研究和评论:医学和健康雷竞技苹果下载科学杂志》上
菜单ISSN: 2319 - 9865
ISSN: 2319 - 9865
Sajid阿里1*,Nourin马哈茂德1巴希尔,艾哈迈德2,Ibrar艾哈迈德2,Ijaz阿里3和Jehanzeb Afridi4
1生物技术学系阿卜杜勒·瓦利汗大学马尔丹马尔丹,开伯尔-普赫图赫瓦省、巴基斯坦
2生物技术和微生物学中心白沙瓦,开伯尔-普赫图赫瓦省,巴基斯坦白沙瓦大学
收到日期:02/01/2017接受日期:23/01/2017发表日期:30/01/2017
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介绍和目的:乙型肝炎和丙型肝炎感染是肝细胞癌的主要原因。与世界其他地方不同,乙肝病毒患病率和发病率增加一天在巴基斯坦。肃贪会很少人乙肝病毒传播途径及其后果的信息。本研究的目的是确定的活跃的乙型肝炎病毒感染(病毒血症)和e抗原的相关性和HBV DNA在确认HBsAg阳性受试者肃贪会和排除错误的积极性与Elisa自卑的HBsAg筛查。
方法:共171例血液样本确认HBsAg阳性患者带来实时PCR实验室从三个地区,地区Bunir白沙瓦和科哈特的确认活动的乙型肝炎病毒感染(病毒血症)。样本筛查活动通过实时PCR乙型肝炎病毒感染。随着活跃的乙型肝炎病毒感染,在45岁患者的样本,e抗原和HBV DNA的相关性也决定HBsAg阳性主题,使用Minividas, FIA技术。
结果:活跃的乙型肝炎病毒感染的速度在三个地区,地区Bunir科哈特和白沙瓦是54%,分别为47%,37%。此外,45例,随机选择了e抗原阳性患者的血液和anti-HBe状态。总45例,13例(29%)患者e抗原阳性,其余32 (71%)e抗原阴性。活跃的e抗原阳性和阴性患者乙型肝炎病毒感染是85%和53%,分别
结论:认为活跃的乙肝病毒感染率是不同地区的肃贪会人口变量,在Bunir较高,其次是在科哈特,至少是在白沙瓦。这旁边有强相关性e抗原和活跃的乙型肝炎病毒感染。
乙肝病毒(乙型肝炎病毒),肃贪会(开伯尔-普赫图赫瓦省),Ct(阈值周期)、聚合酶链反应(聚合酶链反应)。
称为肝炎,肝脏炎症是由不同病毒引起甲肝、B、C、D和E。乙型肝炎炎症是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的。乙型肝炎感染有时消除从身体本身,但如果这种状况持续下去,然后它会导致一些严重的后果就像肝脏组织的不足,肝硬化和肝细胞癌(HCC) (1- - - - - -4]。最常见的恶性肿瘤之一,是肝细胞癌和增加估计5,每年60000例新病例,在男性中,被认为是第三个最常见的死因(5]。在世界范围内,乙型肝炎是一个伟大的医疗卫生问题,尤其是在发展中国家。据估计,全球大约三分之一的人感染了乙肝病毒。乙肝病毒感染在巴基斯坦也是一个严重的问题,因为它已经被基于社区的一项研究显示,31%的个人有乙肝核心抗体(HBcAb),而乙型肝炎表面抗原(HBsAg)被发现在4.3%的人口6- - - - - -8]。
乙肝病毒属于家庭肝病毒科包括几个属的部分基因组双链(KB)长度大约3.2公斤基地。乙肝病毒具有较高的遗传变异性由于缺乏校对能力由病毒聚合酶(9,10]。这种基因变异的基础上,乙肝病毒已被分为八个基因型即,B, C, D, E, F, G和H (11- - - - - -14]。
在开伯尔-普赫图赫瓦省(KPK),巴基斯坦的省份之一,早期的研究已经进行了发现乙型肝炎感染的患病率,基于酶联免疫吸附测定(ELISA),但是没有研究进行了确定主动确认HBsAg阳性患者乙型肝炎病毒感染。人们通常相信HBsAg筛选试验的格式,因为他们不知道主动感染,这是非常重要的为了治疗的摄入量。这将排除假阴性和假阳性的概率,有时,与乙型肝炎病毒相关格式的筛检试验。本研究的目的是找出,活跃的乙型肝炎病毒感染的速度HBsAg阳性患者,虚假的积极性与HBsAg筛选试验和相关e抗原(乙肝包被抗原),anti-HBe和乙肝病毒DNA。
伦理批准
本研究经伦理委员会批准的生物技术和微生物学的中心,白沙瓦大学委员会系的生物技术,阿卜杜勒·瓦利汗大学,马尔丹。
区域选择
