苹果生产马赛克VirusA¢€“免费梨和罗莎damascena通过组织培养植物

文摘

化学药剂的效果病毒唑(利巴韦林)水平,罗莎damascena和Pyrus普通的生产在这个研究调查。结果得出结论,25% Chlorox减少污染降低到最小值,给生存的梨和玫瑰增长比例最高。最好的结果的玫瑰品种的愈伤组织生长和拍摄长度记录的3.0或4.0毫克/升BA和2.0 mg / l IAA。交互效应表明,梨外植体的外植体在女士中含有1.0毫克/升BA + 1或2 mg / l IAA给最长的芽(0.92厘米和0.66厘米)。数据也记录,利巴韦林的浓度(20 - 100 mg / l)是有效地消除ApMV,而(10 - 100毫克/升)没有成功地消除ApMV罗莎或梨。

关键字

罗莎波纹,Pyrus普通的MS培养基,Chlorox BA、IAA病毒唑(利巴韦林)

介绍

梨是一种最古老的水果作物广泛生长在温带和亚热带地区(1]。

大马士革玫瑰(Rosa damascena轧机)从蔷薇科的家庭是最重要的药用植物之一。玫瑰植物通常由茎岩屑传播,这些技术用于生产无病植物(2]。

苹果花叶病毒(ApMV),最古老的已知病毒的疾病之一苹果树引起明显症状在树叶和水果3]。

组织培养技术已被证明为一个潜在的工具,快速和大规模传播的几个植物物种(4]。

拍摄的再生两个梨(Pyrus普通的L。),即Š¹bartlettAŠ一¹¹和ŠdargaziAŠ¹是成功开发基因工程研究的5]。梨(Pyrus物种)拍摄技巧和节点从三个梨基因型外植体培养在Murashige斯库中(MS)和五个不同植物生长调节剂组合(6]。细胞分裂素的来源,利用影响腋窝芽的诱导和增殖梨树(7]。

Saklani et al。8)发现最好的乘法节点玫瑰外植体发生在软面包卷和KN (5.0 mgl-1 + 2.5球型投手¹)。席尔瓦et al。9在梨树“Cascatense”发现,30 g / L蔗糖浓度是最有效的芽的生长和发育10]。

利巴韦林是一个著名的抗病毒药物的高效对几种DNA和RNA病毒感染及其蛋白质合成(11]。

Paprstein et al。12]研究试图完全消除病毒,利巴韦林在低浓度20 mg / l并不成功。然而,成功的化疗与利巴韦林100 mg / l是76% ACLSV第二轮后消除。

Cieslinska [13)在体外温热疗法和化疗的研究,发现利巴韦林在25 - 100 mg / l浓度是有效地消除ACLSV从PNRSV李子拍摄“皇后”。三唑核苷的浓度更高(50 - 100 mg / l)是植物性毒素的治疗,特别是在“皇后”的李子。

胡锦涛et al。(14]植物体外沙子梨(Pyrus pyrifolia简历。金水在15 - 25),表明化疗与利巴韦林μg /毫升30天可以增强的生长和扩散在体外梨的植物。

Paprstein et al。12]研究试图完全消除病毒,利巴韦林在低浓度20 mg / l并不成功。

胡锦涛et al。(14)表示,利巴韦林治疗15和25 lg /毫升导致病毒消除率为74.4%和75.0%,分别。

马赛克大概是最常见的病毒性疾病的玫瑰。方法也分别应用化疗和热疗及其抗病毒效果比chemo-thermotherapy [15]。

材料和方法

这些实验在生物技术部门进行,理学院,塔伊夫大学在2015年,2016年和2017年。本研究旨在探讨生产苹果花叶病毒无梨和罗莎damascena植物通过组织培养,选择最好的增长。

梨芽和罗莎damascena(塔伊夫罗斯)植物请从塔伊夫地区,沙特阿拉伯王国。积极生长芽作为外植体来源。收集终端芽从种植植物和切成0.5 - 1.5厘米。

外植体消毒

茎尖外植体规模从5到10毫米的长度被切除,洗下运行的自来水。外植体被浸泡在一个表面消毒无菌溶液不同浓度的次氯酸钠溶液(10年,20年,25 - 30%)10分钟,然后其次是乙醇酒精一分钟,最后蒸馏水冲洗几次。

媒体的准备

所描述的基础培养基MS Murashige和斯库用于体外培养梨和玫瑰。媒介与phytagel固化(2.5 gl-1),和pH值调整到5.7 -5.8 1 n KOH或前1 n HCl phytagel加法和媒体在121ºC 1.1 kg.cm热压处理过的²20分钟。文化是房间的孵化室与16岁以下3000勒克斯25±2ºC h光周期和8 h黑暗。

外植体在试管中包含MS培养基培养,补充与蔗糖(25 g / l)和吲哚乙酸(IAA)的不同组合和苄基腺嘌呤(BA)补充道。组合如下:

