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Aspergilusniger标准化使用sorghumMalt和its

M.P.D.Prasad一号V.Sridevi2*N.V.Surendrababu3O.V.S Reddy4.N.Harsha5
  1. M.Tech生物技术中心技术学院Javaharlal Nehru理工大学
  2. 安得拉大学化学工程系生物技术中心副教授Visakapatnam-03,Andhra Pradesh
  3. 药学院NRI学院集团教授Vijayawada,印度安得拉邦Krishna生物化学系副教授,印度安得拉邦Tirupathi大学
  4. 安得拉大学化学工程系生物技术中心研究学者
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抽象性

电文酸三箱式有机酸是食品和制药行业中发酵产生的最重要酸本期工作分别用A.Niger MTCC662菌株水下发酵确定柠檬酸生产最优生长条件隔离、筛选和变异A.niger菌株由紫外线辐照、二乙硫化物和Co60提供不同类型的介质并浸入发酵strain改进研究最大产出发酵后获取的柠檬酸最大增益取自变异A型Niger MTCC662比野生菌株约12.0g/100ml和8.2g/100mlA.Niger MTCC662变种比野生A.Niger MTCC662文化产生高产量

关键字

A.Niger MTCC 662水下发酵温度pH提高

导 言

电文酸三叉杆有机酸,可畅口水溶化,在食品行业和其他行业中最为重要Citric酸取自拉丁柑橘树,其果实像柠檬精化甘蔗和sucrose是最常用子串通过发酵过程商业生产柠檬酸但它们代价昂贵,可代之以各种廉价和丰富的子块,如农工废物或副产品,包括 starkch、eculose和lignocellose素材面法和淹没过程被广泛识别为柠檬酸生产表面过程多年以来虽然商业盈利,但在使用空间方面费力密集低效浸入过程已成为工业化国家选择方法[2],因为它劳动力密集度较低,产生更高的生产率并使用较少空间Citric酸用于食品、装饰品和饮料、药业和工业领域立石酸形成多种金属盐类,包括铜、铁、镁、锰和钙复合物盐类在工序中用作固化剂和防凝剂防血Citric酸用成塑胶胶片和油脂抗氧化剂orghum生产像印度这样的农基国家剩余子串生产及其可用性促使我们在本研究中使用这些子串受损粒子和未用面粉可转用于生产像柠檬酸这样的增值产品,该产品应用性极大。当前的工作集中于这些子串中富含 stark面粉不使用危险酸水解法和昂贵酶处理法,而是用自然错处理水解法,而自然错处理法在经济上可行,提高麦片发酵过程的养分质量野生菌株生成的柠檬酸浓度太低无法经济过程,因此进行了菌株改良开发父株变异体以增产产品[3]从野生菌株向变异主要依赖变异过程(物理变异和化学变异)。传统随机变异耗时且缺乏特性和精度,因为缺少适当的分子信息,即没有机会扩展基因池,它仍然是一个非常实用的方法[4],因为与目标变异相比,它非常简单快速法变种菌株开发偏好,这些菌株可以在短发酵时间合成高浓缩柠檬酸并能够在低pH生长最后,通过优化发酵参数,如温度、pH值、孵化时间、基底富集度和氮源,并发现数个其他生物积聚柠檬酸包括A菌株Niger AawamoriAFonsecaeluchensis APhoenicus Aacrimontiumsp.,Actrytissp.,Eupenciniumsp.,Mecorpriefis,PenciumiNiger仍然像有前途的物种

二.材料和方法

隔离性:采样取自Neleore区Naidupeta本地工业Empee糖厂
筛选真菌文化:Dye方法:Aniger用含有Czapek-Doxagar介质的Petri板进行定性筛选,Bromocresol绿色标码
准备介质:Sorghum(Sorghum双色)是全世界生产的谷类作物,对亚洲国家非常重要。原材料或许廉价提供碳水合物转换发酵糖率高居高stark转换为简单糖率在这些子串中大约80-88%
损耗和沉积基体:自然安全沉积过程替代高价静水解析和危险静水解法转换复合子块成易用简单子串
降糖估计值:DNS估计高梁麦片减糖法(Dinitro盐酸法)。降糖由纸色色谱和标准降糖进一步定性估计
柠檬酸估计法:发酵薄凝量估计法用405纳米分光计对乙酸酐和法[5]进行量化估计
strain改进研究: Mutagation主要通过紫外线辐照物理变异素、二乙基磺酸化学变异元和混合二丁基

三.成果和讨论

成功过程取决于适当强度、文化介质和发酵参数优化在当前工作中,甘酸浓度、时间剖面合成、孵化时间、温度、pH值、氮源等文化条件均优化使用父离散法和变异高梁基底

隔离线段:

四大A尼格菌株从软糖废品和单聚域隔离技术中分离远端单强分离柠檬酸生产法用染色法筛选后再用摇瓶法浸出发酵法[6]

糖富集效果

初始甘油富集度确定丝状真菌A.Niger生成的柠檬酸量实验以5%、10%、15%、20%减糖和最大增产均达15%以上,降糖减富15-20%并发现柠檬酸减产16%后减产16%甘酸积聚介质提高时观察到柠檬酸积分下降原因可能是菌类顺序增长 增加介质粘度结果显示于图1&2中
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优化理疗和搭建条件

