重新评估糖尿病作用的吡格列酮四氧嘧啶诱导糖尿病动物模型

文摘

这项研究包括吡格列酮的药理筛选,这是一个有效的和经常规定治疗2型糖尿病。体内研究包括三个与6小鼠动物模型,一个是控制或治疗和其他两组四氧嘧啶和一组药物治疗对糖尿病患者比较吡格列酮的药理反应。采用四氧嘧啶诱导糖尿病的动物。β-cytotoxin四氧嘧啶,化学名为mesoxalylurea mesoxalylcarbamide,和2,4,5,6-tetra-oxohexahye-4-pyrimide或嘧啶tetrone已广泛用于体内诱导„化学diabetesa€Ÿ在动物。政府吡格列酮的血清葡萄糖水平降低四氧嘧啶(70毫克/公斤)诱导糖尿病小鼠相比。

关键字

吡格列酮治疗糖尿病药,四氧嘧啶

介绍

糖尿病是一个主要的和世界各地日益严重的公共卫生问题,据估计1985年全球流行的3000万,1.43亿年1998,2000年1.5亿人,到2010年预计将增加到2.2亿人,最近估计项目诊断为2型糖尿病患者的数量在2025年之前将增长逾一倍,达到3亿(1]。1型糖尿病称为胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)或青少年发病糖尿病和2型糖尿病描述为非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)或成人发病糖尿病。抗糖尿病的药物能够降低血清葡萄糖水平在糖尿病动物有不同的机制。有各种各样的模型研究这个属性的药物在不同的实验动物。噻唑烷二酮类或glitazones)类,目前包括罗格列酮和吡格列酮,是有效的并且经常规定治疗2型糖尿病,补充现有的治疗方法和形式处理算法的一个重要组成部分。十年以来介绍,肥胖的患病率,糖尿病和代谢综合征增加了指数(2,3]。

材料和方法

四氧嘧啶一水

采用四氧嘧啶诱导糖尿病的动物。β-cytotoxin四氧嘧啶,化学名为mesoxalylurea mesoxalylcarbamide,和2,4,5,6-tetra-oxohexahye-4-pyrimide或嘧啶tetrone已广泛用于体内诱导„化学在动物糖尿病”。它会导致糖尿病动物的能力破坏胰岛素的胰腺β细胞。四氧嘧啶和N取代四氧嘧啶衍生物选择性毒性胰腺β细胞,与其他内分泌细胞和外分泌实质细胞保存完好,即使在高浓度(4,5]。

准备70毫克/公斤的四氧嘧啶一水的解决方案

准确重量0.7通用四氧嘧啶一水,转移到100毫升注射用水和溶解的四氧嘧啶。我们有解决方案7毫克/毫升的浓度。

吡格列酮

吡格列酮是一种thiazolidinediones噻唑烷二酮类),主要是通过降低胰岛素抵抗。他们为改善胰岛素敏感性的作用机制尚未完全清楚。他们是选择性受体激动剂的过氧物酶体proliferator-activated受体γ(PPARγ)。PPARγ受体的激活导致葡萄糖运输到细胞增加脂肪组织,骨骼肌和肝脏[6]。

动物模型

伦理批准了在选择动物模型。Swiss Albino 老鼠 之间 的 权衡 29-36 通用  5 通用 汽车 被 用于 目前 糖尿病 screening.动物们被安置在聚丙烯的笼子里。笼子里的床上用品材料定期改变。The 实验 房间 的 温度 在 25 C 保持 常数 , 闪电 一直 artificial.序列是12小时光和12小时黑暗。传统的实验室提供了饮食和水随意。

葡萄糖评估工具包(GOD-POD方法)

的试剂用于定量测定血清或血浆中葡萄糖。血清葡萄糖被氧化葡萄糖氧化酶(上帝)生产葡萄糖酸和过氧化氢。然后过氧化氢氧化加上4氨基- antipyrene (4-AAP)和苯酚的过氧化物酶(POD)产生一个红色quinoeimine染料以505海里。505纳米的吸光度与浓度成正比的葡萄糖样本。

吸光度的色彩解决方案直接与葡萄糖的浓度成正比,当以505海里(7]。

体内动物实验

通过复古轨道穿刺清除血液(ROP)方法

老鼠分为16个组,每组6和标有苦味酸。8]他们禁食18小时,水被随意。18小时后收集的空腹血样复古轨道穿刺(ROP)。收集血液样本从毛细管流入瓶含有抗凝剂溶液约0.5 1毫升的血液。

准备测试的Accurex葡萄糖统计比色试验神Pod方法

最初的空腹血清葡萄糖被酶比色法估计。按这取血的动物(小鼠)1.5毫升micro-centrifuging管和单独的等离子体在30分钟内2800 RPM的离心速度为15分钟和10μl样品转移到工作试剂管、混合和孵化15分钟在37摄氏度或30分钟在室温下(9]。测量样品的吸光度()或标准(美国)准备在505海里(对空白7,10]。零分光光度计对水是空白。

确定下的结果:

×浓缩。标准/美国

葡萄糖(mg / dl) =

将结果转换成更易与mg / dl / l乘以10。

将mg / l和除以180 (mol. wt.葡萄糖)

