e-ISSN: 2321 - 6182 p-ISSN: 2347 - 2332
Sumaiya穆罕默德Aslam Albulushi哈难Al Saidi吧Amaresh,和AR Mullaicharam*
阿曼医学院,马斯喀特,阿曼苏丹国。
收到:20/08/2014修改后:15/09/2014接受:18/09/2014
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八角植物(Pimpinella anisum Linn)是一个开花的药用植物和年度重要香料属于伞形科的家庭原产于地中海东部地区和亚洲西南部。八角(Pimpinella anisum Linn)精油已广泛应用芳香疗法呼吸困难以及有良好的影响哮喘作为一个自然的哮喘治疗。目标项目的目的是提取精油在Saunf(八角)。目的本研究的主要目的是集中在识别和量化的化学成分,并用gc - ms茴香精油的方法。精油可以定义为挥发性气味的油的蔬菜来源。精油芳香物质是广泛用于香水行业、食品和调味品,化妆品,医药产品。八角植物(Pimpinella anisum)是一年一度属于家庭伞形科。它是一种无色或淡黄色液体的特征气味和味道的水果。方法本研究茴香精油的被蒸汽蒸馏提取。许多化学成分被发现通过气相色谱和质谱(GS-MS)分析茴香精油的。它是高度溶于有机溶剂。 In addition, the extracted aniseed oil was tested for antimicrobial and antioxidant properties. Result: The essential oil showed resistance properties on E.coli, Staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa and Klebsiella; however aniseed oil was not particularly inhibitory to bacteria. The antioxidant activity was assessed by the DPPH free radical scavenging method. The total phenolic content was determined with the Folin Ciocalteu Reagent (FCR).Refractive index was calculated (1.4765).
提取、抗氧化、抗菌测试、气相色谱法质谱分析(气相),Pimpinella anisum林。
精油含有高度挥发性物质分离的物理方法或过程从植物的植物物种。油通常承担他们的植物物种的名字。把精油,因为他们被认为代表了本质的气味和味道。精油植物和烹饪药草包括范围广泛的植物物种用于芳香价值作为香料在食品和饮料和香水在医药和工业产品。精油来自芳香植物的属全球分布(1]。
八角工厂(Pimpinella anisum林)是一个开花的药用植物,是一年一度的重要香料属于伞形科的家庭原产于地中海东部地区和亚洲西南部。茴香被认为是亚洲血统,但是目前发现在欧洲中部和南部,埃及,俄罗斯,塞浦路斯,叙利亚和北美。大多数商业种子从土耳其进口,紧随其后的是西班牙和中国(18]。炆今天,是一个重要的原料用于医药、香料、食品和化妆品行业2]。最近,这种香料的植物吸引了更多的消费者由于抗菌,抗真菌、杀虫和氧化这种草药对人体健康的影响。茴香精油的世界生产每年达40 - 50吨。因为八角植物喜欢温暖的气候条件在整个生长季节是培养特别是亚热带地区(3,4]。茴香的数量主要取决于精油含量及其组成。
八角植物是一种草本一年生植物生长到3英尺(0.91米)高。植物的叶子底部很简单,在(1.3 - -5.1厘米)长,0.5 - 2浅裂,虽然叶子上高茎柔软如羽毛的羽状复叶,分成无数的叶子。花白色,直径约3毫米,在茂密的伞形花序。水果是一个长方形的干分果;长3 - 5毫米(5]。精油位于茴香水果和芽的裂殖生殖的石油管道6]。
精油Pimpinella属是一个复杂的混合物的各种组件包含sesqquterpens,酚类化合物(C6-C3)和烯烃。精油位于裂殖生殖的石油管道的水果、芽和根。根据欧洲药典茴香,药物必须有一个精油浓度高于2% (7]。