1)在1毫克/升BA和IAA 1.0和2 mg / l

2)BA 2 mg / l和IAA在1.0和2 mg / l

3)英航在3 mg / l和IAA 1.0和2 mg / l

4)英航1.0 4 mg / l和IAA和2 mg / l

愈伤组织形成表达如下:

+指:愈伤组织< 2 g /外植体

+ +是指:2 g < < 4 g /外植体愈伤组织

+ + +指:愈伤组织> 4 g /外植体。

消除Apmv-free梨和罗莎波纹(塔伊夫罗斯)化疗治疗

水果和罗莎damascena(塔伊夫罗斯)树感染苹果花叶病毒被用作种植材料的来源和健康的植物控制,树选择ELISA检测病毒后几次的测试。硬木材切割样品从梨(Pyrus普通的)和罗莎damascena(塔伊夫罗斯)植物进行了研究病毒的影响消除化疗(Virazole-Ribavirin)。

收集到的样本在M亚文化圈。年代中期补充与不同浓度的(Virazole-Ribavirin) 10毫克^{- l},20毫克^{- l},30毫克^{- l}没有Virazole-Ribavirin和控制。使用琼脂在7 g^{- l}和蔗糖在30克^{- l}。介质从培养4周后,以下数据然后由DAS-ELISA检查和测试记录的百分比生存的植物一个月后。

统计分析

获得的数据进行了分析使用完全随机设计(两个因素)。最显著的差异(LSD)测试是用于比较意味着根据钢的方法和Torri [16]。

结果

配后

所示图1不管绝育手术水平的梨和玫瑰植物初步实验旨在调查后的浓度的影响商业漂白剂(Chlorox 52.5 g / l NaOCl)和灭菌过程的持续时间;在浓度和持续时间的测试中,25% Chlorox +滴洗涤剂(渐变80)30分钟在70%乙醇浸泡预处理的芽后一分钟,减少污染降低到最低水平,给生存的梨和玫瑰增长比例最高。

英航和IAA对增加植物的生长和发育

生存%

关于生存的反应比例媒体组成(表1)。结果清楚地表明,最高的生存比例(100%)被记录无论媒体包含2或3毫克/升BA补充1 mg / l IAA,也在集中4毫克/升BA补充2 mg / l IAA。

表1。英航和IAA的治疗效果在外植体的生长和发育罗莎damascena(塔伊夫罗斯)工厂。
意味着±SE *:比较组之间差异显著(p < 0.05)使用学生学习任务。

英航在1.0,2.0或3.0 mg / l + 1 mg / l IAA以及在4.0毫克/升BA + 2 mg / l IAA的MS培养基是最有效的治疗方法在提高生存相比,比例控制和其他治疗方法。培养玫瑰外植体在控制媒体生存比例降低到最小值(60.00%)。

愈伤组织形成

所示表1、愈伤组织形成媒体的品种最好在介质补充2 mg / l IAA和介质含有4.0毫克/升BA + 2.0 mg / l IAA。最好的玫瑰品种的愈伤组织增长的结果被记录的3.0或4.0毫克/升BA和2.0 mg / l IAA。没有获得当外植体愈伤组织生长没有激素的MS培养基上培养。增加一个伟大的玫瑰品种的愈伤组织增长记录的增加,乙酰天冬氨酸与2 mg / l 4毫克/升BA (图2)。

拍摄数量

所示表1,不管媒体组合、添加BA在不同浓度增加了拍摄数量与控制和英航在3.0或4.0 mg / l 2 mg / l IAA产生最多的芽/外植体。乙酰天冬氨酸的含量增加到1 mg / l减少芽的形成在大多数治疗(图3)。

越来越多的玫瑰品种外植体中包含3或4毫克/升BA女士给了最多的芽/外植体(分别为4.60和6.0),而拍摄的最低数量的女士(0.80)被记录在控制介质没有BA或IAA。

拍摄长度

结果所示表1,这表明之间的拍摄长度有显著差异激素治疗。女士文化美狄亚4毫克/升BA和1或2 mg / l IAA形成显著的平均拍摄长度比其他媒体,拍摄长度分别为5.70和7.70厘米,分别对玫瑰文化。

外植体f在女士中包含0 mg / l BA + 0 IAA给最短的芽(0.80厘米)。

叶芽

所示表1,不管媒体组合、添加BA在不同浓度增加了拍摄数量与控制和英航在3.0或4.0 mg / l IAA产生最多的芽/外植体。包含4毫克/升BA的MS培养基给叶数字/外植体(6.80)最高,而最低数量的叶子被记录介质没有女士BA或IAA。

英航和IAA对梨植物的生长和发育

生存%

关于生存的反应比例媒体组成(表2),结果清楚地表明,最高的生存比例(100.00%)与未经治疗的治疗记录。

添加BA为3.0 mg / l + 1或2 mg / l IAA以及在4.0毫克/升BA + 1或2 mg / l IAA的MS培养基是最有效的治疗方法相比,增加生存比例与其他英航治疗。培养pear外植体对媒体包含2 mg / l IAA + 1毫克/升BA生存比例降低到最小值。

