安全性和有效性的草药药膏制定Methanolic提取的Mikania cordata治疗急性肤浅的损伤。

文摘

本研究的主要目的是调查的安全性和有效性草药药膏制定methanolic提取的Mikania cordata治疗急性肤浅的损伤。药膏是由融合方法使用乳化膏作为基础。制定然后检测其理化性质就像失去干燥、pH值、铺展性,可挤压性与扩散研究,给一个满意的结果。准备的药膏也稳定在40摄氏度,250 c, 370 c。此外,制定评估了其抗菌活性金黄色葡萄球菌假单胞菌sp,芽孢杆菌sp,通过琼脂扩散法使用莫匹罗星6% (w / w)作为标准。制定活动显著(p < 0.01)对areus葡萄球菌和杆菌sp莫匹罗星软膏相比显示显著(p < 0.01)对假单胞菌sp和活动大肠杆菌。抗氧化活性提取物的还原能力测定表明,清除活性配方浓度增加而增加,由于存在的类黄酮和单宁。草药药膏的皮肤效果是由应用大量的药膏的皮肤表面积十健康人在第一阶段临床试验,显示出满意的结果没有过敏或过敏反应。评价治疗效力的提取进行了二十个人急性肤浅的伤害在二期临床试验和显示显著(p < 0.01)伤口治疗指数为5.43±0.37,减少百分比指数为28.26±4.14。标准治疗药物莫匹罗星也显示出显著性差异(p < 0.01),治疗指数4.47±0.26厘米和伤口减少百分比指数为21.68±3.76。配对样本的相关性显示无显著差异(p > 0.01)之间那些接受m . cordata和莫匹罗星对待。本研究的总体结果显示的草药药膏Mikania cordata安全药物主管莫匹罗星和可以作为治疗表面的损伤。

关键字

Mikaniacordata、伤口愈合、表面损伤,草药药膏,抗菌活性,抑制区

介绍

伤害是世界上死亡率和发病率的主要原因。世界上约有580万人死于受伤(1998年1]。它是一个主要公共卫生问题和社会成本方面的人类痛苦和经济损失。损伤可分为无意和有意伤害。意外伤害发生损伤,没有人打算等伤害了那些由于车祸、摔倒,溺水、火灾;而故意伤害,伤害是故意造成的,或由另一个自己攻击等,有意的枪击和暴力,和自杀2]。治疗是一种生存机制,是为了维护正常的解剖结构和结3]。许多免疫抑制剂、细胞毒素和非甾体抗炎药抑制伤口愈合。的管理伤口愈合是一个复杂的和昂贵的步骤(4]。修复受损组织(伤口)是一个重要的过程,在生存中扮演至关重要的生活。的基础是迫在眉睫的所有手术操作(5]。

天然产物发挥重要作用在药物在制药行业发展规划6]。在亚洲国家,尤其是农村人口,草药药物进入的首选治疗。如今,发达国家倾向于变成传统药物,特别是草本药物显示一个非常显著的改善。草药药物近年来获得的重要性,因为他们的有效性和成本效益6]。

交付的药物通过皮肤长期以来一直是有前途的概念,因为易于访问,表面积大,巨大的暴露于循环系统和淋巴网络和非侵入性治疗的性质(7]。与其他剂型,草药药物也制定的药膏。药膏是一种粘稠的半固体制剂局部使用在各种各样的身体表面。这包括皮肤和眼睛的粘膜,阴道,肛门,鼻子。可能是也可能不是药的药膏。药软膏含有药剂溶解、悬浮或乳化的基地。软膏局部使用几个目的,例如作为保护剂,防腐剂,润肤剂,止痒的,角质层分离的和收敛剂(8]。药膏基地主要是无水,通常包含一个或多个药物暂停或溶液或分散。药膏基地可能烃(oligeanous),吸收基地,水可移动和水溶性类型(9]。

M。cordata在当地被称为玛克或心脏heartleaf hempvine属于家庭菊科葡萄树生长在土壤表面或树。M。cordata最初是一个覆盖作物,但随着时间的推移,它成为杂草的橡胶种植园。这是一个光滑的葡萄树;它的叶子是long-petioled, deltoid-ovoid或卵形心形的,4 - 10厘米长,尖端,圆形,心形,或截断基地,齿的利润率。正面是4-flowered,圆柱状的,6 - 9毫米长,承担在复合花序。瘦果光滑,腺体、linear-oblong和2.5到3毫米长。冠毛组成的一个系列。它分布在中低海拔地区灌丛,提升到1600米,在大多数岛屿和省、从northan吕宋岛巴拉望和棉兰老岛。这可能是一个本地的热带美洲现在泛嗜性分布。

