e-ISSN: 2321 - 6190 p-ISSN: 2347 - 2294
卡鲁Pilaini Karuppaiah1*,Uthandakalai拉梅什2
1微生物学和寄生虫学、研发中心、泰米尔纳德邦,印度
收到:14 - 3月- 2022年手稿。生理- 22 - 57106;编辑分配:16 - 3月- 2022年前质量控制。生理- 22 - 57106 (PQ);综述:30 - mar - 2022,质量控制。生理- 22 - 57106;修改后的:1 - 4月- 2022年,手稿。生理- 22 - 57106 (R);发表:8 - 4月- 2022、2321 - 6190.10.3.005 DOI: 10.4172 /。
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在本研究目的是调查的水质数据和重金属分析结果Vaigai河流利用多元统计分析方法。样本收集来自不同网站Vaigai河和分析水平的重金属如Cd、铬、铜、铁、铅、镍、锌。还血液参数如红细胞,白细胞,PCV, HB,血小板、MCV、妇幼保健、MCHC,酶和肌萎缩性侧索硬化症一样,ATL, CK, TP分析了淡水鱼类鲤鱼毛虫。组织学研究显示肾脏的形态变化,肝、心、肠和贻贝。影响重金属,农药和工业废弃物,在鲤鱼各异常生理变化正常字符。
重金属;污染物;原子吸收光谱法;Histologica
重金属污染在世界上许多河流系统是一种常见的环境问题由于人口快速增长,工业化和经济发展1- - - - - -3]。金属进入水生系统的主要天然来源是土壤和岩石的风化和人为活动,即工业和城市废物排入水体(4- - - - - -6]。这些金属是持久的,一旦释放长期环境(7,8]。这些是众所周知的重金属污染物,常常遇到许多池塘、湖泊、河流和水坝的印度和最重要的水生动物受到这些重金属造成的压力9]。的进入市政,工业和农业废物进入环境是环境污染人类的另一种方式。水资源是最重要的资源之一。水资源的重要性,尤其是地表水(河流)。添加有害物质进入水体造成身体的变化,水生系统的化学和生物学特性导致生态失衡。工业废水造成很多水污染形成威胁水生植物和动物(10]。
鱼类的血液研究认为更加重要,因为这些参数被用作一种有效的和敏感指数监测的生理和病理变化等自然或人为因素引起的细菌或真菌感染或污染水资源11]。血液参数因此被认为是一个有用的工具诊断身体的功能状态,以应对各种压力(12,13]。鱼的毒物是压力积累通过食物链或一般的身体表面吸收,严重影响生命支持系统在分子和生化水平。污染物通常产生相对快速的改变鱼的血液特征(14]。酶活性被认为是敏感和高山)和血液学的参数Chrysichthys生化指标之前发生在危险的影响nigrodigtatus和Phthonichthys macrurus。鱼和重要参数测试用水毒物的存在。农业、工业和国内废水通常包含各种各样的有机和无机污染物,如溶剂、油、重金属、农药、化肥和悬浮物,总是,排入小河流和小溪,没有适当的治疗。污染物变化等水质和鱼可能会导致许多问题,如疾病和结构性变化(15]。组织病理学变化已经被广泛用作生物标记的评估鱼暴露于污染物的健康,在实验室和现场研究,但是据我们所知,很少或没有的信息可以在硫丹在haemato-immunological和组织病理学反应的影响c . puncatus。考虑这种鱼类从商业的重要性以及保护的角度来看,本研究进行了阐明污染物暴露的影响在haemato免疫学改变参数和组织病理学变化c各。
分析重金属的vaigai河水样品
样本收集:水样收集来自4个不同站点Vaigai河样本中收集螺钉封顶高密度前消毒聚丙烯瓶,每个1 lt能力,妥善标记和分析在实验室的微量金属原子吸收光谱仪(AAS)
