ISSN: 2322 - 0066
1化学与技术,Mustafa Cıkrıkcıoğlu职业学校Erciyes大学,开、土耳其
3理学院化学系,Gaziosmanpaşa大学,托卡特,土耳其
收到的日期:27/03/2017;接受日期:08/04/2017;发布日期:17/04/2017
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我们的研究的目的是揭示口腔上皮细胞的不同部分的可染性动物细胞模型,和洋葱膜作为植物细胞模型从洋葱皮中提取准备通过光学显微镜图像。后20克的皮肤清洁和新鲜的洋葱与地面发出橙黄色的外层皮肤,它是用精密称重。这是添加到100毫升的纯化水,煮30分钟,过滤。滤液存储在冰箱+ 4°C作为染料溶液使用。溶剂染料的单独的二进制组合解决方案单独和各种金属盐(明矾,摘要,CuSO4)准备。膜块洋葱和口腔上皮准备投入每个解决方案。染色过程完成,将准备的材料保持在50°C和80°C的孵化器1小时,然后在室温1小时。洋葱膜碎片和口腔上皮准备然后从染料的解决方案,并与纯水冲洗出来。有些膜放置在幻灯片,然后盖玻片覆盖着。准备工作包括口腔上皮和洋葱膜细胞在显微镜下检查。 It was observed that different sides of both the buccal epithelial and onion membrane cells were positively dyed in different colors and tones in the visible parts at different temperatures and in various mordants with the onion skin extract. Thus, it was determined that the aqueous extract of onion skin has potential in staining biological preparations under the conditions that gave positive results in this study.
洋葱皮肤、口腔上皮、膜、金属盐
多年来它已经知道天然着色剂有三个来源,如植物,动物和矿物。第一个已知的植物染色的来源是茜草属(Rubiatinctorum l .)和茜素着色剂。在研究之后,各个部分(叶、茎、树皮、花,等等)的许多植物如鼠李的家人,黛西的家庭,威尼斯漆树,产胶树之木材被用作天然染色来源(1,2]。动物染色来源着色剂从美国获得胭脂(Dactylopiuscoccus Costa),胭脂虫(胭脂虫vermilioPlanchon)和虫胶(Kerrialacca Kerr)昆虫,其中包含红色着色剂和获得了许多昆虫的重要性。发色团,出现在所有insect-sourced着色剂,anthraquinonoid衍生品。矿物污点是金属和金属盐的混合物称为普鲁士蓝,铬黄,锰铜和锑橘子3,4]。
努力利用生物质在世界各地提供更健康,更经济,更容易和更便宜的材料一直是已知的。我们获得的信息与我们的文学研究中,明白了在这一领域的研究还不够尽管生物量的大小。营养的食用部分和外部废物来源(如洋葱:异鼠李亭和槲皮素、花椰菜:山柰酚和杨梅酮、苹果:槲皮素、普通话:hesperetin),从生物质获得包含许多自然着色材料(5,6]。作为一个农业国家,土耳其有很多农业废弃物和产品浪费资源。因为这些废料含有颜色问题,生物质能,这是一个非常经济资源,也是无害的观点的环境和人类健康7]。除了这些属性,尽管许多植物合成成千上万的不同种类的色素,很少人研究了作为着色剂的潜力。虽然有些已经利用这些植物的营养物质,它可能会调查某些部位的着色材料,如皮和核,通过使用适当的隔离技术,开发新的染色方法,引入更经济、环保的组织学染料领域的科学和健康(8]。
洋葱属于百合科属明矾的家庭。洋葱用于染色的干皮。天竺葵色素(3、5、7,4-tetra hydroxyanthocyanidol),发现槲皮素着色剂洋葱的外层皮肤以及pyrocatechin benzocatechinic酸。如有4羟基组以及oxychromes颜色增强剂组,如氨基和羧基化学天竺葵色素的结构,污渍等材料羊毛很好和强烈9]。它是花青素的衍生品之一。天竺葵色素的分子结构如下。
当有发色团组在一个分子的存在和数量和甲基组,称为oxochrome组,增加颜色强度。因此,飞燕草色素的颜色强度,矮牵牛配基,malvinidin污渍图1比别人高。