研究表明不同的细胞内活性中间体的内容外源性物质包括化学致癌物质会减少特定增强drug-detoxifying老鼠的肝脏中酶处理的植物提取物10]。精油的叶子M。cordata了四个主要成分:a-pinene (20%)、germacrene D (19.8%)、beta-pinene(8.7%)和alpha-thujene (7.1%) (11]。研究的methanolic分数M。cordata在渗出性根提取物也表现出显著的抗炎作用,增生性炎症和慢性阶段,还显示一个退热的活动12]。此外,研究生物碱的分数的M。cordata在diclofenac-induced胃溃疡显示生物活性的原则M。cordata有anti-ulcerogenic效果。结果验证植物的使用在孟加拉国治疗胃溃疡(13]。研究压力引起的中枢神经递质改变显示预处理M。cordata根提取物预防减少肾上腺素和增加5,而多巴胺进一步增加。生化反应可能存在剂量依赖的相关性的可能机制,这种植物的抗应激活动(14]。不同对中枢神经系统的影响研究还显示根提取物引起深刻的行为变化,尤其是消失攻击行为。它还显示强烈的麻醉和镇痛效果15]。

延续的策略发现一种新药,以及跟进一项研究(16),我们进行了试点研究(I和II期临床试验)的安全性和有效性的草药药膏methanolic离开提取的Mikaniacordata作为治疗急性肤浅的伤口在达沃市的建筑工人中,菲律宾。

材料和方法

植物材料的制备

叶和根的部分Mikaniacordata收集从当地农场在达沃市和确定的生药学,圣灵感孕说大学达沃城。干和粉植物材料(100克)提取80%甲醇(500毫升)索氏仪器24 h。溶剂被移除在真空内使用一个旋转蒸发器在低温下给集中提取。提取时,半固态绿色粘贴。残留是储存在40度。

植物化学的筛选

类黄酮的提取是存在评估,丹宁酸、生物碱、皂甙、口香糖和固醇/三萜按照标准程序揭示各种活跃的植物成份的存在(17]。

评价提取物的抗菌活性

的抗菌活性Mikaniacordata在50毫克/毫升的浓度,100毫克/毫升,150毫克/毫升和200毫克/毫升用杯碟法测定。铸成的穆勒辛顿琼脂稳定在450 c被播种与0.1毫升的24小时测试的肉汤培养生物(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌)包含大约10⁸cfu /毫升无菌培养皿中,允许创建集。井6毫米直径与无菌软木钻孔机,约四分之三的完整解决方案methanolic提取的叶子M。cordata。盘子是pre-incubated 1 h在室温下允许解决方案的扩散,然后孵化24 h。抑制测量的区域(意思是,n = 2)。莫匹罗星和丙二醇分别作为积极的和消极的控制。

的在体外细菌对提取是评估使用抑制如下区域的直径;耐:10毫米及以下,中级:11-15mm和敏感:16毫米及以上(18]。

对提取物的抗氧化活性的评价

的抗氧化活性Mikaniacordata是由还原能力测定。50毫克的提取物(2%、4%、6% w / w)溶解在50毫升的甲醇。不同浓度(0.5、1、2、3、4、5毫升)用移液器吸取到试管,10毫升甲醇。2.5毫升的磷酸盐缓冲剂和2.5毫升的铁氰化钾是添加到每个试管和孵化400 c为20分钟。孵化后,2.5毫升Trichloro醋酸添加到混合物和离心5分钟。最后,0.5毫升氯化铁和2.5毫升的水被添加到混合物中。吸光度测量使用双光束分光计700海里。结果是与抗坏血酸溶液的制备(50毫克的抗坏血酸溶解在50毫升的甲醇)。

软膏的制备

工作公式(乳化膏基地)使用包括提取(10% w / w),液体石蜡(20% w / w),乳化蜡(30% w / w),和白色的软石蜡(50% w / w)。基本的成分被放置在一起,融化锅,在700 c允许融化在一起。轻轻融化后,成分搅拌保持温度700 c与连续搅拌大约5分钟,然后冷却。制定药膏是由包含10 g的半固体ethanolic提取的M。cordata在陶瓷磨碎的基础研钵和研杵获得100克的草药药膏含有10% w / wM。cordata提取(19]。准备的草药药膏是药膏的坛子,标记,并储存在室温下。

