流行的扩展频谱Ž²内酰胺酶和AmpCŽ²内酰胺酶在肠杆菌科和假单胞菌科孤立在特里普拉邦三级保健设置,印度

文摘

β-lactam抗生素是最广泛使用的化疗药物。对β-lactam抗生素产生耐药性的常见原因是β-lactamases的生产。分离、鉴定及抗菌谱的肠杆菌科和Pseudomonaceae临床样本。检测扩展频谱β-Lactamase和AmpCβ-Lactamase由表型方法生产肠杆菌科和假单胞菌科。文化隔离,标识和隔离的抗菌谱进行检测的扩展频谱β-Lactamase紧随其后双阀瓣协同测试和表型阀瓣证实试验,而AmpCβ-Lactamase被检测到阀瓣对抗试验和双阀瓣协同测试。200年的隔离,54%是扩展频谱β-Lactamase生产商,48.5%是AmpCβ-Lactamase生产商。主要ESBLs生产商是肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌。假单胞菌科,铜绿假单胞菌的88%和100%的荧光假显示存在AmpCβ-Lactamase和66%的Providencia alcalifaciens产生扩展频谱β-Lactamase和AmpCβ-Lactamase。的97 AmpCβ-Lactamase生产商,45.4%和54.6%是诱导和质粒介导AmpCβ-Lactamase生产商分别。这个研究显示高循环扩展频谱β-Lactamase和AmpCβ-Lactamase生产商在我们医院的设置。 Development of antimicrobial stewardship program based on the local epidemiological data and national guidelines is the need of the hour.

关键字

β-lactam抗生素,AmpC ESBLs,肠杆菌科,假单胞菌科。

介绍

β-lactam抗生素是最广泛使用的化疗药物。β-lactam抗生素细菌耐药性的常见原因是β-lactamases的生产。许多第二代和第三代头孢菌素和扩展频谱青霉素是专门设计用于抵抗主要β-lactamases的水解作用。然而,新的β-lactamases出现对这些新类的β-lactams介绍和电阻引起的,其中最重要的是扩展频谱β-Lactamase (ESBLs)和AmpCβ-Lactamase (AmpC) [1]。

ESBLs是酶水解oxyimino-cephalosporins赋予抵抗第三代头孢菌素如头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松monobactams aztreonam等。他们不主动对α-methoxy-β-lactams或cephamycins和碳青霉烯,但易受β内酰胺酶抑制剂如克拉维酸。质粒介导的,它不仅促进耐药性的传播β-lactams还要其他常用抗生素氟喹和氨基糖甙类等[2]。然而,AmpC除了对一代又一代的头孢菌素,cephamycins monobactam除了头孢吡肟和cefpirome并不被克拉维酸。他们不主动对碳青霉烯和由邻氯青霉素抑制,boronic酸[3]。

细菌产生的流行ESBLs不同20 - 71%在印度和全世界8 - 45% (4、5)。AmpC, Moland et al 1998和Sanguinetti等发现AmpC生产的患病率分别为10.67%和15.1%,而在印度,AmpC患病率从-47.3%至3.3不等(6、7、8、9)。不慎重的使用抗生素不仅使人获得感染的危险从ESBLs AmpC生产生物,还有β-lactams最常见处方的抗菌素,ESBLs和AmpC生产生物的出现在临床感染可以导致治疗失败,当前β-lactam治疗构成严重威胁。

尽管情况说明治疗β-内酰胺抗生素组被报告的临床医生没有这样的数据目前特里普拉邦的状态。因此本研究进行评估的患病率β-lactamase生产生物分离的微生物不同临床样本的特殊引用ESBLs和AmpC目的:

