番石榴药理抗炎活性的研究。树叶和树皮单宁分数

摘要

目的:通过民族植物学研究和民间传说，综述了该植物的叶和皮Psidium guajava林恩。用于抗炎活动。从文献中我们发现单宁等多酚类化合物在细菌相关疾病中具有明显的自由基清除活性。基于以上资料，选取番石榴为研究对象。

•从番石榴中分离单宁部分。树叶和树皮。

•研究抗菌从番石榴叶和树皮分离得到的番石榴单宁组分的活性。

关键字

Psidium guajava；抗炎活性;丹宁酸

简介

药用植物在治疗疾病方面具有重要价值。多年来，科学研究扩大了我们对决定植物药用特性的活性成分的化学作用和组成的认识。

印度拥有古老的传统医学遗产。《印度本草》提供了许多关于民间传说实践和基于各种土著系统的传统医学的信息，包括阿育吠陀，悉达和乌纳尼^［1-3.］．

在西方医学中继续显示出古代做法的影响。最近，人们对传统药物体系中的其他产品产生了兴趣。青蒿素是从其中分离出来的一种活性抗疟疾化合物青蒿从中药抗疟制剂清藿香林中分离得到一个成分锦紫苏forskohlii这是一种用于治疗心脏疾病的阿育吠陀制剂^［4，5］．一种新的标准化制剂蒿甲醚最近被用于治疗耐药疟疾，Forskolin的新类似物正在进行各种用途的测试^［6］．

大自然提供了一个极好的药方宝库，可以医治人类所有的疾病。在古代，几乎所有使用的药物都来自天然来源，尤其是植物，即使现在，植物仍然是新药的重要来源。7］．在过去的几十年里，人们越来越认识到用于治疗人类疾病的植物源性药物的生物学、化学和药理学评估的重要性。

在我们远东植物系列的下一个节目中，我们来看看番石榴或Psidium guajava林．在民间医学中，根、树皮和叶子的提取物被用来治疗胃肠炎、呕吐、腹泻、痢疾、伤口、溃疡、牙痛咳嗽、喉咙痛、牙龈发炎和其他一些情况。这种植物似乎值得深入研究^［8，9］．

丹宁酸

“单宁”一词引申开来，广泛适用于任何含有足够多羟基和其他合适基团(如羧基)的大型多酚化合物，可以与蛋白质和其他大分子形成强配合物^［10］．这些化合物广泛分布在许多植物物种中，它们在保护植物免受捕食方面发挥着作用，也许还在调节植物生长方面发挥着作用。

发生

单宁在植物王国中以物种的形式分布。它们普遍存在于裸子植物和被子植物中。在植物学上，单宁主要存在于植物的液泡或表面蜡中^{［11，12］}．

单宁酸存在于叶子、芽、种子、根和茎组织中。单宁在茎组织中的位置的一个例子是，它们经常在树木的生长区域被发现，如次生韧皮部和木质部以及皮层和表皮之间的层。单宁酸可能有助于调节这些组织的生长。

单宁酸在抗菌活性中的作用

丹宁酸的抗炎作用有助于控制所有的症状胃炎食管炎、肠炎和刺激性肠道疾病。腹泻也用有效的收敛药物治疗，不能阻止烦人的物质在胃里流动;相反，它控制了小肠的刺激^［13］．

单宁酸不仅能治愈烧伤和止血，还能在伤口内部继续愈合的同时阻止感染。单宁酸能够在暴露的组织上形成保护层，从而防止伤口进一步感染。单宁酸对口腔粘膜也有好处^［14］．

单宁酸还能有效保护肾脏。单宁酸被用于立即缓解喉咙痛，腹泻，痢疾，出血，疲劳，皮肤溃疡，并作为坏疽伤口的愈合剂。单宁酸会导致组织中已经存在的肿瘤消退，但如果长期过度使用，会导致健康组织中出现肿瘤。单宁酸被间接用作杀螺剂，以中断血吸虫病的传播周期^［15-18］．据报道，它们还具有抗病毒作用。当与红葡萄汁和浓缩单宁含量高的红酒一起孵育时，脊髓灰质炎病毒、单纯疱疹病毒和各种肠道病毒都被灭活了。单宁酸有时被用来治疗毒橡树或蜜蜂叮咬产生的毒素，可以立即缓解。单宁酸具有潜在的抗病毒、抗菌和抗寄生虫作用^［19］．