物理评估制定药膏

物理评估进行了30天的药膏和奶油在一段时间内使用以下参数:外观、气味、质地和颜色。配方的pH值是由使用数字酸度计。0.5克重的配方是分散在measured7 50毫升蒸馏水和pH值。药膏是由视觉检测同质性检验:外观没有试块(20.]。干燥失重测定把药膏在petridish水浴和干1050 c。

铺展性

这个词表示来表示区域的程度的药膏容易利差影响的皮肤或应用程序部分。覆盖性表示为时间在几秒钟内被两张幻灯片之间滑落的药膏和放置在幻灯片的指导下特定的负载。

小的时间分离的两个幻灯片,铺展性就越好。铺展性计算使用公式:

S =(马丁/ T)

地点:S =铺展性

M =质量/重量与上一张幻灯片
L =玻片的长度
T =时间单独的幻灯片。

可挤压性

本研究采用一个简单的方法。配方是填充后的可折叠的管药膏设置在容器中。不同的可挤压性药膏配方确定的重量以克需要挤出药膏的0.5厘米丝带10秒。

扩散研究

扩散研究是由准备琼脂培养基的浓度。这是petridish涌入。中心孔是无聊和药膏放在它。所花费的时间扩散的药膏是观察和注意。

稳定性研究

准备配方的稳定性研究进行了不同温度条件下(40 c, 250 c和370 c) 3个月。

研究网站

这项研究是在一个建筑工地进行达沃城。在菲律宾棉兰老岛,达沃城地铁达沃的中心,第二最多的第三个最重要的市区面积944平方英里(合2444公里²),海拔73′(22米,300 c天气,风力E 11公里/小时,74%湿度。月度温度是高度可变的,不同的15.60度和32.10度之间在不同的季节。

研究人群

30岁的健康成年男性志愿者20到35年(平均年龄24.8±0.6岁)这项研究招募了。排除标准包括吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、肥胖、musculo-skeletal障碍,镰状细胞疾病和甲状腺肿。书面知情同意从每个志愿者获得了毕业典礼前研究和人类研究伦理委员会的批准达沃医学院基础医院,达沃市。

实验的程序

这项研究涉及两个阶段的临床试验——第一阶段和第二阶段如下:

第一阶段:n = 10,包括健康个体不诊断为急性肤浅的伤口。身体检查的测试完成之前和之后的治疗时期。皮肤效果指出的迹象,皮肤颜色的变化,局部皮疹,刺激、肿胀,或荨麻疹。

第二阶段:包括个人注册医生诊断为急性肤浅的伤口。伤口区域检查和测量使用Bates-Jensen伤口评估Tool21之前治疗和预先测试数据记录。选择个人被进一步分为两组,A和B,如下:

A组:n = 10,那些接受10毫克(6% w / w)的莫匹罗星七天每天两次。伤口面积当时记录的考虑因素,如深度、边缘,破坏坏死组织类型、坏死组织,渗出液类型、渗出物量,伤口周围的肤色,外围组织水肿和硬化,肉芽组织和上皮形成使用Bates-Jensen伤口评估工具。

B组:n = 10,那些接受10毫克(6% w / w)Mikaniacordata制定药膏七天每天两次。伤口面积评估使用相同的参数是描述那些莫匹罗星对待。

伤口面积减少百分比计算使用

在那里,
Bm =基线测量
调频=最后的测量

统计分析

收集到的数据了,编码和分析使用社会科学统计软件包(SPSS)软件17.0版。均值和标准差的计算和对比治疗是使用皮尔逊相关性和学生的学习任务。结果表示在适当的平均值±标准错误的意思。前后数据的平均值()的测试组与阳性对照组相比有统计学意义的水平在p < 0.01的水平。

结果与讨论

植物化学的筛选

初步的植物化学的测试显示黄酮类化合物的存在,苷、皂甙、还原糖,碳水化合物,单宁,固醇/ triterpens, 2, 3-pentanedione,甘油,醋酸,2,3-butanediol,石竹烯氧化物,和少量的sequelene:化合物被认为是药物相关。单宁通过几种细胞机制促进伤口愈合;螯合的自由基和活性物种的氧气,促进伤口收缩,增加毛细血管的血管的形成和成纤维细胞22- - - - - -23]。黄酮类化合物是已知不仅减少脂质过氧化,预防或减缓细胞坏死的发病也通过改善血管。因此,任何药物,抑制脂质过氧化作用被认为增加胶原原纤维的可行性通过增加胶原纤维的强度,增加血液循环,防止细胞损伤和bypromoting DNA合成24]。常用药用、单宁和类黄酮也促进愈合过程主要是由于他们的收敛和抗菌改过的,这似乎是负责伤口收缩和增加epithelialisation率(25- - - - - -28]。

