盐酸瓦昔洛韦原料药剂型分光光度法的研制与验证

摘要

简单，准确，精确紫外分光光度法是在纯和制药配方盐酸Valacyclovir。它是一种抗病毒药物。盐酸Valacyclovir在0.1 M硫酸中255 nm处表现出最大吸光度，该方法被验证线性、精密度、敏感性和特异性。药物在4 ~ 12 μg/ml浓度范围内呈线性;该方法经统计学验证，相关系数为0.999，具有显著的高值性。盐酸瓦拉西洛韦的回收率在99.4 ~ 100.9%之间。因此，所提出的方法可以应用于常规分析药物剂量含有盐酸Valacyclovir的形式。

关键字

盐酸瓦洛韦，紫外分光光度法，方法开发，验证。

简介

2-[(2-氨基-1,6-二氢-6-氧氧- 9h -嘌呤-9-l)甲氧基]盐酸缬昔洛韦乙酯(图1)，是一种抗病毒药物。这是一个前体药物．它会迅速转化为阿昔洛韦抗病毒活性抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)以及水痘-带状疱疹病毒(VZV)在体外和体内。由于对HSV和VZV编码的胸苷激酶(TK)具有亲和力，阿昔洛韦的抑制活性具有高度选择性。这种病毒酶将阿昔洛韦转化为单磷酸阿昔洛韦，一种核苷酸类似物。一磷酸经细胞颗粒激酶进一步转化为二磷酸，经一些细胞酶进一步转化为三磷酸。在体外，三磷酸阿昔洛韦可以阻止疱疹病毒DNA的复制。这可以通过3种方式来实现:竞争性抑制2)结合和终止生长的病毒DNA链，3)病毒DNA聚合酶的失活。阿昔洛韦对HSV比VZV更强的抗病毒活性是由于其效率更高磷酸化病毒胸苷激酶。

目前已有几种分析方法报道定量评估通过HPLC、UV和比色法在药物配方中[1-9］．本工作的目的是建立一种准确、简便、精密度和经济的紫外分光光度法，用于批量和片剂剂型中对其进行估计和验证。本方法经国际协调会议(ICH)对盐酸瓦拉西洛韦的批量和定量测定进行了验证片剂剂型．

材料与方法

化学物质

Valacyclovir hydrochloride(标准品)来自Aurobindo Pharma Ltd.， Hyderabad, A.P, India。硫酸(AR级)、水(AR级)购自印度孟买Worli的E. Merck(印度)有限公司。整个研究过程中使用了蒸馏水。药物剂型(片剂)购自当地市场，由Cipla Pharma Ltd.生产，品牌名称为Valcivir 500mg，用于样品。

装置

采用Perkin Elmer紫外分光光度仪(UV-2500)进行分析。数据采集采用Lambda 25软件。使用分析天平(BSA224S-CW, Sartorius)进行研究。

波长的选择

盐酸Valacyclovir已知浓度分别称量，用0.1M硫酸溶解于容量瓶中。所得溶液在200 nm至400 nm范围内扫描。盐酸瓦拉西洛韦在255 nm处有特征吸收。

标准原液的制备

准确称量含有100 mg盐酸valacyclovir的量，转移到100 ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(1000 μg/ml)使体积与标记相符。从这1ml移液到10ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(100 μg/ml)使体积达到标记值。

工作标准解决方案

从标准原液中取1ml移液至10ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(100 μg/ml)使体积与标记相符。

样品制备

十片称量后磨成细粉。将相当于500 mg盐酸valacyclovir的粉末精确称量到100 ml清洁干燥的容量瓶中，用溶剂(1000 μg/ml)制成体积标记。从这1ml移液到10ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(100μg/ml)使体积达到标记值。

方法验证

通过对线性度、准确度、方法和系统精度的评价，验证了该方法的有效性。检测限度(LOD)、定量限(LOQ)和坚固度按照ICH指南Q2 (R1)进行。

线性

从浓度为1000 μg/ml的标准原液中，取0.4、0.6、0.8、1、1.2 ml分别转移到5个10ml的烧瓶中，用溶剂补充体积。盐酸瓦拉西洛韦的浓度为4 ~ 12 μg/ml。校准曲线见图3．线性结果显示在表1和图2．

精度

方法采用标准添加法在三个浓度水平(80%、100%、120%)下测定准确度。回收率(%)和%RSD的测定结果显示在表2．

方法与系统精度

通过重复性(系统精度)和中间性(方法精度)研究验证了方法的精度。用盐酸瓦拉西洛韦在同一天进行三个重复吸光度的重复性研究。这些研究在不同的日子重复进行，以确定中间精度。文中给出了系统的测试结果和方法的精度表3和表4．

检测限(LOD)和定量限(LOQ)

检测限(LOD)是在规定的实验条件下，样品中可检测到的分析物的最低量，但不一定能定量。LOD和LOQ由校准曲线得到的标准差和斜率值计算。

结果与讨论

该方法在波长255 nm处吸光度最大。在4 ~ 12 μg/ml浓度范围内呈线性;通过在255 nm处进行单组分分析，确定片剂样品溶液中药物的浓度。盐酸瓦拉西洛韦的药物含量为100.24%。相关系数(r²)值为0.999。3次重复的RSD%均小于2.0%。盐酸Valacyclovir的LOD和LOQ值分别为3.74μg/ml和11.3μg/ml。盐酸瓦拉西洛韦的回收率在99.4 ~ 100.9%之间。这表明在实验室混合物中没有辅料的干扰。实验验证结果表明，该方法准确、精密度高。

结论

建立了一种经济、简便、快速的测定盐酸瓦拉西洛韦片剂含量的紫外分光光度法。该方法在线性度、精密度、准确度、LOD和LOQ方面得到验证。因此，该方法可用于含盐酸瓦拉西洛韦制剂的常规分析。

确认

我们要感谢Aurobindo制药有限公司，海德拉巴，A.P，印度提供标准Valacyclovir盐酸的礼品样品。

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