同时估计薄荷、樟脑和水杨酸甲酯抗风湿喷雾使用气相色谱法

文摘

一个简单、快速、准确、精确和可靠的气相色谱(GC)方法已经开发了薄荷醇的同时估计,樟脑和水杨酸甲酯的抗风湿喷雾。这三个组分的分离进行DB-23列(60 m×250µm×0.25µm)。氮气作为载气的流量2.5 mL / min。入口温度和检测器温度设置为250°C和280°C。最初的烤箱温度为125°C 5分钟,然后增加到150°C的坡道3°C /分钟,最后达到200°C的坡道10°C /分钟。肌萎缩性侧索硬化症(自动液体取样器)系统是用于注射试样。注射2µl成交。色谱图的运行时间为20.333分钟。拟议中的GC方法提供了一个很好的解决薄荷醇,樟脑和水杨酸甲酯。该方法根据我的指导方针进行验证。薄荷醇的线性,樟脑和水杨酸甲酯被发现在10 - 50µg /毫升,20µg /毫升和100 - 300年分别µg /毫升。 The recovery was calculated by using external standard method and the mean average recovery for Menthol, Camphor and Methyl Salicylate were found to be 100.55%, 99.93% and 99.95%. The tested validation parameters were found to be within acceptable limits. The method was successfully applied for quantification of these three ingredients in anti-arthritic spray formulation.

关键字

气相色谱法;活性成分;自动液体取样器;抗风湿喷雾;炎症

介绍

薄荷脑、樟脑和水杨酸甲酯的活性成分是许多局部制剂用于治疗风湿性疾病。这些是常用材料在某些局部制剂由于其镇痛和抗炎活性1)(图1)。

自古以来,各种草药及其衍生化合物用于治疗炎症。炎症是正常,保护性反应造成组织损伤身体创伤,有害化学物质或微生物学的代理,这是一个宿主防御的一部分。有时,炎症似乎产生的事件非常严重,成为慢性类风湿关节炎的发生和花粉热,可能危及生命。皮肤的红色(红色)、液态气体(热)、肿瘤(肿胀)和悲哀(痛苦)是主要的炎症的迹象2]。

s p Sethy发现从他的评论与毛细管柱GC可以适合同时识别和检测纯度活性物质以及评价的矩阵组成。因此这样的注射方法增加注入样品的稳定性,从而也减少在色谱峰的数量因此尝试建立条件识别和确定有效成分的基本成分,同时考虑对结果的影响凝胶含有薄荷脑、水杨酸甲酯通过使用毛细管气相色谱法(3]。

因为这些成分的波动,也就不足为奇了这些化合物通常确定GC。一些报告可以找到关于这些成分在医药产品的决心4]。

最近去一个社区药房透露35种不同成分。这些产品,16只包含薄荷醇量从1.27%到16%不等。一个喷雾产品上市薄荷醇作为唯一的有效成分,但没有内容。两个产品含有薄荷和樟脑,但无论是内容列出樟脑和只有一个产品上市薄荷醇为2.5%。14个产品含有薄荷醇,30%水杨酸甲酯。商店品牌之一,产品含有薄荷醇,水杨酸甲酯作为活性成分在未上市。三个产品包含所有的成分,最集中的产品含有30%水杨酸甲酯、薄荷和樟脑4% 10%。这些产品都是生产和销售各种形式包括:面霜、凝胶,唇膏,rub-on-sticks,补丁,止痛药慕斯等(5]。

测定方法的任意两个组合的定量测定这些药物的报告。这些方法是基于气液色谱法(相关),因为这些药物是挥发性物质。然而,只有少数方法发表使混合物包含所有三个药物的测定(6]。

因为许多制剂含有樟脑和薄荷醇,需要使用一个方法既快又准确同时测定的樟脑和薄荷醇7]。

在本文中,我们报告一种气相色谱方法同时估计这三个成分的抗风湿喷雾含有薄荷脑、樟脑和水杨酸甲酯3.0%,分别为4.0%和20%。文献综述表明,到目前为止,没有任何方法发表报告估计这三个成分的抗风湿喷雾研究产品尚未商业化。确认发达常规分析方法的适用性,按照我方法验证指南(8]。这种方法可以成功地应用常规质量控制分析。