水样的准备:一升的水收集样本首先集中在桑迪烤箱在80°C,直到体积达到50毫升。4毫升浓硫酸(默克公司98%)被添加到每个样本和消化挖掘达尔器3分钟。10毫升过氧化氢(默克公司30%)然后添加和加热直到氧化完成。冷却后,每个样品过滤的过滤器(绘画纸过滤默克,0.45米),滤液被妖魔化稀释水最后一卷50毫升。
样品分析:由岛津制作所准备的样本分析原子吸收光谱法(7000年模型分析)来确定金属。
分析Vaigai河鱼类血液学、生化参数鲤鱼各
样本收集:鲤鱼各鱼类收集(男性和女性)获得Vaigai河流(排除环境影响研究)permonson以及季风研究后期4中不同站点(Annai帕蒂,Solavanthan Arapalayam,安娜Nagar)。鱼(鲤鱼各)的重量25 g±500 g和平均总长度5±30厘米。鱼在水中被运到实验室获得类潮湿的。鱼的水的进一步分析被用来当作麻醉剂。
收集血液样本(2毫升)鲤鱼各在EDTA涂布容器(BD公司)。此外,血液参数分析的帮助下血液学半自动分析仪(Eraba)。其他一些血液样本被收集和左凝结前15 - 20分钟在4°C离心20分钟在3000 rpm分离血清。新鲜血清进行生化分析。总蛋白(g / 100毫升)含量和总脂质(g / l)内容确定calorimetrically使用阿勒尔诊断公司提供的分析工具。活动的天冬氨酸转氨酶(AST, U / I)和丙氨酸氨基转移酶(ALT, U / I)测定calorimetrically使用分析工具(Agapai诊断)据莱特曼和Frankel方法(1957)。PCV的血样测定血液参数,Hb, TEC、TLC和ESR方法被Blaxhall和Daisley (1973) (图1)。
组织程序
石蜡切片方法和技术:测试微生物的活标本c各收集从Vaigai河马杜赖。实验鱼的平均长度和重量是33.71±1.34和99.58 g±20.74厘米。在实验室实验用玻璃水族馆(40××27日26立方厘米)他们从每组随机选择,立即牺牲将通过大脑和组织样本如肾脏,肝脏和小肠收集从解剖鱼。当鱼给垂死的条件,他们立即删除组织学检查。组织在生理盐水清洗和保存在塑料小瓶与Bouin流体至少18个小时。样品(肝脏、肾脏和肠道)然后脱水,嵌在石蜡中。分段嵌入块切片机(6μ)的机器。固定和准备幻灯片保存了一个晚上。然后被苏木精和伊红染色的部分,然后安装后复合显微镜下检查。
酸消化法原子吸收光谱法分析样品
准备的样本分析了原子吸收光谱法(7000年模型分析)来确定金属。
原子吸收光谱(AAS):方法符合比尔定律,吸光度的州是直接比较集中每个原子吸收分光光度计的光的基础上如灯,样品室,单色,探测器和输出机制。原子吸收分光光度计的图表是肯定的,主要是常见的一种燃烧器是预混料,介绍了喷雾成压缩腔大耗尽的删除。
分析vaigai河鱼类血液学、生化参数鲤鱼各
样本收集:鲤鱼各20收集鱼类(男性和女性)实验鱼的平均长度和重量20.74±1.34厘米和33.71 g±99.58获得Vaigai河流(排除环境影响研究)permonson以及季风研究后期4中不同站点(Annai帕蒂,Solavanthan Arapalayam,安娜Nagar)。实验室在水里的鱼都兴高采烈的从潮湿的类。鱼的水的进一步分析中使用止痛的代理。
收集血液样本(2毫升)鲤鱼各在EDTA涂布容器(BD公司)。此外,血液参数分析的帮助下血液学半自动分析仪(Eraba)。在样例。
量进一步血液样本的收集和凝结了15 - 20分钟在4°C centrige之前在3000 rpm将血清20分钟。的新鲜血清生化检查。总蛋白(g / 100毫升)满意和肌酸激酶(g / l)内容determin生化半自动分析仪(Eraba)(使用AlereDignostics提供的分析工具。行动的丙氨酸氨基转移酶(ALT, U / I)和天冬氨酸Aminootransferase (AST, U / I) determin calorimetrically使用分析工具(Agapai诊断)。
定量测定天冬氨酸Amino-Transferase (AST)试管