据信，单宁是从茎皮分离出来的Myracrodruon urundeuva神经保护功能是否能够逆转6-羟基多巴胺诱导的毒性^［20.］．该植物已显示出有前途的治疗用途，这可能有利于神经疾病患者。Souza等人发现，从茎皮中分离出的单宁对啮齿动物也具有抗炎和抗溃疡的效力，显示出强大的抗氧化性能，具有可能的治疗应用。富含单宁的食物可用于治疗HFE遗传性疾病血色沉着病这是一种遗传性疾病，其特征是过度吸收饮食中的铁，导致身体总铁储量的病理性增加^［21-24］．

天然单宁的抗菌活性

用抗生素敏感菌和耐药菌对植物提取物和植物化学物的抑菌活性进行了评价。此外，还研究了与抗生素联用时可能产生的协同作用[25］．利用了以下植物的提取物:Achillea Millifolium(蓍草)、Caryophyllus aromaticus(丁香)、Melissa offficinalis(柠檬香)、Ocimun basilucum(罗勒)、Psidium guajava(番石榴)，Punica grantor(石榴)，迷迭香(rosemary)，鼠尾草(鼠尾草)，Syzygyum joabolanum (jambolan)和Thymus vulgaris(百里香)。植物化学物质苯甲酸、肉桂酸、丁香酚和法尼醇也被利用[26］．芳香石竹(Caryophyllus aromaticus)和joabolanum Syzygyum提取物的抑菌活性最高，分别抑制了64.2和57.1%的微生物，对耐药菌的抑制活性较高(83.3%)。鼠尾草和蓍草提取物无抗菌活性。抗生素与植物提取物联合对耐药细菌具有协同抗菌活性[27，28］．用铜绿假单胞菌得到的结果特别有趣，因为它被丁香，菊苣，石榴和百里香提取物抑制。在单个提取物中观察到这种抑制作用，当它们以较低浓度与无效抗生素一起使用时[29］．

单宁的生物学重要性

高分子量植物多酚(单宁)作为生物抗氧化剂

采用循环伏安法、肌红蛋白测定法和脱氧核糖测定法，对具有代表性的缩合和水解单宁酸及相关的简单酚类化合物进行了生物抗氧化剂评价。单宁的氧化还原电位与结构相关的简单酚[30.］．然而，单宁对过氧自由基的猝灭效果是简单酚类或妥洛昔的15-30倍。其中一种单宁酸，聚没食子葡萄糖，与羟基自由基的反应速度比甘露醇快一个数量级。这些结果表明，在许多植物性食品和饮料中发现的单宁酸是潜在的非常重要的生物抗氧化剂[31，32］．

浓缩植物单宁:结构和生物活性的生物多样性

原花青素是一类重要的植物次生代谢产物，在许多情况下是活性成分

从其中分离出来的药用植物。低分子量低聚物的结构复杂性和构象性质已经得到了充分的研究，而聚合物的化学性质仍然是一个困难的课题[33］．莽草酯类酚类化合物如黄酮类和单宁类广泛分布于植物界，因此不适合作为分类工具;然而，氧化水平在门之间和每个门内的进化状态归属中是指示性的。已报道的缩合单宁的主要生物和药理作用可分为抗菌和抗病毒活性、酶抑制、抗氧化作用、抗突变和抗肿瘤特性，其次是一些更具体的相互作用，例如与血管和心脏系统以及炎症过程的相互作用[34］．它们与生物系统的预期相互作用原则上直接源于多酚骨架的物理和化学性质，尽管已经观察到显著的个体差异[35-37］．