材料和方法

GC的方法开发了安捷伦科技配备FID(火焰离子化检测器)在2017 - 18年ICPA保健产品有限公司Ankleshwar通过使用以下参数。

色谱参数

•列:DB-23 (60 m×250μm×0.25μm)

•烤箱温度:125°C(5分钟),增加到150°C(坡道3°C /分钟),达到200°C(坡道10°C /分钟)

•运行时间:20.333分钟

•进口温度:250°C

•检测器温度:280°C

•模式:分裂

•分流比:20:

•注入量:2μl

•载气:氮

•流量:2.5毫升/分钟

•H₂流:30毫升/分钟

•气流:300毫升/分钟

•N₂化妆流:25毫升/分钟

试剂和材料

以下试剂和材料:薄荷醇的印度薄荷和农业产品Pct。有限公司,樟脑的樟脑和盟军产品,水杨酸甲酯约翰的香气和甲醇的默克公司(所有材料可以在ICPA医疗产品有限公司Ankleshwar,古吉拉特邦,印度)。

制备的标准混合物

准确称重数量1转基因薄荷醇,1通用樟脑和4通用水杨酸甲酯都被转移到单独的100毫升容量的玻璃瓶;溶解每50毫升的甲醇和用15分钟。最终成交高达100毫升的甲醇每个瓶准备标准股票的解决方案都有10000μg /毫升薄荷醇,10000μg /毫升樟脑和40000μg /毫升水杨酸甲酯浓度。从这些股票的解决方案,6毫升的薄荷醇,8毫升的樟脑和10毫升的水杨酸甲酯退出各自的烧瓶,转移到一个共同的100毫升容量瓶和最终体积和甲醇组成。

准备的测试解决方案

抗风湿喷涂样品和2毫升被撤回,动摇了转移到100毫升容量瓶;溶解在50毫升的甲醇,用了20分钟。最后成交了100毫升的甲醇。

色谱过程

使用肌萎缩性侧索硬化症(自动液体取样器)配备10µl注射器,2的标准溶液和2µlµl测试解决方案被注入气相色谱系统在上面描述的操作条件和色谱图记录(图2和图3)。

分析

薄荷醇(600 ppm)的单个解决方案,樟脑(800 ppm)和水杨酸甲酯(4000 ppm)注入到GC系统对开发色谱方法然后样品溶液注入(表1)。的面积标准解决方案以及样品测定和分析是由使用以下方程:

方法验证

特异性:特异性是一个程序来检测定量分析物的兴趣存在的组件,这些组件可能存在样本矩阵。特异性测试与标准化合物和制定与赋形剂的潜在干扰。

线性和范围:通过线性回归分析的线性评价。线性水平薄荷、樟脑和水杨酸甲酯的范围10 - 50µg /毫升,20µg /毫升和100 - 300年分别µg /毫升(按浓度配方)测定的相关系数(图4 - 6)(表2 - 4)。

准确性:分析方法应该能够恢复实际分析物的配方。精度是由计算%恢复由外部标准方法三个安慰剂采集标本和已知数量的薄荷醇,樟脑和水杨酸甲酯被添加的浓度为80%,分别为100%和120%。这些解决方案在GC系统注入和%恢复计算。这些被重复3次,意味着恢复计算(表5 - 7)。

精度:各级精度被认为是。

可重复性:重复性精度表达了在相同的操作条件下在短的间隔时间。做0.1毫升的测试解决方案在100毫升容量瓶和马克与甲醇浓度的稀释30μg / mL薄荷醇,40μg /毫升樟脑和200μg /毫升水杨酸甲酯和分析10倍的过程和得到的结果(表8)。

中间精度:中间精密度决心通过分析测试解决方案(0.1毫升测试样本在100毫升甲醇)10倍同样由不同分析人员和分析师在不同天(每天1和8)和% RSD为计算(表9和10)。

盘中精度:盘中精度是由分析测试解决方案(0.1毫升测试样本在100毫升甲醇)在同一天和% RSD为10倍计算(表11和12)。

鲁棒性:建立了该方法的鲁棒性方法参数通过深思熟虑的轻微变化(表13 - 15)。

改变参数后,观察它们对测定的影响。

我。改变流动相流速的±0.2 mL / min

二世。在最初的烤箱温度变化±5°C

系统适用性:系统适用性测试是许多分析方法不可或缺的一部分。系统适用性试验参数来建立一个特定的过程取决于手术的类型被认可。分辨率之间的所有三个山峰,理论板和峰值不对称的计算是通过注入测试样品和% RSD为5倍计算(表16)。