•隔离并识别常见的肠杆菌科和Pseudomonaceae临床样本。

•评估他们的抗生素敏感性模式。

•检测ESBLs和AmpC生产肠杆菌科和假单胞菌科。

材料和方法

这是一个基于医院的横断面研究微生物学系三级保健医院特里普拉邦在六个月内(May-Oct, 2012)。后的研究机构伦理委员会的间隙。

样本大小

200无重复细菌隔离属于肠杆菌科和假单胞菌科的成员来自不同系的临床样本收到了微生物研究中进行评估。

方法

收到样品为文化和敏感性测试分别接种在血琼脂和MacConkey琼脂和一夜之间保持在37°C的孵化器。第二天孤立的殖民地被革兰氏染色法和常规生化测试没有任何自动化仪器按标准实验室协议[10]。抗生素敏感性测试的孤立的生物进行穆勒辛顿琼脂(尼古拉斯)Kirby-Bauer盘扩散法在临床和实验室标准协会(CLSI)指南30μg羟氨苄青霉素,头孢西丁30μg,头孢呋辛30μg 30μg头孢噻肟,头孢他啶30μg 30μg头孢曲松钠,头孢吡肟30μg aztreonam 30μg imipenam 10μg,氧氟沙星5μg,诺氟沙星10μg 30μg阿米卡星、庆大霉素10μg, 30μg四环素、氯霉素30μg和哌拉西林/ tazobactam 100/10μg (Himedia,孟买,印度)(10、11)。β-lactamase -写明ATCC 25922用作大肠杆菌-控制和ESBL-producing肺炎克雷伯菌写明ATCC 700603作为阳性对照研究。假单胞菌,写明ATCC 27853作为控制铜绿假单胞菌菌株在这项研究中。

一个隔离被怀疑是一个ESBL生产商如果区大小的头孢菌素如头孢噻肟(30μg)≤27毫米,头孢他啶(30μg)≤22毫米,头孢曲松钠(30μg)≤25毫米和aztreonam(30μg)≤27毫米[11]。AmpC,头孢西丁阻力即区域大小对头孢西丁(30μg)≤17毫米被视为AmpC疑似菌株[8]。

双阀瓣ESBLs协同测试(DDST)

隔离接受了双阀瓣协同测试(DDST)阀瓣的安灭菌(20μg羟氨苄青霉素+ 10μg克拉维酸)被放置在尼古拉斯的表面;然后,光盘的头孢噻肟(30μg)和头孢他啶(30μg)保持20毫米除了安灭菌盘(中心距)。板块在37°孵化Covernight。增强头孢菌素的抑制带盘的克拉维酸盘被作为证据ESBLs生产[4]。

ESBLs表型盘确认测试(PDCT)

这样做是尼古拉斯。两个光盘,包含头孢吡肟(30μg),头孢吡肟+克拉维酸(30μg + 10μg)。区增加≥5毫米直径为头孢吡肟测试结合克拉维酸和其区域单独测试时确认ESBLs生产[4]。

盘测试(DAT)诱导AmpC对抗

在主要的抗菌谱发现了诱导AmpC板块的d样式抑制带头孢曲松(30μg)盘保持在20毫米(中心)毗邻imipenem(10μg)阀瓣[12]。

双阀瓣(DDSTa)质粒介导AmpC协同测试

AmpC被测试的双圆盘协同测试的基础上,利用邻氯青霉素AmpC的抑制剂。每个隔离接种穆勒辛顿琼脂板,按照CLSI指南。光盘的头孢噻肟(30μg)和头孢西丁(30μg)被放置10毫米(边到边)邻氯青霉素(500μg)阀瓣。孵化后37°C一夜之间,一个增强的抑制区头孢噻肟盘和邻氯青霉素盘之间理解为AmpC生产的证据。质粒介导AmpC生产商发现通过减去诱导AmpC生产商的数量总数的DAT AmpC生产商通过DDSTa [13]。

统计工具

编制数据使用卡方检验进行了分析和比较。

结果与讨论

在研究期间总计200连续非重复性的隔离检测生产ESBLs AmpC。隔离的来源来自尿、脓、血、痰、大便,CSF和其他人包括羊水、腹水、胸膜液、胆汁等(图1)。临床表现代表着分离显示,40%来自尿路感染(UTI), 20%来自外科手术部位感染(SSI), 15%来自败血症、8%来自下呼吸道感染和胃肠道感染和局部脓肿(各6%图2)。