马尔丁是高梁粒子有限发芽 严格控制条件分三大相位处理,即斜坡化、发泡化和焚化step鼓励发泡启动,gruate准备将 stark转换为甘蔗,窑化停止发热以确保极少Stark解水stark转换麦芽悬浮高梁条件(时间和温度)得到优化,最大减糖率在18小时实现,高梁温度31oC实现降糖富集度更多与 NaOH斜坡比不与蒸馏水或KOH发芽过程持续3天,优化减糖产值为了转换更多 starch,mashing过程使用不同温度范围(550C-650C)进行,所得丰收最大值590C下拉糖量增加二倍 mashing过程使用生物甘蔗类商业酶

优化媒体条件最大生产柠檬酸孵化温度

研究不同温度(250C-350C)的柠檬酸生产最大柠檬酸生成时介质温度为330C并显示在Fig中3级温度发酵介质是直接影响柠檬酸生产的关键因素之一介质温度低时,酶活性低,对柠檬酸增产没有重大影响。温度上升超过330C时 柠檬酸生物合成下降原因可能是高温可导致酶静态合成素和Oxalic酸等其他产品积聚温度40摄氏最优生产exic酸,而柠檬酸积聚则在此温度[7]完全受限
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pH效果

柠檬酸生产在不同pH水平上研究(4.8至6.0)。最大丰度(9.3g/100ml)最大产值12g/100ml4级维护优异pH对成功发酵柠檬酸非常重要pH下降导致柠檬酸减产[8]低初始pH值介质生长极差
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基底富集度 :

基质集中效果研究 10% 15% 20% 父母隔离变异菌株5,6,7并用MTCC文化进行了同样的实验,以比较父分离柠檬酸生产效率[9].尼格隔离变异菌高基质富集度(高于20%),介质成为粘度,而柠檬酸增产因文化汤中有限吸附而下降
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减少糖浓度

不同糖富集度(12-20g/100ml)[10]对Aniger分离完成后,在含15g/100ml(富集度)的介质中获取最大量柠檬酸(9.3g/100ml)。初始甘油富集度确定丝状真菌A生成的柠檬酸量尼格甘酸积聚介质提高时观察到柠檬酸积分下降原因可能是增生 增加介质粘度[11]介质微积分增加 柠檬酸产量下降高于15-20%的糖富集度导致更多残留糖[12],而低糖富集度则导致柠檬酸增产下降,原因是培养薄汤中积聚exaclic酸

时间剖面柠檬酸

发酵用高梁各种麦片从24h216最大柠檬酸丰度144h(7天)后获取,结果显示在Fig中10号最大柠檬酸生成最优时间随生物条件和发酵条件而异。内核酸浸入发酵后,生产开始于一天延时阶段,到静止阶段或晚进指数阶段开始时最大值孵化期的进一步增加没有提高柠檬酸生产原因可能是菌族老化 并耗竭文化汤中甘蔗[13]与显性工人相比,我们的发现更为重要,因为降低孵化期会降低柠檬酸生产成本
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四.结论

环境条件优化实验取温度、pH值、氮源值、基底富集度和孵化时间适当条件使用A.niger变种MTCC 662温度330CpH4.8氮源2.4mm

引用

  1. N.Z.Adham,“Aspergilus Niger用Beet-molasses介质改进柠檬酸发酵的尝试”,BioresTechnolvol84页97-100,2002
  2. H.S.格雷瓦尔和K.L.Kalla,“Fungal生产柠檬酸”,BecroPrecements.,vol.13,2,pp209-234,1995年
  3. H.Ikram-Ul阿里M.AQadeer和JIqbal,Citrice酸生产由选自甘蔗软糖厂Aspergilusniger变种组成,BioresourTechnol.vol.93(2),pp.125-30,2004年
  4. D.M.百元XM赵州和S.M.Xu,BiotechnolBioeng.vol.88,第681-689页,2004年
  5. J.R.Marrier和MBoulet,“直接测定牛奶中的柠檬酸并改进法,aceticaide法”,《dery科学杂志》,vol.41,pp.1683,1958
  6. T.熊猫S昆杜和S.K.Majumdar,“Aspergilusniger使用印度处理甘蔗和甘蓝生产研究”,《微生物学杂志》,vol.5页61-66,1984
  7. Y.D.挂起,B.S.Luh和E.E.Woodams,J FoodSci.vol.52页226-227,1987年
  8. S.普雷斯考特和ADunn's,“工业微生物学第四版”。CBS出版商和经销商.”,印度新德里,pp710-7151987
  9. S.P.Sing,UN.N.弗马市Kishor和H.K.Samdani,“中等浓缩对通过浸入式发酵产生柠檬酸的影响”,Orient化学杂志,vol.14 1页133-135,1998年
  10. M.Pachouki,P.A费塞J辛哈和TPanda,“Aspergilusnigers和Candida液化技术使用软糖和甘蔗比较研究”,生物过程工程,vol.22 4pp353-361,2000年
  11. G.L.Miller,DNS酸法减糖估计,AnalChem卷31pp42 1972
  12. M.Mattey和AAllan,“Aspergilusniger的遗传积聚”,运算生物协会18号5页1020-1022,1990
  13. T.E.Arzumanov,N.V希什卡诺瓦和T.V.Finogenova,2000年应用微生物学和生物技术