结果与讨论

分析

表1。试验的发展构想。

特异性

没有检测到干扰薄荷醇的保留时间,樟脑和水杨酸甲酯样品溶液。

线性和范围

表2。线性和范围的薄荷醇。

表3。线性和范围的樟脑。

表4。线性和范围的水杨酸甲酯。

精度

表5所示。恢复研究薄荷醇。

表6所示。樟脑的恢复研究。

表7所示。水杨酸甲酯的恢复研究。

精度

可重复性

表8所示。可重复性

中间精密度

第一天的interday精度和精度分析人员1被认为是一样的可重复性。

表9所示。在第八天Interday精度。

表10。中间精密度的分析2。

盘中精度

表11所示。盘中精度分析1。

表12。盘中精度分析2。

鲁棒性

鲁棒性的薄荷醇

表13。薄荷醇的鲁棒性。

樟脑的鲁棒性

表14。樟脑的鲁棒性。

水杨酸甲酯的鲁棒性

表15。水杨酸甲酯的鲁棒性。

系统适用性参数

表16所示。系统适用性参数为薄荷醇。

表17所示。系统适用性参数樟脑。

表18。系统适用性参数对水杨酸甲酯。

结论

一个简单、准确、快速和经济的气相色谱方法开发和验证薄荷醇的同时估计,樟脑和水杨酸甲酯发达抗风湿喷雾配方。该方法保证满意的线性、准确度和精密度。喷雾配方的方法是健壮的和%复苏是好的。分析样本含有薄荷醇、樟脑和水杨酸甲酯没有其他辅料和添加剂的干扰。该方法可以很容易和方便地采用常规质量控制分析。

确认

•我们特此承认h . m .应先生,Atul Bedekar博士Vinod Patanwala先生,先生Aniruddh帕蒂尔先生Mangeshkumar Padame, Sandesh沙先生,Sheetal Rajurkar太太,先生Virendra沙Ankleshwar ICPA医疗产品有限公司古吉拉特邦的及时帮助和知识共享。

•我们请承认Shree Nanjibhai Vekaria提供设施开展这项研究工作。

引用

1. Bachute MT, et al。分析方法开发的同时估计水杨酸甲酯,薄荷醇,麝香草酚和樟脑软膏及其验证通过气相色谱法。Int。j .化学。Pharm.Ana。2016;3:1-11。
2. 沙RJ, et al。痛苦的验证分析方法开发和救援草药配方。印第安纳州,阿米尔。j .制药。杂志2016;6:2-7。
3. Sethy SP, et al。同时分析方法的开发和验证的水杨酸甲酯和薄荷醇双氯芬酸凝胶使用气相色谱法。Int。j .化学。安娜。Sci。2012; 3:1681 - 1684。(谷歌学术搜索]
4. 亚当斯E, et al。优化和验证基于液相色谱和顶空气相色谱的方法对辣椒素的定量测定,水杨酸,乙二醇monosalicylate,甲基水杨酸,水杨酸乙酯、樟脑和l-menthol局部配方。j .制药。生物医学。安娜。2012;60:51-58。

   (Crossref][谷歌学术搜索][Pubmed]

5. 瓦尔迪兹JS, et al。敏感和有选择性的气相色谱定量方法的樟脑,薄荷醇,水杨酸甲酯从人血浆。j .铬。b . 1999; 729:163 - 171。

   (Crossref][谷歌学术搜索][Pubmed]

6. 棕褐色,等。气液色谱测定混合物的樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯的药膏。j .铬。1982;238:241 - 246。

   (Crossref][谷歌学术搜索]

7. Bahjat KS, et al。樟脑和薄荷醇在医药产品的测定气相色谱法。j .制药。Sci。1963; 52:1006 - 1007。

   (Crossref][谷歌学术搜索][Pubmed]

8. 分析方法开发的同时估计水杨酸甲酯,薄荷醇,麝香草酚和樟脑软膏及其验证通过气相色谱法