研究与评论在药学和制药雷竞技苹果下载科学
菜单e-ISSN: 2320 - 1215 p-ISSN: 2322 - 0112
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2实验室的动物生理学、科学教师,阿宝。箱:812年,喀麦隆雅温得我大学
收到日期:12/01/2018;接受日期:01/02/2018;发表日期:05/02/2018
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我们评估水提物的毒性d glomerata老鼠。在男性纯种老鼠的急性毒性测试,得到不同剂量口服;对照组收到水。在反复给药毒性试验,提取或日常管理男性和女性Wistar鼠(每组3)剂量的100,200和400毫克/公斤/天/ 28天。他们的行为、死亡率、体重变化、实验室测试、器官和组织病理学进行评估。没有老鼠死在测试。血液生化检查显示一些变化,男性和女性之间有所不同;组织病理学评价显示无显著变化。在急性毒性,单一口服2000毫克/公斤d glomerata引起毒性症状和死亡率和LD50估计> 5000毫克/公斤。subchronic口服毒性,D glomerata诱导没有显性毒性治疗期间和治疗后的迹象。 Only a delayed decrease of relative spleen weight in males at the highest dose of 400 mg/kg occurred. High density lipoprotein (HDL) increased significantly in males at 200 mg/kg. Non-persistent increases in alanine aminotransferase activity within normal ranges were noted at all doses in males and females. In animals, D. glomerata has no variation of white blood cells. Aqueous extract of D glomerata caused no toxicity in rats at the smallest dose evaluated (100 mg/kg). No other species was evaluated.
毒理学、d . glomerata、急性毒性、亚急性毒性,纯种老鼠
D glomerata西方喀麦隆也被称为“Tek兔子”。d . glomerata种子是广泛应用于制药和食品补药,a。药理研究表明,除了已知的影响,体内镇痛和抗炎特性(1,2],phytochemestry多酚类黄酮的存在显示Atsang et al .,这些观察导致专利申请的申请和测试的急性和subchronic水提物的毒性,包括血液学分析,生物化学,和各种动物器官的组织病理学。
准备的提取
动物
46 Wistar鼠动物屋的每个性得到部门的动物生物学和生理学、喀麦隆雅温得我大学。他们被安置在群5 /笼子,在实验室条件下(天然光/暗周期,22日至25日°C),并免费获得水和标准商业饮食实验室动物。
所有实验进行的这项研究是良好实验室规范的按照如上所述的授权使用实验动物(Reg。N°FWAIRD 0001954)来自喀麦隆国家伦理委员会。在实验之前,动物禁食16小时,但可以免费获得水。
所有的程序都是严格按照“实验动物保健和使用指南”,保持温度控制(22±2°C)和12 h光/暗周期控制。
急性毒理学评价(LD50)
口服急性毒性测试都使用了急性毒性类方法(ATC)根据经济合作与发展组织(OECD) 423年准则采用(3]。老鼠被分成3实验6组动物,形成两个治疗组和一个对照组。单剂口服治疗组收到了(或者,填喂法)(2 g /千克和5克/千克;急性管理)。这两个对照组收到水(或)。
动物后立即观察政府然后每天14天,1承压圣7th,14th的一天。在实验的最后,他们安乐死,肾脏,心脏,肝脏和肺被移除和权衡,评估可能的宏观变化或异常。
28天Sub-Chronic研究
重复剂量的确定28天口服毒性进行了根据407年经合组织的准则,采用2008年10月3日(4]。雄性和雌性大鼠体重和按性别分成组。他们被分成对照组和三个测试组10动物,和维护组5在标记聚丙烯的笼子里。
每只动物收到日报》一段28天,政府在剂量的水(对照组)100年,200和400毫克/公斤(或者,填喂法)。每天观察动物的行为,他们每周称重。经过28天的治疗,动物被提交给开放田地测试。实验结束时(28天),动物安乐死,他们的血液收集血液和生化分析。
开放田地测试
开放田地测试之后Otobone描述的方法等。5]。开放领域活动测量有机玻璃笼子里(高度:17厘米,长度:30厘米;宽度:30厘米),黑色的地板用白线在10厘米2地区。动物被随机分成五组动物。
一个小时后治疗d . glomerata每个老鼠都放置在舞台的中心,它的移动(外围和中心区域),静止时间、饲养、梳理和排便都记录了5分钟。网格线交叉的数量在5分钟内后双脚是移动的算作一个索引。每次试验后,开放田地装置是用乙醇擦干净(10%)的解决方案。
实验室测试
收集血液样本的一部分在EDTA-coated管用于血液学的分析和另一个在干燥管的分离血清和生化分析。血液样本在干燥管离心机在3500 rpm(15分钟在4°C)和上层清液(血清)收集和引入新管。
甘油三酯、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL),丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆红素、肌酐和总蛋白测定使用从堡垒诊断试剂盒(英国Muckamore)有限。低密度脂蛋白是使用Friedewald公式计算。血液学的分析、白细胞计数、淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、红细胞(RBC)计数、红细胞比容(Ht)、血红蛋白(Hb)、分析器从大学医院中心在喀麦隆。