本研究在实时PCR实验室dabgarigarden,白沙瓦,自2016年1月至2016年12月。三个地区选择在这项研究中,这些都是地区Bunir科哈特和白沙瓦没有PCR试验设施区Bunir科哈特,这就是为什么样本诊断实验室白沙瓦。血液样本被称为这个活动乙型肝炎病毒感染的实验室确认。这些样本被从不同的临床实验室、医院和医生诊所。80、51和40个样本地区Bunir提到,分别科哈特和白沙瓦。
入选标准
在这项研究中,只有那些被认为是病人HBsAg阳性。
DNA提取
DNA提取所有HBsAg阳性血清按照指令的列提取工具包(Roboscreen德国)。
聚合酶链反应(PCR)
为每个示例使用PCR进行实时PCR(美国造父变星)和Roboscreen放大装备有内部控制对于每个样本为了排除假阴性结果。PCR是表现在以下三个步骤:
•板牙混合制备
这是由混合放大设备的以下内容。
| 内容 | 卷1样品 |
|---|---|
| 2 x反应混合物(含核苷酸) | 12.5 ul |
| MgSo4 | 1.5 ul |
| 引物和探针 | 1 ul |
| Taq DNA聚合酶 | 1 ul |
| PCR级水 | 4 ul |
| DNA模板 | 5 ul |
| 总体积 | 25 ul |
•板设置
20 ul反应混合加载在PCR反应管紧随其后的模板DNA在每个管。未知样品连同积极和消极控制标签,放置在加热块PCR机器。通过软件、样本和控制位置。
•热协议
以下热协议根据设备要求有放大的乙肝病毒DNA。
| 95°C | 2分钟 |
| 95°C | 30年代 |
| 57°C | 1分钟(阅读) |
| 72°C | 30年代到40 2周期 |
•分析结果
结果分析了通过设置Ct(阈值周期)为每个样本值。Ct值小于32周期被认为是积极的和超过32个被认为是消极的。每个正负样本的验证了内部控制的帮助下,已经提取的样本。样品有较高花期FAM的通道和低或没有开花维克通道呈阳性乙肝病毒DNA,而样本在厘清通道低或没有开花- HBV DNA,但其内部控制显示高花期维克通道,从而证实了结果的有效性。
•e抗原测定和anti-HBe
共有45个样本被送往确定e抗原和anti-HBe。这样做是通过遵循制造商的指令(Bio-Murex、Minividas、法国)。这是基于一个设备有示例加载。它也有信号试剂和洗缓冲区。简单,200 ul血清加载到设备的,其次是将设备放置在机器的块,然后通过分配测试位置和协议作为制造商的手册指示,在30分钟结果。
活动HBsAg阳性患者乙型肝炎病毒感染的比率在不同地区的肃贪会是如下:
乙型肝炎病毒感染的速度在不同的地区
在地区Bunir 80 HBsAg阳性样本,43(54%)为HBV DNA阳性23(53%)是男性和20例(47%)是女性。在地区科哈特,51阳性患者,24例(47%)患者有一个活跃的乙型肝炎病毒感染。在这些21(87%)是男性,只有3人(12%)是女性。在白沙瓦地区,12的40例(3%)有活跃的乙型肝炎病毒感染10(83%)是男性,只有2(17%)是女性(表1)。
| 地区的名称 | HBsAg阳性患者总数 | PCR阳性样本 | 男性 | 女 |
|---|---|---|---|---|
| Bunir | 22 | 12 (54.54%) | 6 | 6 |
| 科哈特 | 17 | 8 (47.08%) | 7 | 1 |
| 白沙瓦 | 16 | 6 (37.5%) | 5 | 1 |
| 总 | 55 | 26 | 18 | 8 |
表1。活跃的乙型肝炎病毒感染的速度开伯尔-普赫图赫瓦省的不同地区。
e抗原相关性,Anti-HBe和乙肝病毒DNA
此外,45例,随机选择了e抗原阳性患者的血液和anti-HBe状态。总45例,13例(29%)患者e抗原阳性,其余32 (71%)e抗原阴性但anti-HBe积极。活跃的乙型肝炎病毒感染在e抗原和anti-HBe阳性患者分别是85%和53% (表2)。
| HBsAg阳性样本 | e抗原阳性样本 | Anti-HBe阳性样本 | Anti-HBe负 样品 |
PCR阳性样本 |
|---|---|---|---|---|