评价提取物的抗菌活性

在抗菌药物敏感性筛选,初步ethanolic提取的Mikaniacordata将积极与莫匹罗星软膏抗菌活性和显示优秀的活动对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌存在剂量依赖的相关性(p < 0.001),平均抗菌指数16.50±0.58 50毫克/毫升,在100毫克/毫升18.00±0.00,20.00±1.41在150毫克/毫升,22.00±0.00在200毫克/毫升对金黄色葡萄球菌的索引值24.00±0.82毫米抑制区相比,21.00±0.00毫米的抑制区观察到莫匹罗星治疗组1% (w / v)。提取抗菌指数还显示平均12.50±0.50在50毫克/毫升,在100毫克/毫升13.00±1.29,14.00±0.50在150毫克/毫升,17.00±0.50在200毫克/毫升对枯草芽孢杆菌索引值为19.50±0.96毫米抑制区相比,20.00±0.50毫米的抑制区观察到莫匹罗星治疗组1% (w / v)。金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌病原微生物的皮肤和粘膜感染人。重大利益的活动对葡萄球菌areus由于金黄色葡萄球菌是不易消除特别是在深层皮肤层,汗腺、皮脂腺、毛囊的常规清洗和擦拭甚至用一些杀菌肥皂(28]。它已经涉及作为沸腾的最常见的病原体,女墙,乳房脓肿和infantile-impetigo [30]。提取并没有表现出任何活动对铜绿假单胞菌,但显示非重大活动对大肠杆菌(p < 0.01)。标准的药物莫匹罗星软膏对E显示一个相对较高的活动。杆菌和铜绿假单胞菌平均区抑制指数27.00±0.00毫米和30.00±1.00毫米分别对大肠杆菌和铜绿假单胞菌,提取软膏相比显示区抑制指数平均值为9.00±1.50毫米和0.00毫米分别对大肠杆菌和绿脓杆菌。

评价提取物的抗氧化活性

的抗氧化活性的草药药膏的标准抗坏血酸显示出类似的活动。这种抗氧化活性被认为是由于类黄酮和单宁的存在12]。

物理评估制定药膏

准备制定显示光滑、同质外表pH值为6.9。pH值在正常范围内的人类皮肤(6.8 - 7.3±1.0)和避免的风险是可以接受的刺激皮肤。软膏没有可观察到的变化(p > 0.01)在pH值一致性和相分离储存一段30天平均pH值指数6.4±0.21(1天),6.3±0.09(15天)和6.1±0.38(30天)。的颜色是深绿色,气味是特点,干燥是40% w / w,覆盖性是12秒,可挤压性是180 g,扩散研究60分钟后是0.8厘米。这些物理参数是在可接受的范围。

皮肤对健康个体的影响

皮肤的评估M。cordata表现出满意的结果没有过敏和瘙痒等过敏反应,干燥、燃烧,发红、刺痛,疼痛或肿胀,每天两次的应用10毫克(6% w / w)提取的药膏在同一皮肤表面积的七天。没有观察到的皮肤效果在第一阶段试验,第二阶段试验开始。

伤口愈合的影响

伤口愈合是一个基本反应组织损伤,导致恢复组织的完整性。这主要是通过结缔组织基质的合成。胶原蛋白是细胞外基质的主要蛋白质是主要的组件,并最终有助于伤口的力量。预处理和后处理组之间的比较Mikaniacordata在二期临床试验显示显著(p < 0.01),治疗后指数为5.43±0.37,相比减少百分比指数为28.26±4.14预处理指数为3.99±0.39。标准治疗药物莫匹罗星也显示出显著性差异(p < 0.01),治疗指数4.47±0.26厘米(后处理)相比,3.56±0.32厘米(预处理)和伤口减少百分比指数为21.68±3.76。

配对样本的相关性显示的治疗活动略有增加M。cordata莫匹罗星相比,但这增加并不显著(p > 0.01)。因此,基于本研究的结果,它是安全的假设的草药药膏Mikaniacordata是安全的,药物主管莫匹罗星和可以作为治疗表面的损伤。伤口愈合的力量M。cordata可能是由于植物成份存在,这可能是由于他们的个人或其它的添加剂,系伤口愈合的过程。

但是,还在进行进一步的研究来确定乙醇提取的直接作用机制将受到进一步的分离和净化确定和隔离活性化合物(s)负责这些药理作用。还在进行进一步的研究来确定的安全性和功效的草药药膏治疗烧伤、痈、疖和看看这项研究的结果可以应用于治疗/深的伤口敷料。目前的发现提供了科学证据的ethnomedicinal这种植物的属性。

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