药理学系Shadan药学院、海得拉巴,印度
收到日期:13/12/2017;接受日期:25/01/2018;发表日期:02/02/2018
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目的:本研究的目的是探讨“筛选抗惊厥的活动methanolic提取的天线部分美人蕉籼稻“白化小鼠。材料和方法:收集和验证天线部分美人蕉籼稻l .制备methanolic提取天线部分的美人蕉籼稻l .评价毒性研究的美人蕉籼稻l .筛选抗惊厥的活动:•最大电休克方法•异烟肼诱导癫痫•马钱子碱诱导癫痫结果:methanolic提取天线部分的美人蕉籼稻l .主音后腿扩展的持续时间降低最大electroshock-induced癫痫可能通过作用于电压门控钠离子通道。惊厥的延迟和减少癫痫发作阈值通过作用于gaba ergic系统,glutaminergic机制和Na +, Ca +渠道。Methanolic提取天线部分的美人蕉籼稻l .没有显示任何保护马钱子碱诱发抽搐甚至在最高剂量,400毫克/公斤可能作用于glycinergic传播。美人蕉籼稻Methanolic提取的天线的部分。L没有显示任何防止异烟肼诱发惊厥甚至在最高剂量,400毫克/公斤可能作用于glycinergic传播。讨论:在本研究评估methanolic提取的影响天线部分的美人蕉籼稻l .对癫痫发作引起的最大电休克(MES),异烟肼(INH)和马钱子碱在老鼠身上。结论:本研究发现的药理凭证借给建议民俗,人种医疗利用美人蕉籼稻l .自然补充治疗表明,植物的美人蕉籼稻显示MES诱导癫痫发作可通过干扰GABA, glutaminergic机制和Na +, Ca +渠道。然而,确切的机制,这些提取物的有效成分发挥他们的作用尚不清楚。还需要进一步的研究来研究个体的行为机制。
毒性研究中,美人蕉籼异烟肼,抗惊厥的活动
癫痫是第二个最常见的严重的卒中后神经紊乱,影响广泛的世界各地的人们。药用植物新化学物质的重要来源,潜在的治疗效果。几种植物用于治疗癫痫等传统医学体系和许多植物尚未科学调查。传统的药物占据一个重要的发展中国家的卫生保健系统。人们在发展中国家依赖传统医学,因为它更便宜和更容易获得比传统的药物。草药药物制剂在发展中国家仍受欢迎尽管伟大的进步中观察到药物在最近几十年(1- - - - - -21]。这些药物没有任何副作用,不显示任何药物的相互作用。
广泛使用的药物治疗癫痫阿育吠陀、unani系统医学植入monnieri [9),热带榕属植物platyphylla(22),Viscumcapense(23),Clerodendrum infortunatu(24),假虎刺属carand(25),Spondias mombin(26),Boerhaavia diffusa(27),仙人掌属植物的。的皂甙存在于这些药物主要是认为负责他们的抗癫痫活动。在目前的研究中,美人蕉籼l .含有皂甙和黄酮作为他们的主要化学成分,所以这些植物治疗癫痫的范围将被评估,因为皂苷和黄酮类化合物的主要化学成分。然而植物含有皂甙或展览类黄酮抗惊厥的活动(28]。除了这个美人蕉籼l .天线部分将准备和评估他们的抗癫痫活动。
试图发现这些植物的抗癫痫可能将导致开发新的草药准备和开放治疗癫痫的新局面。
回顾文献如何不透露任何科学信息美人蕉籼l .植物抗惊厥的活动。
因此,本研究试图评估天线部分的功效的抗惊厥的活动美人蕉籼l在老鼠身上。
收集的药物
天线的部分美人蕉籼l .收集当地和验证Prallubha博士,植物学,Osmania大学。
化学物质(表1)
美国没有。 | 的化学名称 | 源 |
---|---|---|
1 | 甲醇 | 年代。D精细化学品,印度 |
2 | 苯妥英 | Cadilla医疗有限公司,印度 |
3 | 安定 | 印度兰伯西研究实验室 |
4 | 硝酸士的宁 | Shakun企业私人有限公司,印度 |
5 | 异烟肼 | Shakun企业私人有限公司,印度 |
表1:化学物质用于提取和药理筛选。
植物提取物
Methanolic天线部分的提取美人蕉籼l
准备的提取
天线的部分美人蕉籼l .收集和阴影干和使用机械研磨机和通过筛粉#没有40的粉所需的粗糙。粉末材料被保存在干燥器为进一步使用。
提取过程