| 29日 | 10 | 10 | 8 | |
| 19 | 4 |
表2。e抗原相关性,Anti-HBe和PCR。
乙肝感染的地理区域的不同而不同。约2 - 3%的世界人口已经感染了乙肝病毒和严重的肝肝细胞癌等疾病的主要原因(1]。在巴基斯坦的患病率是3 - 4%15),每年贡献更多的死亡率。各种因素在乙肝病毒的感染率更高。最重要的是传播的关于源缺乏认识和筛选过程。分化的积极和稳定的乙型肝炎病毒感染是最常见的矛盾如今一样常见血清学概要文件。病人HBsAg大多使用基于PCR诊断技术,这一趋势在过去十年新兴(16- - - - - -18]。然而,在许多国家和地区与西方国家一样,美国和其他高或中等收入国家,ELISA仍然是诊断的首选方法。它已经表明,一些患者为e抗原阴性,显示活跃的乙型肝炎病毒感染和乙型肝炎病毒DNA,应用PCR方法,反之亦然(19]。
在这项研究中,活跃的乙型肝炎病毒感染的速度决定在肃贪会的三个地区的人口。我们分析了共171个样本,活跃的乙型肝炎病毒感染是46%。区明智的感染率是变量,高区Bunir(54%),其次是在科哈特(47%)和至少在白沙瓦(37%)(图1)。大量的研究表明,巴基斯坦的中间区乙型肝炎病毒感染(6- - - - - -8]。尽管如此,这项研究仅仅强调共同HBsAg活跃的乙型肝炎病毒感染,而不是基于Elisa筛选化验,的基础上,大多数的研究依赖和已经确定乙型肝炎病毒感染的患病率。本研究是基于最先进的,适当的和精确的技术,PCR。然而率低于50%,显示感染率的中级水平。
图1所示。直方图显示活跃的乙型肝炎病毒感染KPK的三个地区之一。
在这些地区,乙肝病毒感染率没有确定,我们第一次活跃的乙型肝炎病毒感染的速度决定的。感染率在这些变量,是高区Bunir,中间区科哈特和至少在白沙瓦(表1)。区Bunir外围地区;远离首都区,这就是为什么这些人低意识关于传播路线和预防感染的方法。作为受过良好教育卫生专业人员缺乏在该地区和人民为他们的治疗取决于非卫生专业人员,使用相同的注射器用于和传输是隐藏的很多人感染。第二个重要的原因是村庄的牙科实践中贡献更多的传播以及其他感染区Bunir人民。贡献更多的活动感染的第三个原因是缺乏信息适当的筛选程序这些病人HBsAg,但是他们没有意识到他们的身体健康状况,因此当不小心屏幕自己感染接触。
在区科哈特活跃乙肝病毒感染率为47% (表1),低于Bunir和相对高于白沙瓦。区科哈特Bunir相比发达国家和这里的人们受过良好教育。相比之下,这些人有良好的信息传播,发病机理和预防乙肝病毒的感染。但仍然在科哈特在外围身边,人更少的资源的信息,不同部落的人也转向科哈特,这些可能是乙型肝炎病毒感染的传播。
白沙瓦是KPK的首都;在这个感染率为37% (表1),在这三个地区是最低的。住在这里的人们大多受过教育的和非常清楚事实的传播路径,后果,治疗和预防这就是为什么感染率很低。然而,由于某些情况下不同种姓的人,语言和地区已经迁移到白沙瓦可能传播乙肝病毒感染的可能原因。
乙肝病毒感染在男性人口比女性相对较高(表1)。这也被其他研究显示[20.),雄性比雌性更乙型肝炎病毒感染的机会。更多的感染率在男性的原因可能是男性有更多的机会接触不同的路线传播像理发师,工作时不卫生的食品和水的摄入量,甚至上瘾的药物通过使用相同的注射器。
此外,活跃的e抗原和anti-HBe积极患者乙型肝炎病毒感染是85%和53% (表2)。在这项研究的相关性e抗原和HBV DNA为85% (表2)。一些研究也有类似的关系,而有不同的相关性。一些研究显示100% e抗原之间的相关性和乙肝病毒DNA (21),而其他人则显示相关性[80 - 90%22]。相关性的差异可能是由于不同的地理区域,病毒颗粒的强度/感染或阶段可能是由于自发的间隙。
保持查看上述结果得出患者e抗原阳性,会积极乙型肝炎病毒感染在大多数情况下。因此,强烈建议PCR的人无法获得,由于PCR不可用或由于社会经济原因,可以为e抗原摄取治疗屏幕。
得出结论,活跃的乙肝病毒感染率是不同地区的肃贪会人口变量和人有e抗原阳性状态将有一个活跃的乙肝病毒感染在大多数情况下。
作者宣称没有利益冲突。
作者感谢科技的理事会(难道),巴基斯坦白沙瓦,肃贪会/资金和实时PCR实验室进行这项研究。