研究与评论:药物分析杂雷竞技苹果下载志
菜单e-ISSN: 2320 - 0812
e-ISSN: 2320 - 0812
Sowjanya P＊
印度安得拉邦比玛瓦拉姆市CSN药物研究所药物分析系
收到日期:20/10/2015;接受日期:02/11/2015;发表日期:10/11/2015
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现有的文献报告没有显示任何稳定性指标分析方法用于二甲双胍的估计剂型．因此，有必要开发和验证一种分析方法来进行估计二甲双胍．因此，本研究的目的是开发和验证一种合适的高精度和准确的分析方法，以同时估计二甲双胍的剂型，反相高效液相色谱(RPHPLC)．本工作的主要目的是开发和验证一种适合的高精度和准确的分析方法，用于反相高效液相色谱(RPHPLC)估计二甲双胍的剂量形式。
二甲双胍;rp方法
定量测量以四次为单位进行高效液相色谱法AGILENT系列和HPLC泵，具有20 μl进样回路(自动)，紫外-可见吸收检测器和光电二极管阵列检测器。使用EZ-Chrome软件对输出信号进行监测和积分，采用C-18色谱柱进行分离[1，2]。
用于研究的试剂
Ortho磷酸:AR级
乙腈:HPLC级
水:milliq级
甲醇:HPLC级
磷酸氢二铵:ARgrade
本实验的目的是在查阅文献的基础上，优化二甲双胍的测定方法。［3.，4]。
3次试验和4次试验均未通过拖尾因素，滞留时间过长，峰值不对称th对Trail进行优化。
优化的方法色谱条件
流速:1.0 mL / min
色谱柱:Thermosil C18
探测器波长:232 nm
柱温:25℃
注射量:20 μl
运行时间:6.0分钟
稀释剂:流动相
流动相: 40:60(水:乙腈)
保留时间为2.064
它显示了一个很好的对称峰。因此，这种方法最终确定了二甲双胍的开发。
评估二甲双胍的色谱条件优化(表1和图1)。
图1:二甲双胍估计标准图
表1:二甲双胍的估计条件。
缓冲液的制备
重量2.72克磷酸二氢钾在1000毫升高效液相色谱水中;用邻位磷酸调节pH值至2.8。
流动相
取HPLC水400 mL(40%)和乙腈HPLC (60%) 600 mL，在超声波水浴中脱气，混合5分钟，然后在真空过滤下通过0.45 μ过滤。
测试溶液制备
称量10mg二甲双胍，将其转移到10ml的容量瓶中，然后加入5ml稀释剂，用声波完全溶解，用相同的溶剂(原液)使其体积达到标记。取上述溶液0.4 ml移液管，放入容量瓶中，加入稀释剂制成溶液。将溶液充分混合，用0.45 μ过滤器过滤。
测试程序
取20 μL标准品，样品注入色谱系统，测量二甲双胍峰面积，按公式计算%含量。
系统适应性要求
拖尾系数:不应大于2.0%。理论板:不应小于2000。
系统适用性
为了系统的适宜性，分别注入2个重复的标准样品，研究样品的板数(N)、HETP、峰对称性、参考溶液面积的RSD %等参数
评估以下系统适宜性参数。
标准的理论板和USP拖尾系数
验收标准
1.二甲双胍峰理论板数(N)为NLT 2000。
2.二甲双胍峰的尾砂因子(T)为NMT 2.0% (表2和图2)．
图2:系统适用性图。
表2:系统适用性验收标准。
精度原液的制备
称取10mg二甲双胍，转移至10ml容量瓶中，加入7ml稀释剂完全溶解。用相同的溶剂使体积达到要求。
制备40 μg/ml溶液
取上述原液0.4 ml移液管，转入10ml容量瓶，用稀释液稀释至标记处。混合均匀后，用0.45 μm过滤器过滤。
过程
注入标准溶液，用高效液相色谱法测定面积。这个过程重复五次。五次注射面积的RSD百分比均在规定范围内(表3)．
表3:注样面积的%RSD。
验收标准