的数量(500克)重粉受到连续热提取使用甲醇作为溶剂索氏仪器。提取集中在减压和存储在干燥器中。甲醇产量百分比(99%)部分提取的天线美人蕉籼被发现是9.6%。
动物使用
白化小鼠的性行为,重约25 - 35 g被用于实验。他们从动物房设施获得Shadan医学科学研究所的机构伦理委员会的批准。动物被安置在聚丙烯笼子里保持在标准条件下(12 h光/暗周期;25±3°C),免费获取标准鼠/老鼠饲料(Hindustan Lever有限公司、印度)和水随意。所有的动物都适应于实验室条件前一周开始实验。
急性毒性研究[29]
将进行急性毒性研究以确定半数致死量(LD50)甲醇提取。提取的急性毒性研究。急性毒性的研究将在白化小鼠进行“上下法”(425年经合组织指导方针)。
不同剂量水平(2000毫克/公斤体重)的提取将口服药物通宵禁食老鼠每组三种动物组成的不同群体。提取的管理后,动物会观察到连续2 - 3 h。
一般行为、神经、自主配置文件和找出比例的死亡率观测表根据欧文的表。采用以下检查表:
刺激
多动症,立毛,抽搐,刚性、易怒、跳跃、阵发性抽搐、强直性抽搐。
抑郁症
上睑下垂、镇静、失去扶正反射(睡眠),失去牵引力,pinnal反射损失,紧张症,共济失调,肌肉僵硬,镇痛。
自主反射
Straub的尾巴,缓慢的呼吸、发绀、充血、分泌物异常、平衡。
最大电休克诱导癫痫发作[31]
仪器使用
电convulsometer。
使用的标准药物
苯妥英。
过程
在电致癫痫实验中,最大电休克(MES)方法将使用。总之,强直性惊厥后四肢的老鼠是诱导通过交流50 Hz, 150毫安的电流通过角膜电极0.2秒。动物们被分成5组每组包含六个动物。
与生理盐水组1作为控制和管理(p o)。
2组治疗methanolic天线部分的提取美人蕉籼(100毫克/公斤,p, o)。
3组治疗methanolic天线部分的提取美人蕉籼(200毫克/公斤,p, o)。
组4处理methanolic天线部分的提取美人蕉籼(400毫克/公斤,p, o)。
组5是治疗苯妥英(50毫克/公斤,i.p)。
7天前痉挛的感应。保护的动物数量从后肢主音扩展发作和所花费的时间在这个位置确定为每个剂量组。
马钱子碱诱导癫痫[32]
标准药物使用
安定(1毫克/公斤体重)腹腔内
过程
动物被随机分为五组包含六个动物。
与生理盐水组1作为控制和管理(p o)。
2组治疗methanolic天线部分的提取美人蕉籼(100毫克/公斤,p, o)。
3组治疗methanolic天线部分的提取美人蕉籼(200毫克/公斤,p, o)。
组4处理methanolic天线部分的提取美人蕉籼(400毫克/公斤,p, o)。
组5是对待安定(1毫克/公斤,i.p)。
癫痫是诱导小鼠与标准抽搐代理、马钱子碱(2毫克/公斤,i.p) 30分钟后药物治疗和动物观察1 h强直性惊厥发作。后肢扩展为强直性惊厥。强直性惊厥的发作和抽搐的动物数量或在观察期内没有抽搐。植物提取物的能力,以防止或延缓发病的后肢扩展展出的动物被视为抗惊厥的活动。
Isoniazid-Induced癫痫[33]
标准药物使用
安定(1毫克/公斤体重)腹腔内。
过程
动物被随机分为五组包含六个动物。
与生理盐水组1作为控制和管理(p o)
2组治疗methanolic天线部分的提取美人蕉籼(100毫克/公斤,p, o)。
3组治疗methanolic天线部分的提取美人蕉籼(200毫克/公斤,p, o)。
组4处理methanolic天线部分的提取美人蕉籼(400毫克/公斤,p, o)。
组5是对待安定(1毫克/公斤,i.p)。
7天前痉挛的感应。防止出现阵发性痉挛的动物数量和死亡,和所花费的时间在这个位置确定每个剂量组2 h。
统计分析[34]
结果电诱发癫痫,异烟肼诱导癫痫发作和马钱子碱诱导癫痫发作被表示为平均值±标准误差的意思。成对的学生的学习任务是用于分析的意义。< 0.05的pvalue视为具有统计学意义。生物胺的结果表示为平均值±标准误差的意思。组之间的差异的重要性评估使用单向方差分析(方差分析)。测试Dunnet紧随其后的测试假定值小于0.05被认为是具有统计学意义。这是通过使用图垫5.0软件版本。
比例提取物的产量
天线部分的methanolic提取美人蕉籼l . soxhlation准备的方法。提取物的产量比例为9.6%。