原则的方法:天冬氨酸Amino-Transferase (AST)以前称为谷氨酸草酰乙酸(有)催化作用可逆传输α-ketoglutarate天冬氨酸的氨基。oxalacetate创建的苹果酸被decrse (MDH)和NADH:负责减少NADH的浓度,计算光度学的,是比较催化AST浓度的样品。
临床意义:AST是细胞酶,是起源于至上浓度的细胞在肝脏,心脏肌肉,在少量其他编织和憔悴的肌肉细胞。尽管在血清AST升高不是特定的肝脏疾病,大多是使用诊断和确认的教训这种疾病通过进一步酶如高山和ALT。
也是使用组织患者心肌梗死后,骨骼肌疾病和其他。临床诊断不应该准备在一个测试结果;它应进一步结合临床和实验室数据。
定量测定丙氨酸Amino-Transferase GPT (ALT)试管
原则的方法:谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)丙氨酸Amino-Tranferase (ALT)催化的丙氨酸氨基上反向传输α-ketoglutarate形成谷氨酸和piruvate。
私营生产减少LDH和NADH
准备:丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)检查与摄政带20µl血清样品添加1000µl(准备试剂在4:1比例摄政2 200年µl和摄政1 800年µl)即将读分析仪结果(动力学方法)。
总蛋白(TP)测定1000年带100µl血清样本添加µl摄政孵化后10分钟阅读样本分析仪得到结果(终点方法)。
肌酸激酶(CK)测定带100µl血清样本添加(1:1比例制备试剂摄政1 500年µl和摄政2 500年µl)孵化后15分钟阅读样本分析仪得到结果(固定时间)。根据雷特曼和弗兰克尔法血液参数的血液样本测定Hb, PCV, ESR、TEC,薄层色谱方法。
组织程序:组织学研究污染物中进行协助建立基本协会报道和各种生物反应组织学调查已被证明是一种感知工具直接作用靶器官内的重金属和农药的鱼在实验室实验。这个实验将查清的组织学影响鲤鱼各肝脏和肾脏。Arapallayam和安娜Nagar网站鱼苯坐卡因然后牺牲下颈椎部分。部分肝切除,用生理盐水冲洗干净更石蜡方法部分。
血液和生化试验分析:实验是在4个不同网站premonsoon段,结果红血特征haematocrite (PCV)(26.20±1.06%)、血红蛋白(Hb) (8.57±0.14 (mg / dl),白细胞(白细胞)(15300.00±355.90(103µl),红细胞(红血球)(2.12±0.49(106µl)”(192.20±4.16 (g / dl)妇幼保健28.01±2.36 (g / dl)、MCHC (24.881±2.05 (g / dl)。的值显示,总蛋白质的比例鲤鱼各之间(3.9±0.1 mg / dl)、碱性磷酸酶(ALP),范围在75±18 U / L,肌酸激酶(CK) 1258±500 U / L。4个不同网站的总蛋白质季风期,结果红血特征haematocrite (PCV)(22.79±1.04%)、血红蛋白(Hb) (7.22±0.14 (mg / dl),白细胞的价值(白细胞)(9387.93±164.533(103µl),红细胞(红血球)(2.00±0.2(106µl)”(156.31±4.74 (g / dl)妇幼保健25.00±2.7 (g / dl)、MCHC (27.13±1.73 (g / dl)。的值显示,总蛋白质的比例鲤鱼各之间(3.3±0.1 (g / dl)、天冬氨酸转氨酶(AST) (61±15 U / L)碱性磷酸酶(ALP)之间75±18 U / L,肌酸激酶(CK) 1258±500 U / L。