愈伤组织形成

所示表2梨外植体的愈伤组织的形成是最好的在中补充了BA 2 mg / l + 1或2 mg / l IAA和介质包含4毫克/升BA + 2.0 mg / l IAA和产生极大的提高愈伤组织的生长。提高水平的BA + 0 IAA没有愈伤组织的形成。降低愈伤组织生长得到当外植体在MS培养基培养与英航的低水平。

表2。英航和IAA治疗对梨植物外植体生长和发展。意味着±SE *:比较组之间差异显著(p < 0.05)使用学生学习任务。

拍摄数量

所示表2,不管媒体组合、梨外植体形成的芽更重要的是在2和3毫克/升BA + IAA在1或2 mg / l,分别给了3.40和3.60芽。添加BA 1 mg / l + 2 mg / l IAA拍摄数量减少而控制或其他英航治疗和产生芽的最低数量/外植体(图3)。

拍摄长度

结果所示表2指出,有一个显著的差异之间的拍摄长度梨外植体治疗。未经处理的控制梨外植体形成显著的平均拍摄长度超过其他疗法,和生产1.36厘米。

添加BA或IAA MS培养基对拍摄长度没有显著的影响(除了在3或4毫克/升BA + IAA在1或2 mg / l)。交互效应表明,梨外植体的外植体在女士中含有1.0毫克/升BA + 1或2 mg / l IAA给最长的芽(0.92厘米和0.66厘米)。

叶芽

所示表2女士,不管梨外植体在控制中形成的叶子更重要比1或2毫克/升BA + 1或2 2.60 mg / l IAA和生产。添加在3或4毫克/升BA + 1或2 mg / l IAA离开数量增加而控制和生产最多的叶子/外植体。

英航和IAA治疗对梨植物外植体生长和发育(表2)。

消除Apmv-free梨和罗莎damascena(塔伊夫罗斯)化疗治疗

结果在表3表明,体外化疗应用于消除苹果花叶病毒。ELISA检测进行化疗后病毒唑(利巴韦林)40天表示,在浓度(20 - 100毫克^{- l}在消除ApMV)是有效的。但浓度(10 - 100毫克^{- l})没有成功地消除ApMV罗莎或梨而更高浓度的利巴韦林(30 - 100毫克^{- l})表现出茎尖的梨和罗莎化学毒性的迹象图4 - 8)。

表3。化学物质的影响病毒唑(利巴韦林)ApMV-free罗莎波纹(塔伊夫Rose)和梨。

讨论

本研究的目的是检测生产苹果花叶病毒脱毒梨和罗莎damascena植物组织培养,选择最好的增长。

苹果花叶病毒可以引起疾病的核果和罗莎易感的小苗,极大地降低感染的增长和生产率树木需要防止果树造成的生产力损失通过组织培养病毒。

数据显示,梨外植体的愈伤组织的形成是最好的在中补充了BA 2 mg / l + 1或2 mg / l IAA和介质包含4毫克/升BA + 2.0 mg / l IAA和生产大提高愈伤组织的生长。得到了相同的结果与Ilahi等人Sakr et al。17,18]。

本研究的结果发现,不管媒体组合、梨外植体形成的芽更重要的是在2和3毫克/升BA + IAA在1或2 mg / l,这结果是在良好的协议与结果Ilahi et al。17)获得良好的射击扩散与1、2和3毫克/升BA。Tasy [19康乃馨的简历Opale],提到拍摄生产BA浓度的增加而增加(从0.0到4.0 mg / l),但增加射virtification El-Sawy Bekheet, (20.在花叶万年青属picta简历。Tropica。发现,英航在1.0或2.0 mg / l是更有效的提高芽的数量。此外,ElSawy et al。21龙血树属植物的简历)。三色旗,获得最多的芽/外植体4.0毫克/升BA。

利巴韦林是一个著名的抗病毒药物的高效对几种DNA和RNA病毒感染及其蛋白质合成(11]。

增加利巴韦林集中在组织文化导致畸形和不必要的芽的增殖和抑制芽的生长15]。

利巴韦林是植物性毒素的浓度就越高。植物处理(80 mg.l¹)利巴韦林贫困增长和顶点坏死。利巴韦林的最高浓度(100 mg.l¹)引起的死亡苹果芽(22,23]。

化疗在消除PNRSV的抗病毒效果(p < 0.001)显著高于ArMV或合并感染的病毒使用不同浓度的利巴韦林(15,24]。

结论

传播和发展的罗莎damascena(塔伊夫Rose)和Pyrus普通的体外文化中显著提高是由于生长调节剂治疗。此外,现有的证据表明,病毒唑(利巴韦林)浓度可能解释下植物研究的日益增长,因此增加了植物保护病毒的复制,从而抑制它。

引用

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