组织病理学分析
组织病理学分析随机选择10日在每个实验组大鼠,总计80只动物。动物解剖的使用在文献中描述的程序(6]。心脏、肾脏、肝脏和肺部都收获进行分析。
组织neutral-buffered保存在10%福尔马林,嵌入在石蜡,脾约5毫米,苏木精和伊红染色,光学显微镜检查。
统计分析
统计分析治疗组与阴性对照组相比,使用STATISTICA程序(版本5.0)。数据的平均数±标准差。我们应用单向方差分析(方差分析)毒理学测试(急性和subchronic)。
急性毒性评价
急性测试d . glomerata没有死亡的人口在剂量的2和5克/公斤没有幸存的动物被观察到的行为的变化超过14天时间的实验。
动物显示,体重无显著差异之间的控制和治疗组。同样,宏观分析的器官并没有发现变化。
28天subchronic研究
动物的体重和器官重量的进化
没有动物死于治疗28天。然而,减少体重的男性接受100,200和400毫克/公斤。
开放田地测试
结果表明在运动和显著增加;饲养的男性治疗剂量的2和5克/公斤。,女性治疗组d . glomerata还显示显著增加,运动,(表1)。
| 动物 | 剂量 | N | |
|---|---|---|---|
| 控制(毫升/公斤) | 3 | 10 | 80±2 |
| D glomerata(毫克/公斤) | 3 | 2000年 | 116±4 * |
| 5000年 | 130±3 * |
值表示为±SEM。每组(n = 3。数据分析使用一维方差分析Dunnett事后测试紧随其后。* P < 0.05。相比之下,控制。
表1:总群的组织病理学分类。
实验室测试
血白细胞明显增加雄性的剂量100毫克/公斤(11.85±0.2),男性只有在一个剂量400毫克/公斤(12.1±0.6),与对照组相比(.6.5±1.3)(表2)。血的生化参数显示,雄性和雌性都没有显著变化在所有三个剂量,与对照组相比。
| 男性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|
| 控制 | 剂量(毫克/公斤) | ||||
| One hundred. | 200年 | 400年 | 卫星 | ||
| 白细胞(10 3 /μL) | 6、50±0,27岁 | 11、83±0、25 * * | 5、43±0 32 | 12、10±0,49 * * | 70±0,51 * * |
| 加拿大皇家银行10 3 /μL | 86±0,28 | 4,77±0,55 | 5、7±0,91 | 3、84年61±0 | 4、18±0,18岁 |
| Heamoglobin (g / dL) | 12、16±0,42 | 12、20±0,58岁 | 93±0,44岁 | 12日,52±0,27岁 | 12日00±0,11 |
| 小匾103 /μL | 355、66±0 51 | 268年,33±0,25 * * | 400年,33±0,25 * * | 441年,33±0,25 * * | 265、66±0、25 * * |
均值±SEM (n = 5) * p < 0.05;* * p < 0.01与对照组。
对照组收到0.5毫升生理盐溶液
表2:提取对血液学的参数的控制和治疗大鼠subchronic毒性研究。
对待女性的所有组中的生化值发生了变化检测总胆固醇(60.5±1.82;51.69±1.3;45.88±1.0)和甘油三酯(147.84±1,51;123.79±1.45;127±1。65);这些治疗的剂量100毫克/公斤(134.5±10.2)和300毫克/公斤(138.4±12.7)(表2)。
组织病理学分析
生活的宏观分析对照组和群100毫克/公斤没有显示任何异常,证明他们的微观评价。肝脏组织病理学分析200和400毫克/公斤显示炎症和白细胞浸润(图1和2)。
图1:肾脏组织病理学。
图2:肝脏组织病理学。
Dichrostachys glomerata是一个家庭Mimosaceae陆地herbaceaous工厂。它是传统命名为“Oreille德对牛群”在法国。植物有多个传统的使用包括风湿和蛇咬伤(7]。这种植物已经被证明有抗病毒,anti-infectious, antihypoglycemiant [8)和cicatrising效应(9]。它也被运用于一些人口,以防止性传播疾病(10]。
本研究调查了急性和亚急性毒性的可能性D glomerata。急性毒性试验(LD50),尽管一群动物治疗剂量的2 g /千克和5克/公斤体重没有变化。反复给药毒性试验动物进行治疗28天的d . glomerata靶器官提供结果。28天subchronic对待测试,必须规定一系列的实验室检查,需要足够数量的血液来执行。
食品消费并不确定。在开放田地测试中,动物的运动活动可能表明一种兴奋剂或镇静药物的活性。观察增加运动可能表明动物刺激(11,12]。
一个有趣的方面是缺乏明显的刺激男性最低的剂量,2和5克/公斤,因为开放田地试验为男女提供了相同的环境条件。因此,所有女性运动的显著变化的治疗,包括在最低剂量,可能与更大的倾向的女性对中枢神经系统的刺激。
这些生物化学变化发生在男性,尽管水平保持在正常范围内,他们可能表明肝脏的变化。然而,这可能应该考虑肝脏改变的证据与谨慎,因为器官的组织病理学分析血清总胆红素水平也显示与对照组没有显著的变化。可以评估肾脏功能障碍并发测量肌酐。雄性和雌性的肌酐水平保持正常(13,14),减少肾脏问题的可能性。
加强这些数据,组织病理学分析肾脏器官并没有发现异常。肝功能的生化证据显示,两组动物的相当大的变化,虽然这些在雄性比雌性更重要。器官的组织病理学评价没有显示白细胞的浸润。基于这些结果,我们可以得出结论,经过28天的治疗,动物显示生化变化表明肝脏是可能的毒性的靶器官,以防d . glomerata尤其是动物,在剂量的100、200和400毫克/公斤。研究结果还表明生物易感性可能更大。
水提物的D glomerata在老鼠没有造成毒性最小的剂量评估(100毫克/公斤)。没有其他物种评估。
作者宣称没有利益冲突。