植物化学的研究

采集与鉴权

用于拟议研究的植物标本(叶子和树皮)于2010年7月从金奈市帕拉瓦拉姆的维尔斯大学花园中采集。它是由Dr.P。Jayaraman，金奈坦巴拉姆植物解剖研究中心(PARC)主任。编号为。PARC/2010/594已保存以供进一步参考。

提取

树的叶子和树皮Psidium guajava亚麻是阴凉干燥和粗粉。经72 h后，用乙醇冷浸渍法提取药粉约300 gm。浸渍是过滤的。萃取完成后，用溶剂蒸馏浓缩萃取液，然后用真空闪蒸器减压蒸发至干燥。然后依次用石油醚、氯仿、乙醇、水等极性递增的溶剂萃取，得到其馏分。所有馏分在真空下蒸发，观察其颜色和稠度。百分比产量按风干计算[38，39］．结果列在表格中表1 - 3．

植物化学的筛选

树叶和树皮丹宁酸对各馏分进行定性植物化学测试，以鉴定其成分[40］．结果显示在表4 - 6．

色谱法(41-43］

薄层色谱法

薄层色谱法是分离、鉴定和估计不同组分的重要分析工具。这里的分离原则是吸附和分配。固定相起吸附剂的作用。根据不同类型的固定相，可以在划分的基础上或划分与吸附相结合的基础上，用不同的溶剂制备和使用。

板的准备

薄层色谱用的吸附剂为硅胶G，取硅胶G约25克于玻璃砂浆中，加蒸馏水约35毫升。用玻璃棒搅拌混合物，直到它变得均匀，并让它膨胀15分钟。加入15毫升蒸馏水搅拌。然后将悬浮液转移到一个装有塞子的150毫升烧瓶中，并大力摇晃约2分钟。然后，这种悬浮液在薄层色谱板上立即均匀加速。

印版的干燥和储存

然后，将新涂层的盘子风干并堆放在干燥架上，在烤箱中以110℃的温度加热30分钟。激活板保存在干燥器中，直到需要进一步使用。

测试样品的制备

将10 mg TLF和TBF测试样品溶解在5 ml 95%乙醇中。1 μl为点。

标准样品的制备

将10 mg没食子酸(纯样品)溶于5 ml乙醇中。1 μl为点。

样本的应用

样品以斑点的形式涂抹，在细毛细血管的帮助下涂抹斑点。在盘子的顶部标记了地点，以便他们识别。

色谱室，饱和条件和薄层色谱板的显影

实验采用矩形玻璃色谱室。为了避免色谱室饱和不足和不良的边缘效应，将一张光滑的滤纸呈U型放置在色谱室中，并允许在显影溶剂中浸泡。把纸弄湿后，再把它压在房间的墙上，这样它就能粘在墙上了。实验在室温漫射日光下进行。

开发溶剂体系

试验了许多正在开发的溶剂体系，但在溶剂体系中获得了令人满意的分辨率表5．显影后风干，记录斑点数，计算R f值。喷洒检测剂后，用紫外室观察斑点。薄层色谱结果见表7在图1．

药理研究

在体外抗炎活性[44-46］

炎症是血管组织对有害刺激的复杂生物反应，如病原体、受损细胞或刺激物。炎症是机体消除有害刺激并启动组织愈合过程的一种保护性尝试。在没有炎症的情况下，伤口和感染将永远无法愈合，组织的渐进破坏将危及有机体的生存。然而，慢性炎症也会导致一系列疾病，如花粉热、动脉粥样硬化和类风湿关节炎。正是由于这个原因，炎症通常是由身体密切调节的。寻常痤疮是最常见的皮肤病之一，由脓液形成的生物体引发痤疮炎症。所以，现在就设计来研究一下体外抗炎活性。