同样清楚的是,精油的浓度可以显著改变在八角来自不同来源(8- - - - - -10]。八角茴香精油具有药用价值。茴香茶用于儿童肠胃气胀,上呼吸道问题和支气管哮喘发作(11]。Transanethole (4-methoxyphenyl-1-propane)、茴香油的主要成分,是前体可以产生2,5-dimethoxybenzaldehyde用于迷幻药物的合成,如捐赠(2、5 dimethoxy-4-bromoamphetamine) [12]。八角是有用的在破坏身体虱子(13),头虱和瘙痒insects11和石油可以单独使用14),这使得它有利于prediculosis,虱子(引起的皮肤病15]。它也可以用于疥疮[16),它可能是一个外部应用在一个药膏基地(14]。
茴香精油是用于香水、肥皂和其他调味品盥洗用品和烹饪准备,糖果,饮料和酒茴香酒。用于香化香包、牙科准备和嘴洗;它也用于制造酒。它还具有药用价值。茴香油也用作芳香驱风剂来缓解肠胃气胀和cough-lozenges结合甘草的成分。它是一种温和祛痰剂,用作防腐剂,和治疗霍乱。它可用于制备抱怨水(17]。
精油已被证明具有抗菌、抗真菌、抗病毒、杀虫和抗氧化性能19,20.]。一些油被用于癌症治疗(21]。其他一些油已经用于食品保存(22],芳香疗法[23)和芳香产业(24]。精油富含生物活性化合物。有兴趣增加看着提取物的抗菌性能芳香植物精油,我们的项目我们特别关注茴香油(25]。因此,它是合理的期望不同的植物化合物,这些油与特定以及一般的抗菌活性和抗生素的潜力26]。
蒸汽蒸馏用于提取精油的植物材料。它是一种特殊类型的蒸馏或分离过程对温度敏感材料像油、树脂、碳氢化合物等不溶于水和可能分解沸点。
蒸汽蒸馏的基本性质是它使一种化合物或化合物的混合物蒸馏的温度大大低于沸点(s)的个体组成。精油含有组件与沸点200°C或更高的温度。在蒸汽或沸水的存在,然而,这些物质挥发性在温度接近100°C,在大气压力27]。
分析精油是通过使用气相色谱法。做定性和定量分析是为了了解选民的比例在石油和组件分别存在于石油,通过这样做,我们可以知道这个油的纯度(28]。
目的和目标
•验证提取的精油有以下属性:抗菌活性,抗氧化活性。
目标
•通过茎蒸馏从八角中提取精油。
•执行茴香油的物理化学性质。
•估计总酚含量茴香油。
通过DPPH•确定体外抗氧化活动。
•屏幕洋茴香油的抗菌活性。
植物材料
新鲜茴香有来自不同公司的市场,AlShahi和艾尔。收集到的样本通过机械研磨机,15分钟获得粉和守恒的提取。
提取精油
有许多方法用于提取精油的植物。在目前的研究蒸汽蒸馏方法。在这个过程中,50克的样品被500毫升圆底烧瓶。然后添加了250毫升蒸馏水和沸腾的芯片和混合搅棒。
蒸馏是始于一个温和的水流通过冷凝器和一直持续到大约100毫升的馏分收集并冷却到室温。精油是比水轻,所以可以分离出来。蒸汽蒸馏精油层收集水,提取和分析洗年级分液漏斗125毫升氯仿。氯仿提取物的石油在无水Na2SO4干然后过滤。这是收集瓶和蒙在鼓里,直到那一刻的分析。氯仿是在真空条件下删除。因此新鲜茴香精油的收集。
gc - ms分析
的精油Pimpinella anisum林。(八角)分析了两个品种的电子碰撞电离GC-17A气相色谱仪(EI)方法,结合gc - ms 2010 +一个质谱仪;熔融石英毛细管柱温度40°C(2分钟)举行与载气氦保持恒压90 kpa。样品被分割,分流比10注入。精油样品溶解在氯仿。的操作条件如下:名称列- RTS - 5 ms,直径30厘米,长度0.25毫米,柱的温度——初始温度40°C(2分钟)举行,喷油器温度- 220°C,持有时间5分钟,列包装完成10%琥珀酸二甘醇在100 - 120目双原子,高高的,splittingsamples被分裂,泄漏率10注入,载气-氦气在恒压下90 kPa,样品溶解在氯仿中,线性范围温度升高- 10°C /分钟。
gc - ms分析精油样品的准备
精油被氯仿稀释到7%。介绍了惰性气体(如氮),从一个大气瓶通过注射部分,列和探测器。载气的流量调整,以确保可再生的保留时间和最小化探测器污垢。样本被注入的微注射器通过加热注入部分蒸发的时候,成列。列的长管与固体颗粒紧密。固体支持均匀覆盖着一层薄膜的高沸点液体(固定相)。移动和静止阶段被分区的样本分为单个组件。载气和样本组件当时新兴的列和通过一个检测器。每个组件的数量浓度的装置,并生成一个信号,这是注册电。信号传递给一个检测器。
茴香油的物理化学性质
有许多物理化学性质,可以进行精油,在这项研究中所选的是由于缺乏执行所需的化学物质和密封瓶在我们的大学。石油从八角获得下列测试:感官属性、折射率和溶解性在不同的溶剂,沸点,酸值。
感官品质:检测到的视觉、味觉、嗅觉和触觉。