提取的初步定性植物化学的筛查
methanolic提取的初步定性的植物化学成分分析空中的部分美人蕉籼l。结果列表表2。天线部分的methanolic提取美人蕉籼l .显示生物碱的存在,碳水化合物,黄酮类化合物,蛋白质、氨基酸、类固醇、脂肪和油和皂苷、酚类、淀粉、蒽醌苷。
生物碱 | ||
1 | Dragendroff的测试 | + |
2 | 迈耶的测试 | + |
3 | 海格的测试 | - - - - - - |
4 | 瓦格纳的测试 | + |
碳水化合物 | ||
1 | Molish的测试 | - - - - - - |
2 | 费林的测试 | - - - - - - |
3 | 本尼迪克特的测试 | + |
类黄酮 | ||
1 | 信田测试 | + |
2 | 碱性试剂测试 | + |
蛋白质 | ||
1 | 缩二脲试验 | - - - - - - |
2 | Xanthoproteic测试 | - - - - - - |
3 | 三氯乙酸测试 | - - - - - - |
氨基酸 | ||
1 | 百万的测试 | - - - - - - |
2 | 茚三酮试验 | - - - - - - |
丹宁酸 | ||
1 | 氯化铁测试 | + |
2 | 溴水测试 | + |
类固醇 | ||
1 | Liebermann-Burchard测试 | + |
2 | Salkowski测试 | + |
3 | 硫粉测试 | + |
三萜 | ||
1 | Liebermann-Burchard测试 | - - - - - - |
2 | Salkowski测试 | - - - - - - |
脂肪和油 | ||
1 | 现场测试 | - - - - - - |
2 | 皂化测试 | + |
皂苷 | ||
1 | 出地层测试 | + |
2 | 溶血性试验 | + |
配糖体 | ||
1 | Borntrager的测试 | - - - - - - |
2 | Baljet的测试 | - - - - - - |
3 | Keller-Killani测试 | - - - - - - |
4 | 苦味酸测试 | - - - - - - |
表2。初步定性部分提取的植物化学的检测天线美人蕉籼。
急性毒性研究
小鼠急性毒性进行了阶梯法。老鼠被分为五组有六个动物每剂。一个安全的口服剂量的空中的部分美人蕉籼l是由程序所描述的经济合作与发展组织(OECD)每423指南。天线的部分美人蕉籼l在不同剂量从100 - 2000毫克/公斤,准备通过溶解在蒸馏水提取和浓度调整以这样一种方式,它不超过100 ml / g实验动物的体重。提取当时分别管理和动物被观察到的行为变化,死亡率和毒性48 h和特殊监督在前4 h和定期之后。
管理测试化合物后,分别观察动物和连续30分钟,2 h和24小时检测的变化自主和行为反应和震动,痉挛,唾液分泌和腹泻、嗜睡、睡眠和昏迷,然后监视任何死亡率为以下7天。根据急性毒性试验的结果,实验的剂量选择,即。100毫克/公斤,200毫克/公斤,400毫克/公斤(34- - - - - -40]。
天线部分的提取效果美人蕉籼l在小鼠最大电休克诱导癫痫发作
在最大电触觉惊厥模型中,天线部分的methanolic提取美人蕉籼三个剂量100毫克/公斤,200毫克/公斤和400毫克/公斤MES生产后肢主音扩展和后肢主音屈曲痉挛在所有的动物使用。控制老鼠主音肢体延长期间12.16±2.95 s,主音肢体屈曲8.83±1.95 s。测试组剂量100毫克/公斤保护3的老鼠和改变引发的癫痫的发病率MES在很大程度上如此。测试组剂量200毫克/公斤保护4的老鼠,大大降低了后肢主音的时间扩展和后肢主音弯曲产生的MES (图1)。剂量400毫克/公斤4的保护动物和显著降低癫痫发作的持续时间。标准的抗癫痫药物,苯妥英(50毫克/公斤)也保护所有的动物和显著降低后肢主音的时间扩展和后肢主音弯曲(表3)。
美国没有。 | 治疗 | 剂量p o | 持续时间(s) | 局量子的保护 | %的保护 | |
---|---|---|---|---|---|---|
主音弯曲 | 主音伸肌 | |||||
1 | 控制 | 生理盐水 | 8.83±1.95 | 12.16 - 2.95 | 2/6 | 33.67 |