体外HRBC膜稳定法测定抗炎活性

这里所涉及的原理是通过低张力诱导的膜裂解来稳定人类红细胞的膜[47］．将1 ml磷酸盐缓冲液[pH 7.4, 0.15 M]， 2 ml低生理盐水[0.36%]，0.5 ml HRBC悬液[10% v/v]， 0.5 ml不同浓度的植物提取物(31.25,62.5,125,250,500，μg/0.5 ml)，标准药物双氯芬酸钠(31.25,62.5,125,250,500 μg/0.5 ml)和对照[用蒸馏水代替低生理盐水产生100%溶血]，在37℃下孵育30 min，离心。用560nm分光光度计测定悬液中的血红蛋白含量。在蒸馏水存在下产生的溶血百分比为100%。结果列在表格中图2而且3.［48-52］．

用公式计算HRBC膜的稳定或保护百分比，

稳定百分比=100 -[(药物光密度)÷(对照光密度)× 100]

结果

目前的工作包括研究叶和树皮的抗炎和伤口愈合活性Psidium guajava林恩。

提取

叶子的连续提取Psidium guajava林．按极性增加的顺序进行，即石油醚、氯仿、乙醇和水(表1 - 3）.

Phyto-chemical筛选

进行了植物化学试验，以鉴定各种成分。皂苷、类黄酮、酚类化合物、单宁、萜类化合物和类固醇(表4 - 6）.

提取液层析(TLC)

并与标准样品(没食子酸)进行了薄层色谱鉴别。在溶剂体系中只使用冰醋酸(10ml)和5%氯化铁(fecl_3.)作为检测剂。在R_f标准值(0.93&0.87)，富单宁分数R_f值(0.91和0.85)。研究结果发表于表7 - 9．

讨论

民族植物学研究和民间传说认为，这种植物的叶子和树皮Psidium guajavaL.，用于伤口愈合，抗炎和抗菌活性。幼叶在消化功能疾病中被用作补药，据说是治疗牙痛的药物。单宁具有广泛的生物活性，其中抗炎和创面愈合作用最为突出。番石榴树。属于桃金娘科是一种广泛分布在印度的植物，通常用作防腐剂，打虫药伤口愈合和炎症情况。文献综述其鞣质含量较高。因此，本文重点研究了富单宁组分的分离，并对其抗单宁性进行了评价

炎症和抗菌活性。植物的叶子和树皮中富含单宁的部分被配制成软膏形式，并对伤口愈合活性进行了研究。

植物化学的研究

通过植物化学筛选，鉴定了乙醇提取物及其馏分中的植物成分。单宁分离物的植物化学筛选显示单宁的存在。

采用分光光度计法测定总单宁含量。结果表明，该植物中单宁含量较高。在化学试验的支持下，对单宁组分进行薄层色谱分析，5%氯化铁溶液中单宁组分呈蓝色斑点，证实单宁存在。经比较，鉴定为没食子酸_f与标准没食子酸值比较。

体外抗炎活性

实验提取液通过抑制低张力诱导的红细胞膜裂解，表现出稳定细胞膜的作用。红细胞膜类似于溶酶体膜，其稳定性表明单宁组分也可以稳定溶酶体膜。稳定溶酶体膜对于抑制炎症反应非常重要，因为它可以防止活化中性粒细胞的溶酶体成分(如杀菌酶和蛋白酶)的释放，这些成分在细胞外释放时会引起进一步的组织炎症和损伤。尽管提取物稳定膜的确切机制尚不清楚，低渗引起的溶血可能是由于细胞内电解质和液体成分的渗透损失而引起的细胞收缩。测试部分可能会抑制这一过程，这一过程可能会刺激或增强这些细胞内成分的外排。由于富单宁部分被发现在稳定红细胞膜对抗低张力诱导的溶血方面比富单宁部分在控制炎症方面更有效，单宁部分可能会抑制痤疮炎症的触发。

结论

通过本研究，得出结论Psidium guajava林恩。叶子和树皮鞣质有明显的抗炎作用体外模型。然后根据抗炎活性，该植物的叶子和树皮中富含单宁的部分在测试浓度下显示出显著的伤口保护百分比。