4不同站点控制时期的总蛋白,结果血红的特点是包装细胞体积(PCV)(28.06±0.84%)、血红蛋白(Hb) (9.16±0.75 (mg / dl),白细胞(白细胞)(9510.410±300.1453(103µl),红细胞(红血球)(3.42±0.47(106µl) MCV(233.60±2.20)妇幼保健(27.13±1.73 (g / dl)、MCHC (24.90±1.42 (g / dl)。的值显示,总蛋白质的比例鲤鱼各之间(3.9±0.1 (g / dl)天冬氨酸转氨酶(AST) 75±22 U / L,碱性磷酸酶(ALP)之间(2.1±0.1 g / dl)肌酸激酶(CK) 1258±500 U / L的值。生化参数1和2的四个不同的地点,(Annaipatti Solavanthan)是相同的,但网站3和4 (Arapalayam,安娜Nagar)显示不同的变体与血液参数。鱼非常不同的生化参数从一个物种内的花药和个人根据性别、年龄、大气和时期。生化参数的差异的鱼饲料摄入量密切相关,游泳和旅行与产卵性修改的关系。
组织学参数
肝:鱼的肝脏出现,肝脏的解释附件控制许多生活功能和在鱼类生理学中起着重要的作用,无论是在合成代谢(蛋白质、脂类和碳水化合物)和分解代谢(氮、肝糖分解和解毒作用等)。在广泛,肝脏是目的四肢宣传其伟大的血液提供导致明显的毒物经验和收集,其权限功能和显著的代谢能力鱼类是一种罕见的肝位于茂密的器官。它的形状和大小,体积修改为打破的陪同下访问其他本能的器官(食道、胃、脾和肠)。鱼肝脏通常是红棕色,因为它富有血管化处理对黄、脂肪存储后升高。光学显微镜暴露了肝脏结构鲤鱼各是平行的,额外的硬骨鱼。大多数的肝实质细胞获得一种多边形圆形的细胞核和细胞质颗粒。在细胞中分布不规律的正弦船只,泪小管和更大的船只,以及胆管。在一些人,成纤维细胞也经验在肝细胞中。在肝实质,是潜在的检查外分泌胰腺,经常接近血管和导管。多边形细胞外分泌胰腺完整的考勤与一个著名的重要核和排放颗粒在细胞质中。
铬
铬的值从0.04到31毫克/ l。最低数量的铬(0.04 mg / l)是记录在Annaipatti抽样单位。钙是增加采样点的值安娜Nagar(31毫克/升)最大。在采样点Solavathan铬的最大数量是记录为(0.0397 mg / l)。
钴
钴的价值从0.0341到0.0199 mg / l。最低数量的钴(0.0199 mg / l)在抽样单位安娜Nagar记录。钴的价值增加采样点Solavathan最大(0.0623 mg / l)。在采样点Annaipatti钴被记录的最大数量(0.0341 mg / l)。
铜
铜的最小值(0.0215 mg / l)是记录在Annaipatti采样点。铜的最大值(0.0942 mg / l) solavanthan记录。在采样点Aarappalayam,安娜Nagar铜值从0.0985到0.3568 mg / l。
铁
铁的最少(0.2057 mg / l)被记录在安娜·纳加尔Aarappalayam,铁的最大值是记录为0.4654 mg / l Solavanthan采样点。Annaipatti采样点的值铁被从0.2087到0.3592 mg / l。
镁
镁的值介于3.0304 mg / l之间0.1238 mg / l。镁被记录的最大值(1.7108 mg / l) solavanthan采样点。镁被记录的最小值(0.3238 mg / l)采样点安娜·纳加尔Arapalayam。镁的含量增加Annaipatti (5.9649 mg / l)。
血液分析
实验是在4个不同的网站进行Premonsoonperiod,结果红血特征haematocrite (PCV)(26.20±1.06%)、血红蛋白(Hb) (8.57±0.14 (mg / dl),白细胞(白细胞)(15300.00±355.90(103µl),红细胞(红血球)(2.12±0.49(106µl)”(192.20±4.16 (g / dl)妇幼保健28.01±2.36 (g / dl)、MCHC (24.881±2.05 (g / dl)。的值显示,总蛋白质的比例鲤鱼各之间(3.9±0.1 mg / dl)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)之间75±18 U / L,肌酸激酶(CK) 1258±500 U / L。