一些花青素和天然酚类化合物是用于制造细胞核心染料。虽然,尤其是植物如红球甘蓝、大丽花、黑莓汁,和黑李子的水果,含有花青素,被确定用于组织学染色,这是首选在这项研究中,正如细胞学和组织学染色研究之前,用洋葱皮作为植物源着色剂。洋葱皮是首选的原因是,他们很容易找到,可再生和便宜11]。
通过这种方式,我们的目的是确定潜在的洋葱皮肤组织学染色的激活使用提取我们生产用水,这是最简单的分子通过植物材料和细胞膜,在室温下,50°C和80°C,洋葱和颊上皮使用提取细胞,直接或各种金属盐。
准备洋葱皮
的皮肤清新、干净、橘黄颜色洋葱鳞茎在开塞里和从塔拉地区市场提供收集在一个单独的布袋。应该注意的是,皮收集从清洁,干燥和深色部分。
植物提取物的制备
twenty-gram洋葱皮,从市场获得的塔拉斯(开、土耳其)和均质使用IKA根据18均质器,放入烧杯和100毫升蒸馏水的20% (w / v)补充道。混合物在热板煮30分钟,过滤。滤液在4°C存储在冰箱里,用于染色。
口腔上皮细胞的准备
两滴蒸馏水都放到幻灯片,和上皮细胞,这是来自健康的20年的年轻女子,被挖出来的两个独立的牙签内部没有造成损害。的牙签了水滴在幻灯片上允许的细胞进入水。幻灯片上的水被轻轻加热燃烧的火焰,细胞被固定和固定剂(甲醇:乙酸)(3:1)。
洋葱和口腔上皮细胞的染色
100毫升植物提取物被分发到烧杯中部分25毫升。其中一个烧杯是空;其他人都含有0.5克的三个不同的媒染剂材料(KAlSO4.12H2O, FeSO4,CuSO4),用玻璃棒和混合。在每一个,一块洋葱皮和一张幻灯片包含颊细胞下降。每个解决方案的pH值测量并指出。油漆方案被允许站在室温1小时,而其他染料的解决方案准备以同样的方式被保持在50°C和80°C 1小时。一个小时后,染料的幻灯片被解决方案和用蒸馏水洗净,晾干。洋葱鳞茎洗,拍摄到一个干净的幻灯片,并与薄板覆盖正常。洋葱和口腔上皮细胞受到实验集具有不同参数所示表1,并通过光学显微镜幻灯片被评估。
表1。细胞染色条件与洋葱皮萃取物进行不同温度和媒染剂。
植物ExtractName | 细胞类型 (膜+上皮) |
温度 | 持续时间 | pH值 | 媒染剂名称(0.5克) |
---|---|---|---|---|---|
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 25°C | 1小时 | 4 | - - - - - - |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 50°C | 1小时 | 4 | - - - - - - |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 80°C | 1小时 | 4 | - - - - - - |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 25°C | 1小时 | 2 | 明矾 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 50°C | 1小时 | 2 | 明矾 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 80°C | 1小时 | 2 | 明矾 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 25°C | 1小时 | 3 | FeSO4 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 50°C | 1小时 | 3 | FeSO4 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 80°C | 1小时 | 3 | FeSO4 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 25°C | 1小时 | 3 | CuSO4 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 50°C | 1小时 | 3 | CuSO4 |
洋葱皮 | 洋葱+口腔上皮细胞 | 80°C | 1小时 | 3 | CuSO4 |
染色结果与洋葱皮提取洋葱细胞