2 | 测试组1 | 100毫克/公斤 | 3.16±0.40 * | 20.83 - 0.47 | 3/6 | 50.33 |
3 | 测试组2 | 200毫克/公斤 | 3.33±0.49 * * | 16.83 - 1.37 | 4/6 | 66.67 |
4 | 测试组3 | 400毫克/公斤 | 2.4±0.22 * | 12.33 - 0.42 | 4/6 | 66.67 |
5 | 苯妥英 | 50毫克/公斤 | 2.5±0.51 * | 2 0.44 | 6/6 | One hundred. |
表3:天线部分的提取效果美人蕉籼l在最大电休克诱导小鼠癫痫;* P < 0.05。表达的值意味着±SEM (n = 6);(相比之下,控制使用学生的学习任务),* * * P < 0.0001(相比之下,控制使用学生的学习任务)。
异烟肼产生主音癫痫发作在所有的动物使用。剂量100毫克/公斤和200毫克/公斤methanolic天线部分的提取美人蕉籼2 l .保护动物对异烟肼诱发癫痫发作,没有任何重要程度上影响癫痫的发病。Methanolic天线部分的提取美人蕉籼l . 400剂量毫克/公斤保护83.33%的老鼠和显著延迟发作的延迟(图2)。标准的抗癫痫药物,安定(5毫克/公斤)深刻地引起癫痫发作产生的异烟肼。上面的结果列表表4。
美国没有。 | 治疗 | 剂量,订单 | 癫痫发作(s) | 局量子的保护 | %的保护 |
---|---|---|---|---|---|
1 | 控制 | 生理盐水 | 141.61±8.29 | 0/6 | 16.67 |
2 | 测试组1 | 100毫克/公斤 | 130.17±6.69 ns | 0/6 | 33.33 |
3 | 测试组2 | 200毫克/公斤 | 152.83±3.47 ns | 1/6 | 83.33 |
4 | 测试组3 | 400毫克/公斤 | 290±3.084 * * | 3/6 | One hundred. |
5 | 安定 | 1毫克/公斤 | 360.3±27.38 * * * | 5/6 | One hundred. |
表4:天线部分的影响美人蕉籼l .提取小鼠异烟肼诱发癫痫;值意味着±SEM (n = 6);ns-p价值不明显不同(相比之下,控制使用学生的学习任务),* * P < 0.01(相比之下,控制使用学生的tt), * * * P < 0.0001(相比之下,控制使用学生的学习任务)。
天线部分的提取效果美人蕉籼l在小鼠马钱子碱诱发癫痫发作
马钱子碱(2毫克/公斤)引起强直性痉挛在所有的动物使用。天线部分的methanolic提取美人蕉籼l . 100毫克/公斤,200毫克/公斤和400毫克/公斤明显延迟的延迟,但并未改变癫痫的发病率由马钱子碱在任何重要程度上。标准的抗癫痫药物安定显著延迟发作的延迟(图3)。这些结果给出了表5。
美国没有。 | 治疗 | 剂量,订单 | 癫痫发作(分钟) | 局量子的保护 | %的保护 |
---|---|---|---|---|---|
1 | 控制 | 生理盐水 | 139.83±2.71 | 0/6 | 16.67 |
2 | 测试组1 | 100毫克/公斤 | 142.33±4.22 | 0/6 | 16.67 |
3 | 测试组2 | 200毫克/公斤 | 121.67±1.68 ns | 0/6 | 83.33 |
4 | TesstGroup-3 | 400毫克/公斤 | 132.22±2.22 ns | 0/6 | One hundred. |
5 | 安定 | 5毫克/公斤 | 310.33±4.50 * * * | 4/6 | One hundred. |
表5:天线部分的提取效果美人蕉籼l·马钱子碱诱导小鼠癫痫;* P < 0.05值均值±SEM (n = 6);(相比之下,控制使用学生的学习任务),* * * P < 0.001(相比之下,控制使用学生的学习任务)。