五种标准注射结果区域的RSD %不应超过2% (图3 a-3e)．
图3:进动验收标准图:(一):通道1和注入1的图。
图3 b:通道1注入2的图。
图3 c:通道1注入3的图。
图3 d:通道1注入4的图。
图3 e:图1通道注入5。
图3 f:图1通道注入6。
称量10毫克二甲双胍，并转移到10毫升的容量瓶中，加入7毫升稀释剂并完全溶解。用相同的溶剂使体积达到要求。
制备40 μg/ml溶液
取上述原液0.4 ml移液管，转入10ml容量瓶，用稀释液稀释至标记处。混合均匀后，用0.45 μm过滤器过滤。
制备样品溶液用于50%溶液的制备(相对于测定浓度)
称取05 mg METFORMIN原料药，转移到10ml的量瓶中，加入7ml稀释剂并完全溶解。用相同的溶剂使体积达到标记，并将其用作原液。(关于化验浓度)。
称取10mg的METFORMIN原料药，转入10ml的量瓶中，加入7ml稀释剂并完全溶解。用相同的溶剂使体积达到标记，并将其用作原液。
取上述原液0.4 ml移液管，转入10ml容量瓶，用稀释液稀释至标记处。混合均匀后，用0.45 μm过滤器过滤。
用于制备150%溶液(相对于目标检测浓度)
称取15mg的METFORMIN原料药，转移到10ml的量瓶中，加入7ml稀释剂并完全溶解。用相同的溶剂使体积达到标记，并将其用作原液。
移液管取上述0.4毫升股票的解决方案转移到10ml的容量瓶中，用稀释液稀释至标记处。混合均匀后，用0.45 μm过滤器过滤
过程
注入标准溶液，准确度-50%，准确度-100%和准确度-150%溶液。
计算所获得的METFORMIN的Amount和added Amount，并计算个体和平均回收率(表4)．
表4:个别计算和平均恢复值。
验收标准
每个级别的%回收率应介于98.0至102.0%之间(图4)．
图4:图表显示精度验收标准。
精确称量并将10mg的metformapi样品转移到10ml的容量瓶中，加入约7ml的稀释剂并声纳使其完全溶解，并用相同的溶剂使体积达到标记(表5)．(原液)
表5:线性相关系数计算。
I级(20 μg/ml)的制备:
将0.2 ml原液放入10ml容量瓶中，用稀释剂稀释至标记处
I级(30 μg/ml)的制备:
取0.3 ml原液放入10ml容量瓶中，用稀释液稀释至标记处。
II级(40 μg/ml)的制备:
从10ml容量瓶中取0.4 ml原液，用稀释液稀释至标记处。
III级(50 μg/ml)的制备:
从10ml容量瓶中取0.5 ml原液，用稀释液稀释至标记处。
IV级(60 μg/ml)的制备:
从10ml容量瓶中取0.6 ml原液，用稀释液稀释至标记处。
过程
将每个能级注入色谱系统，测量峰面积。绘制峰值面积与浓度的关系图(x轴为浓度，y轴为峰值面积)，计算相关系数(表6)．
表6:流量分析鲁棒性．
验收标准
相关系数应不小于0.999 (图5及6)．
图5:不同样本的线性相关系数。
图6:面积与浓度之间的线性图。
鲁棒性
作为健壮性的一部分，在流量，流动相组成，温度变化对该方法的影响进行了评价。
a)流量变化。
配制30 μg/ml标准液，随方法流速(表7)．更流畅(图7）
图7:在鲁棒性在更多的流量图表显示。
表7:在流动相中使用有机组合物。
流量减少(图8）
图8:在较低流量的稳健性图表显示。
流动相中有机成分变化较大。
配制30 μg/ml标准溶液，根据不同的流动相组成和实际流动相组成(表8和图9)．
图9:在鲁棒性改变有机相组成。
表8:二甲双胍类药物测定结果。
接受criteriai
一种检测方法的可接受标准在97%至103%之间(图10a, 10b和11a-11c)．
图10:二甲双胍药物标准图。
图11:二甲双胍药物的样本图。
