山羊气管肌制剂用于评估具有支气管扩张剂活性物质的适用性

摘要

支气管哮喘是一种呼吸道疾病，其特征是气管支气管树对多种刺激的高度反应性。药物对气管支气管平滑肌的作用试验应首先用常规方法在器官浴中对气管或支气管组织进行。本研究旨在评价山羊气管肌制剂用于筛选具有支气管扩张剂活性的药物或物质的适用性。山羊气管是从屠宰场刚宰杀的山羊身上采集的。对不同剂量组胺进行了一系列的剂量反应，直至获得上限剂量。将溶解在温蒸馏水中制备的不同剂量的无水茶碱加入浴液中，让其发挥作用。观察到无水茶碱(5X10-3)溶液可拮抗组胺诱导的收缩反应(p<0.001)。山羊气管肌制剂更容易处理，准备也似乎比豚鼠气管链更敏感，具有一致和可靠的反应。该制剂可用于筛选多种植物提取物或产品以评价支气管扩张剂活性。山羊气管制剂非常容易获得，并且可以避免牺牲大量实验动物来评估具有支气管扩张剂性质的物质。

关键字

支气管扩张剂活性，山羊气管链，组胺诱导收缩，茶碱无水

介绍

支气管哮喘是一种呼吸道疾病，其特征是气管支气管树对多种刺激反应过度[1]。大量的药物和措施被用来治疗这些病人。虽然大多数患者对现有治疗反应良好，但5- 10%的重症患者反应较差[2]。科学工作者目前正致力于从印度普遍种植的草药和植物提取物中寻找安全、可接受、有效和廉价的支气管扩张剂。这些草药和植物自古以来就被用于治疗支气管哮喘。1]。筛选中草药提取物可指导理想支气管扩张剂的合成。药物对气管支气管平滑肌的作用试验应首先用常规方法在器官浴中对气管或支气管组织进行。这种方法优点不多，只需要相对少量的测试材料，且直接测试效果，不受吸收、代谢、排泄等因素的影响，也不受神经反射的干扰[3.]。一些体外制剂已被不同的工作者用于支气管扩张剂药物的研究[4]。这些研究人员使用了来自大型动物的肌肉。气管链可以从较小的实验动物如豚鼠身上制备，方法是将气管切成圆环，然后用丝线环将圆环以链的方式连接起来[5]。但气管本身很短，嵌在周围组织中，需要精细的解剖。因此，尽管经典制剂需要技巧来准备，并且对许多激动剂不敏感[4]。相反，山羊气管肌制剂更容易处理和制备。它似乎也比豚鼠气管链更敏感[2]。

不同物种组胺对气管支气管肌的药理作用不同。啮齿动物、狗和人的反应是支气管收缩[6]。为了解山羊气管受体的种类变异和性质，已进行了许多研究[7]

山羊气管肌不仅对组胺，而且对5-羟色胺、乙酰胆碱和儿茶酚胺及其已知拮抗剂的正常药理反应，已由一些作者研究出来[4，7，8]。

除了气道炎症外，哮喘患者通常表现为支气管过度活跃。使气道阻力增加20%所需的组胺浓度仅为健康对照组同等有效浓度的1%-2% [9]

组胺对哺乳动物气道平滑肌产生高度不同的影响。有一些研究是为了检测山羊气管肌肉中受体的性质。山羊气管被发现含有H1(兴奋性)，少量H2(抑制性)，5- HT和毒蕈碱兴奋性受体，因为乙酰胆碱诱导的收缩被阿托品有效阻断[10]。

从组织学上看，气管和支气管拥有相同类型的软骨和肌肉，从药理学上讲，气管和支气管的反应方式相同[11]。

该拮抗剂可用于检测自发收缩或痉挛原引起的收缩，其中痉挛通常由标准激动剂如组胺引起，并在浴液中加入拮抗剂以引起放松[3.]。

本研究旨在研究山羊气管链制剂是否适合用于痉挛性原引起的气管肌肉收缩拮抗剂的测定。支气管扩张剂的活动。

方法

从屠宰场新鲜宰杀的山羊身上采集山羊气管，并立即转移到装有冷克雷布斯汉斯莱特溶液(40℃)的恒温瓶中。气管保存在冰箱中40℃的Krebs’s Hansleit溶液中，直到第二天使用。

山羊气管在软骨节段之间横切，形成若干环状气管肌。有小软骨末端的平滑肌部分与环的其余部分分离。气管肌的一端连接到组织支架和通气管的弯曲部分，另一端连接到烟熏鼓上的杠杆，以便将组织悬浮在含有Kreb’s Hansleit溶液的40毫升器官浴中，温度为370℃，并加入氧气(95%)和二氧化碳(5%)的混合物。杠杆上的载荷为0.5gm。允许30分钟的预备时间以稳定准备工作。

kymograph以0.1 cm/min的速度移动。在烟熏圆筒上记录基线5分钟，第5分钟结束时加入0.1ml激动剂组胺，使其起作用5分钟。5分钟后停止记录，用新鲜的Kreb’s Hansleit溶液清洗组织，必要时清洗3-4次。15minutes cycles were followed including 5 minutes for the recovery of the tissue .A series of dose related responses with different doses of histamine were obtained till the ceiling dose was obtained. Varying doses of theophylline anhydrous which was prepared by dissolving in warm distilled water were added to the bath and allowed to act for 3 minutes. The response to the sub maximal dose of histamine was noted in the presence of theophylline anhydrous solution.The heights of contraction due to histamine before and after each addition of theophylline were measured and tabulated. Percentage reduction in the height of the contraction was calculated.

结果

在0.1 ~ 6.4 μg/ml浓度范围内，离体山羊气管肌对组胺有明显的收缩作用。在无水茶碱溶液和无水茶碱溶液下绘制组胺剂量反应曲线。观察到无水茶碱(5X10-3)溶液使用拮抗组胺诱导的收缩反应显著(p<0.001)(表1）

讨论

山羊气管肌肉制剂是研究激动剂和拮抗剂的理想制剂，可以轻松制备，也更敏感，尽管A.K.Nagchaudhuri使用的浓度略高[4]。研究发现，这些制剂在8-10小时内效果一致[11组胺诱导收缩的抑制作用与加入浴液的茶碱溶液的对数浓度呈线性相关，这也在Dinesh K等人的研究中观察到[2]。研究发现，在雨季组织的响应不一致，而其他季节有利于进行实验。

一种药物对细支气管和大支气管或气管的作用可能不同。现有证据表明，气管和大支气管对药物的反应非常相似，因为气管和支气管肌肉之间存在密切的解剖学和生理学联系[11]。

关于组胺和茶碱之间的拮抗类型，它是非特异性的，不一定涉及受体占用，可能发生在药物受体相互作用到效应系统产生反应的任何步骤[9]。

本研究使用经证实具有支气管扩张剂活性的药物进行，以证明山羊气管制剂具有一致和可靠的反应。该制剂可用于筛选多种植物提取物或类似产品，以评估支气管扩张剂活性[1，2]。值得注意的是，山羊气管非常容易获得，人们可以避免牺牲大量实验动物来评估具有支气管扩张剂性质的物质。在禁止实验动物解剖和迫切需要适应动物实验的替代方法的情况下，这项研究为使用一种廉价、简单的方法进行药物筛选提供了一种见解。

参考文献

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