孤立的生物分布规律表明,大肠杆菌是生物中最常被分离出来的其次是肺炎克雷伯菌、绿脓杆菌和变形杆菌(图3)。

这项研究显示,高速率的循环ESBLs生产商在我们医院的设置。测试在200株肠杆菌科和假单胞菌科,54% (108/200)ESBLs生产商,类似于其他研究罗德里格斯c . et al ., bloom Rao期票等人,Mathur p . et al ., ESBLs出现率是53.3%,分别为61%和68% (14、15、16)。因素可能导致的高患病率ESBL生产商可以留置导尿管,侵入性程序、疾病的严重程度和过度使用头孢菌素[17]。关于分布ESBLs生产商也显示类似的结果Jain a . et al ., Umadevi s . et al ., Mathur p . et al . (17、18、16)。物种明智ESBLs和AmpC生产生物分布显示主要ESBLs生产商大肠杆菌(56%),其次是克雷伯氏菌pneumonae和变形杆菌(表1)。假单胞菌科,铜绿假单胞菌的88%和100%的荧光假显示AmpC的存在。主要Non-ESBLs, Non-AmpC生产商伯克不过迟缓和志贺spp而66%的Providencia alcalifaciens ESBLs和AmpC联合生产。乔杜里B.N.等人的一项研究显示,79%的大肠杆菌和Klebsiellaspp的70%。ESBL生产商,这也符合我们的结果[19]。相比之下,研究印度以外次仁特区等人和Nijssen s等人显示低利率的ESBLs在这些地方,可能是由于合理使用抗生素和积极监测(20、21)。假单胞菌科,研究Umadevi s . et al . 2011和Laghawe a等人发现ESBLs患病率是14%和11.5%,类似于我们的结果[18 8]。我们的研究显示,48.5%(97/200)的隔离是生产者AmpC类似于谭结果显示T.Y. et al ., Hemalatha V。等人andNagdeo喷嘴速度等人在C Amp出现率被发现49.8%,分别为47.3%和47.8%(22日9,23)。

智慧物种分布的诱导和plasmid-mediated AmpC显示,97 AmpC生产商45.4%是诱导AmpC和54.6%是质粒介导。大肠杆菌表达最多的质粒介导AmpC隔离。83.3%(10/12),而81.8%(18/22)表达诱导AmpC铜绿假单胞菌(表2)。关于诱导模式和质粒介导AmpC生产商,结果显示在其他研究萨布哈k . l . et al ., Parveen, m . et al.2010 Laghawe a。r . et al . 2012反映了类似的趋势[24日25日26日]。假单胞菌spp。ESBLs生产更少的肠杆菌科相比,因为他们的阻力是由其他机制,如生产高度AmpC,β-lactamases金属、缺乏药物渗透由于名叫突变和某些外膜蛋白的损失和射流泵(18日27)。

在我们的研究中,我们还观察到5%(10/200)对imipenem电阻显示这可能是由于生产carbapenamase和β-lactamasesis类似于金属的断言乔杜里B.N.等人,Umadevi s . et al . 2011[19日18]。随之我们也怀疑K1的β-内酰胺酶在2%(4/200)和Inhibitor-resistantβ-lactamase隔离在1%(2/200),需要进一步的调查和鉴定确认。

整体隔离的抗生素耐药模式显示高度的抗羟氨苄青霉素,3^{理查德·道金斯}一代头孢菌素和四环素而头孢吡肟imipenam,氨基糖甙类显示更少的阻力(图4)。

进一步分析分离株的耐药模式显示co-expression ESBLs AmpC也与更高程度的阻力对非β-lactam抗生素,而5%电阻显示imipenem生产主要由non-ESBLs non-AmpC明示(Fig-5),类似于Mshana研究静电的等人,次仁特区等。[28日20]。

结论

这项研究是进行评估ESBLs患病率和AmpC肠杆菌科和假单胞菌科孤立在三级保健设置。高度的阻力对大多数隔离观察从不同的临床样本导致情况说明治疗β-内酰胺抗生素组。这项研究的结果进一步强调发展的必要性抗菌管理程序根据当地的流行病学数据和国家的指导方针。预防措施像连续监测和严格执行感染控制实践还有很长的路要走在遏制耐药性的威胁我们的设置。除了流行的趋势,准确了解确切的ESBL亚型,状态的其他β-lactamases (AmpC, carbepenemases K1β-lactamases,等等)是至关重要的有关机构必要的干预措施和策略,针对目前的情况进一步恶化。这需要进一步的研究与DNA分子特征像探索大规模,聚合酶链反应、限制性片段长度多态性和等电点聚焦。还定期监测将突出生物分布的变化,抗生素敏感性模式和中等收入国家的常用药物。这将有助于在制定我们医院的抗生素政策将帮助临床医生在处方适当的抗生素。

确认

作者感谢研究所负责人和部门负责人微生物学以及其他员工的支持和帮助。

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