抗炎活性可能是由于单宁(没食子酸)的存在。进一步的研究需要分离单宁，并通过各种分离化合物的临床前和临床试验来探索其生物效力。

参考文献

1. AbdelrahimSI, Atragboul AZ, Omer MEA。筛选Psidiumguajava水树皮和甲醇提取物及抗菌活性。Fitoterpia．2002; 73:713 - 715。
2. Adeyemi。乙醇叶提取物对感染大鼠的植物化学和锥虫活性trypnosomabruceibrucei．药用植物研究杂志．2009;3(5): 420 - 423。
3. Agarwal SS,Paridavi M.草药技术。NirliPrakashan出版社，2007,1。
4. 杨晓明，杨晓明，杨晓明，杨晓明，等。竹叶油的化学成分Psidiumguajava．印度香．2005:49(1): 73 - 75。
5. 查特吉A，钱德拉SP.印度药用植物专著。印度国家科学、通信和信息资源研究所，新德里，2003;4: 14 - 16。
6. Kumar A, Lakshman K, Jayaveera KN。没食子酸、芦丁、槲皮素含量测定Terminaliachebula效果。约旦药物科学杂志。2003;3(1)。
7. 阿玛拉维兹R, Traszynska A, Pegg RB。反oxidative and radical scavenging effect of phenolics fromViciasativum．Fitoherapia。2008;79: 121 - 122。
8. Chanchal KR, Jagadeesh V, Kamath。肝保护活性Psidiumguajava林恩。印度实验生物学杂志．2006; 44:305 - 311。
9. Dhara AK, GebremariamB chowdaryN。神经药理学进化Psidiumgujava水果。印度药学杂志。1994;56(4):164。
10. 番石榴的抗高血糖和抗高血脂作用。Phytopharm．2010; 11(03): 26。
11. 命运ma S, Jadhav MJ。番石榴褐腐病的分离、致病性及防治研究。Bioinfolet．2006;3(1): 74。
12. 傅兆华，罗玉明，李继杰。孤立的psidials。Phytopharm．2010;11(02): 31。
13. Razak FA, Yasmin R, thman O,Zubaidah。的影响风笛手甲虫而且Psidiumgujava提取物。科学杂志．2006;48: 71 - 75。
14. 甘地。抗炎作用LanneacoromandelicaHrbc膜稳定，Fitotherapia1999;62:82 - 83。
15. 戈尔曼,郑、王。反oxidant and antiproliferative activities of methanolic extracts ofPerillafrutescens。药用植物研究，2010;4(6): 477 - 483。
16. 古普塔VK、MisraAK。RK白肢野牛。番石榴枯萎病的研究现状。生物技术杂志．2010;9(2): 176 - 195。
17. Harborne简森-巴顿。植物化学方法是现代植物分析技术的指南。1998;83.
18. Joshi SG。印度药用植物。牛津和IBH出版社，2003年;293.
19. Jimenez A, Rincon M, Pulido R, Saura-Calixto。番石榴作为抗氧化膳食纤维的新来源。农业与食品化学杂志．2001;49(11): 5489 - 5493。
20. Jairaj P, Ongkrajang Y, ThongapraditchoteS。的影响Psidiumgujava叶提取物对出血时间的影响。植物疗法的研究．2000; 14(5): 388 - 391。
21. 纪晓东，蒲ql, GarraffoM。精油中化合物的表征。精油研究杂志．1991;3(3): 187 - 189。
22. 刘国强，李国强，李国强。黄酮类化合物的组成Psidiumguajava．亚洲化学杂志．1997;9(4): 871 - 872。
23. 《印度药用植物》。插图植物词典。2007;522.
24. Kiritikar, Basu，《印度药用植物》。国际图书分销商出版社，德哈顿，1999;2: 1046。
25. 叶提取物的创面愈合潜力FicusReligiosa在Wistar白化毒株大鼠上国际药学杂志科技研究。2009; 1(3): 506 - 508。