4个不同网站的总蛋白质季风期,结果红血特征haematocrite (PCV)(22.79±1.04%)、血红蛋白(Hb) (7.22±0.14 (mg / dl),白细胞(白细胞)(9387.93±164.533(103µl),红细胞(红血球)(2.00±0.2(106µl)”(156.31±4.74 (g / dl)妇幼保健25.00±2.7 (g / dl)、MCHC (27.13±1.73 (g / dl)。的值显示,总蛋白质的比例鲤鱼各之间(3.3±0.1 (g / dl)、天冬氨酸转氨酶(AST) (61±15 U / L)碱性磷酸酶(ALP)之间75±18 U / L,肌酸激酶(CK) 1258±500 U / L。4个不同网站的总蛋白质控制时期,结果红血特征haematocrite (PCV)(28.06±0.84%)、血红蛋白(Hb) (9.16±0.75 (mg / dl),白细胞(白细胞)(9510.410±300.1453(103µl),红细胞(红血球)(3.42±0.47(106µl) MCV(233.60±2.20)妇幼保健(27.13±1.73 (g / dl)、MCHC (24.90±1.42 (g / dl)。的值显示,总蛋白质的比例鲤鱼各之间(3.9±0.1 (g / dl)天冬氨酸转氨酶(AST) 75±22 U / L,碱性磷酸酶(ALP)之间(2.1±0.1 g / dl)肌酸激酶(CK) 1258±500 U / L的值。生化参数1和2,4个不同的地点(Annaipatti Solavanthan)是相同的,但网站3和4 (Arapalayam,安娜Nagar)显示不同的变化与血液参数。鱼的生化参数变化很大从一个物种内花药和个人根据年龄、性别、环境和季节。生化参数的变异鱼饲料摄入量密切相关,迁徙游泳和性的变化与产卵。
组织病理学的肠
鱼的肠道中的组织学改变奴役在4网站Vaigai河(详细显示无花果)。最常见的重金属被认为是发现,肠道是相对较短,通常在一个倍半鱼的身体的长度。它通常有许多幽门盲,小pouch-like结构沿其长度,有助于增加的总表面积消化食物的器官。没有ileocaecal阀硬骨鱼,小肠和直肠之间的界限被消化的结束标志着只上皮肠影响重金属的长度和面积大小变化的消化问题。
肾脏的组织病理学
改变发现肾脏肾小球中发现的最重要的改变鲤鱼各肾脏肾小球扩张,导致减少肾小球空间。小管,最常见的变化是:混浊肿胀,阻塞管腔和透明滴变性。
肝脏组织病理学
主要改变肝细胞形状不规则的细胞核,核肥大、nuclearvacillation和嗜酸性颗粒在细胞质中。胆汁停滞被确认为棕黄色颗粒在细胞质中。细胞质和核变性也是很常见的melanomacrophages被确定为圆形骨料的细胞包含dark-yellowish不同大小的颗粒,通常靠近血管。大部分的变化中发现笼子里的动物的肝脏属于组织略太中度受损,和休养仍然是可能的,如果水质改善。
重金属污染是一个主要的问题Vaigai河,马杜赖。在目前的研究中浓度的铬、铜、Co和铁、锰高于安全价值表明,河Vaigai研究重金属污染,可能在这河的生态系统产生不利影响。的血液和生化参数的变化鲤鱼各这些参数的变化可以提供早期预警信号测定重金属和农药水生系统的影响。本研究的发现也提供一个更好地了解水生毒理学端点的污染物和确定安全水平的这些化学物质在水生环境和保护水生居民。组织学的季节性变化参数的分析得出的结论的变化观察到的三个器官必须强调组织病理学能够评估早期的影响。
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