选择对四氧嘧啶诱导的动物

动物表现出非常高的> 150 mg / dl或低< 75 mg / dl血清葡萄糖水平(SG)丢弃,而动物展示最佳SG 80 - 120 mg / dl被选为研究和注射四氧嘧啶(70毫克/公斤)注射。

管理四氧嘧啶一水的解决方案

10毫克/毫升四氧嘧啶小鼠的解决方案是通过静脉途径管理与剂量100毫克/公斤,取决于动物的身体wt.诱导糖尿病。

选择动物的研究

经过48小时的血液注射四氧嘧啶被复古轨道穿刺和SG被上帝/ POD方法估计了。动物显示SG超过200 mg / dl选择进行研究。总18每组动物在三组即六个动物研究已经选择他们分组如下

组我车辆(蒸馏水;10毫升/公斤,订单)。

第二组四氧嘧啶(70毫克/公斤,注射)。

第三组吡格列酮(30毫克/公斤)

组我,包括6个老鼠不是用四氧嘧啶或吡格列酮治疗。

治疗组II,包括6个老鼠只有四氧嘧啶。

第三组,包括6个老鼠四氧嘧啶和吡格列酮治疗。

口服药物管理局

Use 皮下 needle, 弯曲 30  约 1 厘米 距离 tip, 计 钝化 的 提示 , 以 避免 任何 伤害 嘴 和 oesophagus. 的 内 表面这是套管。把套管校准注射器。取所需数量的药物/悬挂在注射器的解决方案。消除气泡,调整溶液的体积/暂停。持有的老鼠不通过一方面使动物张开嘴。轻轻插入喂养插管通过intra-dental空间和进入食管。调整所需的套管的位置,轻轻推动注射器的活塞管理药品的准确体积的解决方案。如果偶然药物进入肺部空气中的动物的尾巴和暂停。给背上轻拍并试图驱逐肺癌的药物。

准备和剂量

测试化合物的口服药物。剂量有老鼠的逐步过程使用固定剂量30毫克/公斤体重。11,12)动物给药前禁食了18个小时免费的水。食物的小鼠后3到4人力资源管理测试材料(11,13]。

收集血液样本

血样从所有的动物在2、4、6和24小时通过复古轨道穿刺法和SG被上帝/ POD方法估计。

SG百分比变化,平均计算和SD和列表。

控制血糖下降% =声波测井声波测井的药物/声波测井的控制

统计分析

抗糖尿病的活动是由四氧嘧啶诱导糖尿病评估方法使用紫外可见分光光度计测定在不同的时间间隔。分析获得的数据单向方差分析Dunnet-t测试紧随其后。The 结果 表示 为 mean,  均值 的 标准 误差 为 每个 group, (SEM) p<0.05 被 认为 是 统计 significant.

结果与讨论

政府吡格列酮的血清葡萄糖水平降低四氧嘧啶(70毫克/公斤)诱导糖尿病小鼠相比汽车(蒸馏水,10毫升/公斤,订单)。治疗组(表1和图1)。

结论

吡格列酮测试anti-hyperglycemic活动由四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的方法。活动提出了以百分比的形式降低血糖水平。活动是与汽车相比治疗组和分析了数据的统计显著性方差分析其次是单向Dunnet“t”测试。总之,吡格列酮是一种有效的替代的一些相关的抗糖尿病的药物。

承认

我们感谢副总理提供和允许的实验。四氧嘧啶和吡格列酮是礼品样本zydus制药有限公司、锡金。

引用

1. 柳条LS,米勒BT,马伦y转移自身免疫性糖尿病Nonobese糖尿病(NOD)小鼠的脾细胞。糖尿病。1986;35 (8):855 - 856。
2. 卫生部,预测肥胖到2010年,卫生部,2006年8月。
3. 福特,代谢综合征患病率由国际糖尿病联合会在美国成年人,糖尿病护理。2005;28日:2745 - 2749。
4. 克莱默JW,克拉森JK,巴斯金DG。在荷兰狗J兽医研究》继承糖尿病dogs.1988;49 (3):428。
5. Rakieten N, Rakieten ML, Nadkarni MV。链脲霉素的致糖尿病的作用研究(nsc - 37917)。癌症Chemother。众议员1963;29日:91 - 94。
6. 吡格列酮(Actos)产品信息,武田制药》2002。
7. 加布里埃尔·奎瓦斯Juaristi,尤西比奥TheAnomeric效果,CRC出版社,1995;9 - 10。
8. Craighead我。病毒在人类和实验动物糖尿病。地中海J。1981;70:127 - 134。
9. Biellschowsky M,古德厘米。天生的起源新西兰鼠标菌株。实用癌症杂志1970;(3):834 - 836。
10. 小卡希尔GF,琼斯EE,罗莉诉研究在韦尔斯利混合实验性糖尿病鼠。二世。外围tissues.Diabetologia血清胰岛素水平和响应。1967;3 (2):171 - 176。
11. Zuckar LM,安纽约。国家科学。1965;131:447 - 449。
12. 米歇利斯OE,帕特里克DH,海克CT。分册,1986;123:398 - 399。
13. 明智的PH值、堰BJ他JM,福勒斯特大肠Diabetologia。1988;37:1163 - 1165。