26. 卢娜S，桑多瓦尔E，洛索亚。成熟番石榴叶的解剖特征及药材的质量控制。Fitoterpia．1986;9:223 - 229。
27. Lal G, Sen NL。氮、锌、锰施肥对番石榴土壤组成及产量的影响。Hamdardmedicus．2003;46(3): 82 - 85。
28. 拉特洛特·a·伊斯梅尔·RH，击球手。麻药样提取物抑制微松弛引起的实验性腹泻Psidiumgujava。民族药理学杂志．1992;37(2): 151 - 157。
29. 松崎K，石井R，小山。新型二苯甲酮和槲皮苷的结构。Phytopharm．2010年,41。
30. 梅尔卡丹特A，斯特克A,Pfander。巴西红番石榴果肉中的类胡萝卜素。农业与食品化学杂志．1999;47(1): 145 - 151。
31. MeckesM.CalzadaF.Tortoriello。分离的萜类化合物的抑制剂活性Psidiumguajava。PhytotherapyResearch.1996;(7): 600 - 603。
32. Mehrota b.n.和RamP。印度药用植物简编。CDRI出版社，勒克瑙，5:700。
33. MoshraFuddin Ahmed，《印度药用植物》。MJP出版社，金奈，2007:376。
34. MuruganandanS, Srinivasan K, Tandan,SK．番石榴的抗炎镇痛作用。药用和芳香植物科学杂志。2000; 22: 56-58。
35. Misra SB, Dixit SN。，反-fungal activity of leaf extracts of 14 plants includingPsidiumguajava。《机器人。印度．1974;卷7(2):147-150。
36. Metwally。抗菌活性五类黄酮化合物。生药学杂志．2010;6:212 - 218。
37. Nadkarni正义与发展党。《印度材料杂志》1976;大众普拉卡山出版社。1:1018。
38. Niazrahim, Donald james, Haruowatanabe。抗菌活性Psidiumguajava叶子和树皮对抗多重耐药霍乱弧菌。感染．2010;63: 271 - 274。
39. Okwu DE.植物化学。尼日利亚两种药用植物的维生素和矿物质含量。国际分子医学杂志，2005;1(4):375-381。
40. Bello OII, Odusanya AJ,Raji。水萃取物的收缩作用Psidiumguajava。Fitoterapia．2007;8(3): 241-243。
41. 欧巴西BNB，伊博地奇CA.提取物的作用Newbouldialevis，Psidiumgujava而且Philanthusanarus在肠子上。Fitoterapia．1993;64(3): 235 - 238。
42. Oliver-Bever。西非热带的药用植物。剑桥大学出版社，剑桥，1986。
43. 般若菩萨，普罗希特，沙玛，库马尔。《药用植物手册》。一本完整的资料书。2007;427.
44. 黄酮类化合物的抑菌活性。药用植物研究杂志．2010;4(5): 393-396。
45. 黄酮类化合物对鱼类细菌病原体的抑菌活性研究。Fitoterpia．2007;78: 434 - 436。
46. Prabu GR, Gnanamani AS。反链球菌突变活动和已瓜瓜素亚最低抑制浓度的影响。应用微生物学杂志．2008; 101: 487 - 495。
47. Rajkumar DV, Rao MNA。脱氢姜酮和异丁香酚对脂质过氧化和自由基清除的抑制作用，生物化学和药理学，1993;2: 2067 - 72。
48. 古铁雷斯RMP，米切尔。化学成分和药理用途psidiumguajava．乙醇药理学杂志．2008;117: 1-27。
49. Ram PR, Mehrotra BN。药用植物的纲目。CDRI.Lucknow。1960.
50. SR沙玛,RajendraK。的生物活性化合物Psidiumguajava。科学与工业研究杂志．1999;58(6): 414 - 421。
51. Santos F A,Silveira VSN。番石榴叶精油及其主要成分抗痛感作用的研究。植物疗法的研究．1998;12(1): 24 - 27日。
52. Sang-Bong水平。反-cancer activity of guava.药用植物研究杂志．2010;4(10): 891 - 896。