折射率:棱镜折射计的组装是开了,用乙醇清洗(不需要擦就温柔的印迹软组织)。然后,水2 - 3滴/样本被放置在中间的固定棱镜滴管(不要碰滴管的棱镜)。棱镜大会被关闭之后,灯打开,朝着棱镜照射视野,handweel旋转,直到两个截然不同的领域(光明与黑暗)可见,和线是集中在十字线。折射率被记录。
溶解性:一个已知数量的溶剂是在试管中。物质的溶解度是待定(石油)补充道,观察表面的一层透明的不溶性表示。
酸值:5通用石油和25毫升的中性酒精被转移到一个锥形瓶100毫升,然后加热蒸汽浴室的10 - 15分钟,直到油溶解了。冷却后,4滴酚酞补充道。对0.1 n氢氧化钠滴定瓶的内容开始观察从滴定管和粉红色的解决方案。酸值计算。
测定总酚类Folin Ciocalteu试剂(货代)
化学物质需要
碳酸钠溶液,没食子酸标准溶液,货代试剂、乙醇或甲醇
制备7.5%碳酸钠溶液:7.5 g的碳酸钠(Na2CO3)加权和溶解在少量的蒸馏水。最后成交调整100毫升容量瓶。
货代试剂:用水稀释(1:10)
标准没食子酸溶液的制备:10毫克的没食子酸是加权和溶解在10毫升乙醇。这是1毫克/毫升的浓度或1000μg /毫升的没食子酸。这个解决方案是标记为股票的解决方案。工作标准是准备从这只股票的解决方案:
植物提取物的制备:0.01克植物提取物被溶解在10毫升乙醇。这个解决方案是10毫克/毫升的浓度或1000μg /毫升的植物提取物。
实验的程序
•1毫升的植物提取物或标准不同的浓度是在试管中。
•2毫升的货代(稀释10倍)添加进试管。
•4毫升的碳酸钠溶液添加到试管。
•试管被孵化完成反应30分钟在20摄氏度(标准)。试管是孵化完成反应1小时20摄氏度(植物提取物)。
•然后溶液的吸光度为765 nm使用分光光度计对空白。
•一个典型的空白解决方案包含乙醇。
DPPH自由基清除实验(2,2-diphenylpicrylhydrazyl)
制备DPPH的解决方案:4毫克的DPPH溶解在100毫升乙醇(0.004%或40μg /毫升)。
标准抗坏血酸溶液的制备:抗坏血酸标准溶液制备溶解在蒸馏水中100毫克100毫升(1000μg /毫克或1毫克/毫升)的股票解各种系列稀释准备10、50、100年、200年和500年μg /毫升蒸馏水。
植物提取物的制备:0.01克植物提取物被溶解在10毫升乙醇。这个解决方案是1毫克/毫升的浓度或1000μg /毫升的植物提取物。从这个股票的解决方案不同的稀释20、40、80年、200年和500年μg /毫升乙醇的准备。
实验的程序
•1毫升的水和2毫升的DPPH担任控制解决方案。
•1毫升的不同浓度的标准溶液或植物提取物,2毫升的DPPH的解决方案是补充道。
•在黑暗孵化后20分钟,溶液的吸光度测量在517海里。
测定抗菌活动Kirby-Baure过程
所需的材料
佩特里无菌Muller-Hinton琼脂和血琼脂板,纯培养悬浮,无菌棉拭子,抗生素光盘,钳和酒精。
测试生物
三种菌株革兰氏阴性细菌大肠杆菌,肺炎克雷伯菌,杆菌subtitils和一株革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌被使用。
抗菌试验
筛选抗菌活性的精油是由磁盘扩散法如下
•工作区域是用酒精清洗。
•步骤进行无菌程序像本生灯火焰下。
•一个洞是在琼脂板通过切除小块中石油可以倒。
•肉汤培养接种在介质表面的无菌棉拭子的帮助下。
•板贴上适当,表面允许干3 - 5分钟。
•原油涌入洞计吸管的帮助和孵化24小时在37摄氏度。
•标准或控制,抗生素盘是沉积在琼脂表面消毒钳的帮助。
石油产量决心和理化性质
物理化学性质的结果得到如下:
gc - ms分析
gc - ms分析结果包括主动原则与他们的保留时间,和精油的成分Pimpinella anisum林。(八角)给出表2。
测定总酚类Folin Ciocalteu试剂(货代)
总酚含量计算为没食子酸当量(GAE)从校准曲线的没食子酸标准的解决方案,并表示每100毫克的没食子酸μg精油的样本,通过使用一个公式如下:
(y = mx + c)或c = (cxV) / m,
地点:
C =总含量的酚类化合物,在GAE毫克/克植物提取物
c =没食子酸的浓度校准曲线的建立,毫克/毫升
V =提取液的体积,毫升
m =样品的重量
抗氧化活性
茴香油的prcentage抑制DPPH自由基是按照下列公式计算:
%抑制= ((AB-AA) / AB) x 100
地点:AB空白样品的吸收和AA测试油的吸收
筛选抗菌活性
茴香油的抗菌活性与四个细菌物种了表6。