癫痫是第二个最常见的神经紊乱影响全世界估计有700万人在印度,5000万人(约1 - 2%的世界人口)。虽然有几种的抗癫痫药物治疗癫痫,治疗仍远未足够.Unfortunately大部分合成药物在一些患者不仅不能控制发作,但他们经常会产生副作用。由于这些问题的研究重点转向新的和更好的来源的天然产物药物。在这个过程中,药用植物作为一种新的anti-convulsant药物发展的源泉。各种植物正在研究基于传统知识的药理属性和证实是有用的治疗和管理各种疾病。药用植物被认为是一个重要的新化学物质来源与潜在疗效[40- - - - - -50]。几种植物用于治疗癫痫在传统医学显示活动的不同的系统测试在现代生物测定的检测anti-convulsant活动和许多这样的工厂尚未科学调查。
在目前的研究中我们对methanolic提取的天线部分的影响美人蕉籼l对癫痫发作引起的最大电休克(MES),异烟肼(INH)和马钱子碱在老鼠身上。
植物化学的初步筛选
methanolic提取的初步定性的植物化学成分分析空中的部分美人蕉籼l .显示生物碱的存在,碳水化合物,黄酮类化合物,蛋白质、氨基酸、类固醇、脂肪和油和皂甙,淀粉,酚类,antraquinones苷、丹宁酸。
急性毒性研究
急性毒性研究表明methanolic提取物的提取空中的部分美人蕉籼l .被发现是安全的最大剂量100毫克/公斤,200毫克/公斤,400毫克/公斤和2000毫克/公斤体重,分别在术后的路线。48 h后老鼠被发现耐受性良好。没有死亡,没有中毒的迹象。刺激抑郁和自主配置文件被发现是正常的。没有死亡的迹象被观察到剂量100毫克/公斤,200毫克/公斤,400毫克/公斤和2000毫克/公斤体重,分别在术后路线天线部分的提取美人蕉籼l。提取被发现在这些剂量是安全的。
电诱发癫痫
本研究的结果表明,天线部分的提取美人蕉籼l .主音的持续时间降低后腿在最大electroshock-induced扩展癫痫发作。所以methanolic天线部分的提取美人蕉籼似乎对电压依赖性钠离子通道法在防止重复发射的动作电位,从而产生抗惊厥的作用[50- - - - - -67年]。
马钱子碱诱导癫痫发作
马钱子碱诱发抽搐通过直接得罪的甘氨酸抑制脊髓和脑干反射,从而增加了脊髓反射。结果表明,methanolic天线部分的提取美人蕉籼l .增加痉挛的延迟超过400毫克/公斤和100毫克/公斤,200毫克/千克,但所有这三个没有显示保护马钱子碱诱发抽搐这表明部分的天线美人蕉籼l . glycinergic传输可能不采取行动。
异烟肼(inh)全身发作
异烟肼诱发惊厥被认为是中枢神经系统抑制GABA合成。所以安定治疗组显示,80%的保护动物。但部分的天线美人蕉籼l .不会显示明显的保护动物这是无效的。提取可能没有通过刺激L-glutamate或预防GABA GABA氨基转移酶降解。
本研究进行了评估的抗惊厥的潜力methanolic天线部分的提取美人蕉籼l在实验小鼠的最大电休克诱导癫痫,异烟肼诱导癫痫发作和马钱子碱诱发癫痫发作。
methanolic提取的初步定性的植物化学成分分析空中的部分美人蕉籼显示生物碱的存在,碳水化合物,黄酮类化合物,蛋白质、氨基酸、类固醇、脂肪和油和皂甙,单宁,antraquinone苷、酚类、淀粉。
进行了急性毒性按425年经合组织指导方针并没有发现死亡。没有死亡的迹象被观察到剂量100毫克/公斤,200毫克/公斤,400毫克/公斤和2000毫克/公斤体重的术后途径提取空中的部分美人蕉籼l .提取被发现在这些剂量是安全的。
Methanolic天线部分的提取美人蕉籼l .主音后腿扩展的持续时间降低最大electroshock-induced癫痫可能通过作用于电压门控钠离子通道。惊厥的延迟和减少癫痫发作阈值通过作用于gaba ergic系统,glutaminergic机制和Na +, Ca +渠道。
Methanolic天线部分的提取美人蕉籼l .没有显示任何保护马钱子碱诱发抽搐甚至在最高剂量,400毫克/公斤可能作用于glycinergic传播。
Methanolic天线部分的提取美人蕉籼l .没有显示任何防止异烟肼诱发惊厥甚至在最高剂量,400毫克/公斤可能作用于glycinergic传播。
本研究的结果建议民俗药理程度上证明了,ethnomedical使用的美人蕉籼l .自然补充治疗的显示,植物美人蕉籼显示了MES诱导癫痫发作可通过干扰GABA, glutaminergic机制和Na +, Ca +渠道。“然而,确切的机制,这些提取物的有效成分发挥他们的作用尚不清楚。还需要进一步的研究来研究个体的行为机制。