra(美国热科学)安装TR-5MS毛片列Helium使用为载波气压0.38兆帕样本aliquot注入1m炉温度程序如下:初始温度100摄氏2分钟,然后斜坡20摄氏/分钟至240摄氏240度,20分钟以240摄氏240度结束注入温度保持在250摄氏度EI光谱从25到550Da获取 | ||||||||||||||
| NMR光谱采集器3400MHz操作一号H分析数和百兆赫数13C分析使用四甲基硅纳内部标准 | ||||||||||||||
ginggol单片机准备隔离 |
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| 多研究者描述过Ginkgo树叶或sarcotestas预隔离ginklica16-18号,22号..进一步决定大致遵循Yang等人描述的程序[17..解码框gglica酸按Paramashivappa等描述[16..完全隔离净化过程以图表形式显示图1.简言之,干ginkgobilobasacorta提取石油醚提取物,石油醚提取物用silica凝胶列分离色谱学使用石油醚EtO2-HCO2H(89:11:1v/v)获取ginklice分片ginkolice酸混合氢化钙140摄氏2H混合体用石油醚提取(60-90摄氏度)并集中注入棕色油棕色油进一步净化产生gingols | ||||||||||||||
| ginkgol单片机分离使用2个WK500LC-500PHPLC泵并用SPD-500UV检测器和marathonXT人工注入器杭州)装有1ml环路分离发生在WelchUntimateAQ-C18号HPLC列(250毫米x21.2毫米,10微米)和移动相2O(86:14,v/v)流率为24.0m/min,UV检测器对gingol单模器在280m监测 | ||||||||||||||
leavage单调链ginkols KMnO4和 NaIO4 |
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| 双键位置用氧化性退化测量20码..Ginkgol单片机(1 mg)溶解420 mm Nai44mna和1mL2高管3添加中 。反应混合27摄氏1H产品配法3OH)2BF314%和甲基酯产品由GC-MS识别(clum,TR-5MS)。链中上双联保位置取自甲酯产品 | ||||||||||||||
癌症细胞线与文化 |
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| 癌症细胞线HepG2肝细胞癌HGC(胃癌)SW480结肠癌取自生物化学和细胞生物学院(中国上海)。DMEM介质对细胞进行了适配,含10%胎儿牛血清、100单位/mlpnicillin和125mg/lsteptocin2. | ||||||||||||||
反语义活动解析 |
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| ginggols试管抗词活动用MTT法补齐5x104/ml细胞悬浮与HepG2、HGC和SW480细胞相对生长阶段细胞悬浮注入96井培养板,每口水井百分位百分位24H6gingol中分别添加100ml并同时设置控制井 并有6并行漏洞24h再培养后,每口井加20微升MTT解法(5 mg/m后取出生长介质,每口井加入100微LDMSO文化板完全振荡反应停止后,用酶标签仪检测570纳米值(Bio-Rad,USA)。抑制细胞生长率按下列公式计算: | ||||||||||||||
统计分析 |
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| 数据显示为++SDSPSS16.0软件用学生测试评价统计分析 | ||||||||||||||
结论 |
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| 提议通过PP-HPLC简单分解单步程序,六支gingol单片从gingol同族体分离并识别两种ginkol异构体C17:1-QQ10和C17:1-QQ12首次分离并识别出ginkgolC17:1混合抗扰活动结果显示,Ginkgol单片带不饱和侧链比侧链带活动高ginkgolC15:1在所有单片中都产生最强抑制效果ginkgolC17:1异构体双联产GinkgolC17:2显示相似抗试管使用ginggolC17:1 | ||||||||||||||
公有化 |
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| 本研究得到了中国自然科学基金会的支持(81372404)。振江市社会发展基础方案(SH2015072)和江苏高等教育机构优先学术课程开发 | ||||||||||||||
表一览 |
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图一览 |
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