天然产物在食品的制造商的需求不断提高,化妆品和药品。因此精油进行研究的重要性不仅在化学特征还在于化学内容链接的可能性与特定的生物活性功能性质。调味料和香料以减少疾病风险的能力,在烹饪的上下文中使用,尚未完全评估。有一种强烈的需要了解香料的预防效果和天然风味柜台代理氧化损害。我们的研究表明从香料精油可以被认为是一个有前途的未来候选人食品补充剂。
在目前的研究中,茴香精油的水果是hydro-distillated评价茴香油产量、物理化学性质、化学成分、抗氧化活性、总酚含量及抗菌活性(表4 - 8)。根据我们的研究,精油含量在干重的基础上的八角是1.2096%。
我们的结果可能不同以前的研究相比,由于几个因素,如不同的实验条件,基因型,成熟阶段,培养特性、土壤成分在不同的地理位置和气候差异,干扰精油含量和组成。此外,在干重的基础上每植物精油产量将低于鲜重基础上的草药,和精油产量的减少可能发生当植物干蒸馏前,由于变化,有利于酯的形成和自由脂肪酸的生产Pimpinella anisum。
物理和化学特征如颜色、外观,味道,气味,溶解度,折射率,酸值的精油是由传统方法(表4方法部分中描述的)。波动的石油成分可以传授的感官特性变化属于植物香料和植物品种。
gc - ms分析结果包括主动原则与他们的保留时间,提出了分子量和茴香精油的组成表5。总9茴香精油的化学成分被发现在这个研究(Trans-anethole,四氯乙烯,2-heptanal (Z和E)、甲氧,2,4-decadienal, 3, 5, 5, 9-tetramethyl benzocycloheptene (1 h), 2 - (1-propenyl) 4-methoxyphenyl 4-methoxy-2 - (3-methyloxiranyl)苯酯和1,2-cyclohexanedimethanamine)与以前发表的研究是一致的,但在不同浓度的各个组件。可变性茴香精油的挥发组分从我们的结果似乎很大程度上是由于阶段的收获,季节性和环境因素,除了使用不同的方法提取的挥发性成分。茴香精油的主要化合物是Trans-anethole,紧随其后的是2,4-decadienal。同样,Trans-anethole以前报告为主要组成部分Pimpinella anisum。
检查植物提取物中的总酚含量使用Folin-Ciocalteu试剂是用没食子酸当量(标准曲线方程:y = 0.0007 x + 0.087 R2= 0.9802)。获得总酚类化合物的浓度的值表示为毫克的GA / g的提取(表7)。总酚含量进行提取范围从18.68到26.76毫克GA / g。总酚含量的植物提取物的物种Pimpinella anisum取决于类型的提取,即极性溶剂的提取使用。高溶解性酚类化合物的极性溶剂提供高浓度提取获得使用这些化合物的极性溶剂提取。
的抗氧化活性Pimpinella anisum决心用DPPH试剂的乙醇溶液。DPPH自由基非常稳定。与体外生成的自由基,如氢氧自由基和超氧化物阴离子,DPPH的优点是不受一定的副反应,如金属离子螯合物和酶抑制。刚做好的DPPH解决展览深紫色的颜色吸收最大值517海里。这个紫色的颜色一般消失在淬火DPPH自由基抗氧化分子(即通过提供氢原子或电子捐赠,可以通过对DPPH自由基攻击分子),并将其转换成无色- /漂白产品(即2 2-diphenyl-1-hydrazine或取代肼类似),导致吸光度下降在517海里。
我们测试了茴香精油的抗氧化活性五个不同浓度的10,50岁,100年、200年和500年μg /毫升使用% DPPH抑制方法部分中描述。它被发现是活跃在500μg /毫升的浓度。执行的浓度的酚类抗氧化活性最高浓度最高。酚类化合物是非常重要的植物成分,因为他们对自由基清除能力羟基组。因此,植物的酚醛含量可能有助于抗氧化作用。
在目前的研究中,精油的有效性是由琼脂纸片扩散法来检测生长抑制区存在和缺乏每个精油(表9)。基于增长获得菌株抑菌圈直径分为三类即敏感,耐药(> 7毫米),中间(> 12毫米),和敏感(> 18毫米)。结果表明,生物除了没有抑菌圈测试Basillus Subtitis。
系统的配置中使用目前的工作是有效提取茴香精油。使用蒸汽蒸馏提取精油可用于工业规模做出各种成品包括身体油、化妆品乳液、洗澡,头发冲洗,香皂、香水和房间喷雾剂。
分析使用气相色谱法质量分光计甚至被发现是最好的方法来识别特定的次要组成部分石油主要组件。
我们的研究结果表明Pimpinella anisum代表一个最好的潜在来源的有效的天然抗氧化剂,促进健康和降低癌症的风险,高血压和心脏疾病。而且结果表明,他们对芽孢杆菌的抗菌活性subtitis。