盐酸伐昔洛韦原料药和制剂的分光光度法建立与验证

摘要

简单、准确、精确紫外分光光度法是在纯和制药配方盐酸伐昔洛韦这是一种抗病毒药物。盐酸伐昔洛韦在0.1 M硫酸溶液中在255 nm处具有最大吸光度线性，精度，灵敏度和特异性。在4 ~ 12 μg/ml浓度范围内呈线性关系。该方法经统计学验证，相关系数为0.999。盐酸伐昔洛韦的回收率为99.4% ~ 100.9%。因此，所提出的方法可以应用于常规分析药物剂量含有盐酸伐昔洛韦的形式。

关键字

盐酸伐昔洛韦，紫外分光光度法，方法开发，验证。

介绍

盐酸伐昔洛韦2-[(2-氨基-1,6-二氢-6-氧- 9h -嘌呤-9- 1)甲氧基]乙酯图1)是一种抗病毒药物。这是一个前体药物．它会迅速转化为无环鸟苷抗病毒活性对1型单纯疱疹病毒(HSV-1)和2型单纯疱疹病毒(HSV-2)以及水痘-带状疱疹病毒(VZV)均有体外和体内免疫活性。由于无环鸟苷对HSV和VZV编码的胸苷激酶(TK)具有亲和力，其抑制活性具有高度选择性。这种病毒酶将无环鸟苷转化为单磷酸无环鸟苷，这是一种核苷酸类似物。单磷酸盐通过细胞颗粒激酶进一步转化为二磷酸盐，并通过一些细胞酶转化为三磷酸盐。在体外，三磷酸无环鸟苷可以阻止疱疹病毒DNA的复制。这可以通过3种方式实现:1)竞争性抑制2)生长中的病毒DNA链的结合和终止，3)病毒DNA聚合酶的失活。与VZV相比，阿昔洛韦对HSV的抗病毒活性更高是由于其效率更高磷酸化通过病毒胸苷激酶。

已报道了几种分析方法定量评估用高效液相色谱法、紫外分光光度法和比色法测定药物制剂[1-9］．本研究的目的是建立准确、简便、精密度和经济的紫外分光光度法对原料药和片剂进行定量和验证。本方法按照国际统一会议(ICH)对盐酸伐昔洛韦原料药和制剂的测定方法进行了验证片剂剂型．

材料与方法

化学物质

盐酸伐昔洛韦(标准品)购自印度海得拉巴Aurobindo制药有限公司。硫酸(AR级)、水(AR级)购自E. Merck (India) Ltd, Worli, Mumbai, India。整个研究过程中都使用了蒸馏水。药物剂型(片剂)从本地市场获得，由西普拉制药有限公司生产，品牌为缬昔韦500mg，作为样品。

装置

采用Perkin Elmer型紫外分光光度法(UV-2500)进行分析。数据采集采用Lambda 25软件。研究使用分析天平(BSA224S-CW, Sartorius)。

波长选择

分别称取已知浓度盐酸伐昔洛韦，用0.1M硫酸溶解于容量瓶中。所得溶液在200 ~ 400 nm范围内扫描。盐酸伐昔洛韦在255 nm处具有特征吸收。

标准原液的制备

准确称取含有100mg盐酸伐昔洛韦的量，移入100ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(1000 μg/ml)使其达到标称。从这1 ml移液到10 ml干燥，清洁的容量瓶中，并用溶剂(100 μg/ml)标记体积。

工作标准方案

从标准原液中移出1ml至10ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(100 μg/ml)标记体积。

样品制备

称了十片，磨成细粉。取相当于500mg盐酸伐昔洛韦的粉末，准确称重至100ml干净、干燥的容量瓶中，用溶剂(1000 μg/ml)配制成标记体积。从这1ml移液到10ml干燥、清洁的容量瓶中，用溶剂(100μg/ml)标记体积。

方法验证

对该方法进行了线性度、准确度、方法和系统精密度评价。检测极限(LOD)、定量限(LOQ)和坚固性按照ICH指南Q2 (R1)进行。

线性

将浓度为1000 μg/ml、0.4、0.6、0.8、1、1.2 ml的标准原液分别移入5个10ml的烧瓶中，用溶剂补容。盐酸伐昔洛韦的浓度为4 ~ 12 μg/ml。标定曲线如图所示图3．线性的结果见表1和图2．

精度

在80%、100%、120%三个浓度水平下，采用标准加入法测定方法的准确度。回收率(%)和RSD %的结果见表2．

方法与系统精度

通过重复性(系统精密度)和中间性(方法精密度)研究验证了该方法的精密度。在同一天用三次重复吸光度法进行重复性研究。这些研究在不同的日子重复进行，以确定中间精度。系统结果和方法精度见表3和表4．

检测限(LOD)和定量限(LOQ)

检出限(LOD)是在规定的实验条件下，样品中可检测但不一定定量的分析物的最低量。利用标定曲线的标准差和斜率值计算LOD和LOQ。

结果与讨论

所建立的方法对盐酸伐昔洛韦的吸光度最大波长为255 nm。在4 ~ 12 μg/ml浓度范围内呈线性关系。在255 nm处求解单组分分析，测定片剂样品溶液中药物的浓度。盐酸伐昔洛韦的含量为100.24%。相关系数(r²)值为0.999。3个重复的RSD%在方法和系统精密度上均小于2.0%。盐酸伐昔洛韦的定量限和定量限分别为3.74μg/ml和11.3μg/ml。盐酸伐昔洛韦的回收率为99.4% ~ 100.9%。它表明没有来自实验室混合物中存在的赋形剂的干扰。结果表明，该方法准确、精密度高。

结论

建立了一种经济、简单、快速的紫外分光光度法测定片剂盐酸伐昔洛韦含量的方法。对方法的线性度、精密度、准确度、定量限和定量限进行了验证。因此，该方法可用于盐酸伐昔洛韦制剂的常规分析。

确认

感谢印度海得拉巴Aurobindo制药有限公司提供标准盐酸伐昔洛韦的礼品样品。

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