在图2,有橙染色细胞核和黄染色膜无明矾,深黄色染色细胞核和淡黄色染色膜与明矾,成分与FeSO染色细胞核和细胞膜4,红褐色染色细胞核和细胞质膜和CuSO黄色染色4。所有染色结果是积极的与洋葱皮提取洋葱膜细胞在室温下。
在图3橘色背景上,有brown-stained零件在细胞核和橙染色膜没有明矾,green-stained分子核和淡黄色的黄染色背景染色膜与明矾,区域深绿色染色棕色背景细胞核和浅绿色与FeSO膜4,而一些地区在一个橙色背景颜色的肉桂细胞核。有橙染色与CuSO洋葱细胞的膜4在洋葱皮提取50°C。
在图4在洋葱表皮细胞,观察洋葱皮萃取物在80°C,细胞膜上有黄色染色无明矾,明矾橙染色细胞核和细胞膜,黑褐黄色染色细胞核和淡黄色与FeSO膜4和暗橙染色与CuSO细胞核和细胞膜4。阳性染色结果与所有的金属盐在细胞核和细胞膜的洋葱细胞在这个温度。
染色洋葱洋葱皮肤的上皮细胞提取的结果
在图5一个,有明亮的黄色在细胞核和细胞质染色领域。在图5 b-5d、黄染色观察在细胞核和细胞质而暗棕色染色细胞核和浅棕色染色观察细胞的细胞质中。
在图6,有黄色的细胞质染色。在图6 b,深黄色染色观察细胞核更强烈而深棕色染色细胞核和浅棕色染色在细胞质中被观察到图6 c,橙染色观察细胞核和细胞质图6 d。
在图7 b,这显示了口腔上皮细胞的染色的结果与洋葱皮提取物,有黄色染色区域在细胞核和细胞质而淡黄色染色区域观察到细胞质中图7。在图7 c和7 d深绿色和黄褐色的染色是在细胞核和细胞质,分别。
我们可以看到表2,成功的橙黄色的颜色染色观察洋葱细胞的细胞核和细胞质,植物细胞,染色后与染色从洋葱皮中提取仅获得了在室温下,50和80度的温度只有黄色染色观察口腔上皮细胞的细胞核和细胞质在室温下。即使温度增加,没有染色观察口腔上皮细胞的细胞核。
表2。染色结果洋葱和口腔上皮细胞与洋葱皮提取物在不同的温度下。
在室温下 | 在50°C | 在80°C | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
细胞类型 | 核 | 细胞质 | 核 | 细胞质 | 核 | 细胞质 |
BuccalEpithelial | 黄色的 | 黄色的 | 无色 | 黄色的 | 无色 | 黄色的 |
洋葱膜 | 橙色 | 黄色的 | 橙色 | 橙色 | 橙色 | 黄色的 |
在口腔上皮细胞染色在室温下,如图所示表3,不同的媒染剂的使用导致了细胞核和膜颜色转淡黄色至深黄色和橙色的,即使是棕色的。阳性染色结果在细胞核和细胞膜上的洋葱细胞有无媒染剂染色试验。
表3。洋葱和口腔上皮细胞的染色结果使用不同的金属盐和洋葱皮提取物。
单独提取 | 提取与明矾 | 提取与CuSO4 | 提取与FeSO4 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
细胞类型 | 核 | 细胞膜 | 核 | 细胞膜 | 核 | 细胞膜 | 核 | 细胞膜 |
洋葱膜 | 橙色 | 黄色的 | 深黄色 | 黄色的 | 橙色 | 橙色 | 布朗 | 布朗 |
口腔上皮 | 淡黄色 | 淡黄色 | 深黄色 | 深黄色 | 橙色 | 橙色 | 布朗 | 布朗 |
我们明白洋葱细胞的染色和媒染剂或没有媒介媒体和染色50°C和100°C会完全成功。然而,染色的口腔上皮细胞只会成功的媒染剂,在一定的温度。因此,洋葱皮染色一些生物材料有潜力。这是一个生态而且非常便宜的染料来源。
由于植物的色素的结构有不同的有机结构,溶剂中溶解的类型也有所不同。例如,花葵素和槲皮素着色剂在洋葱表皮有强壮的水溶性。洋葱皮给强烈颜色分子在水里,阳性染色结果的洋葱和颊上皮我们用水溶液提取细胞。此外,酚、多酚,天竺葵色素和黄酮醇组槲皮素色素存在于洋葱皮,其染色的颜色和强度是不同的。因此,洋葱皮染料染色细胞核和细胞质洋葱和口腔上皮细胞主要是桔黄色的颜色。
洋葱细胞的最佳染色条件被发现从洋葱的皮提取的染料(1:5皮肤:溶剂、w / v)室温蒸馏水为60分钟,50到80°C,有或没有媒染剂。口腔上皮细胞,细胞质的最佳染色条件被发现从洋葱皮染料提取蒸馏水为60分钟没有媒染剂在50到80°C。同时,最佳的口腔上皮细胞的细胞核染色只有CuSO获得4和FeSO4媒染剂,在室温下,50到80°C。在这些条件下,洋葱皮可以作为一个替代组织学染色的天然染料。因此,进一步研究强烈建议所需的条件和方法与各种天然染料染色不同的细胞来源应该调查。
这项工作被Erciyes大学研究基金的支持。项目数量:tdk - 2013 - 4484。