研究和评论:药理学和毒雷竞技苹果下载理学研究杂志》上。
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1萨拉热窝大学化学系,71000年萨拉热窝,波斯尼亚和黑塞哥维那
2萨拉热窝大学Pharmacoinformatics和药物经济学,71000年萨拉热窝,波斯尼亚和黑塞哥维那
3机构药品和医疗器械的波斯尼亚和黑塞哥维那,控制实验室,71000年萨拉热窝,波斯尼亚和黑塞哥维那
4开发和注册、Bosnalijek 71 000年萨拉热窝,波斯尼亚和黑塞哥维那
5部门分析化学奥地利格拉茨,卡尔·弗兰岑大学,8010
收到日期:2017年5月29日;接受日期:09年6月,2017;发表日期:2017年6月16日
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麻黄是植物药用历史悠久,主要的适应症是哮喘、鼻炎和支气管痉挛。然而,如今这对减肥经常被误用或滥用,性能增强和兴奋剂。pharamcological效应被归结为麻黄素生物碱在植物。这项研究的目的是量化Norephedrine (NE),麻黄素(E)、(PE)甲麻黄碱和伪麻黄碱(我)在九个不同的草药提取物麻黄属植物物种使用高效液相色谱法与紫外检测(HPLC-UV)。的生物碱分离的C18柱对称(5µm, 3.9×150毫米)。流动相是在1毫升/分钟的流量。流动相是准备与乙腈的390毫升,610毫升的纯净水,0.8毫升o-phosphoric酸和月桂醇硫酸酯钠盐4.8克。紫外探测器在208海里。我们发现利用HPLC-UV麻黄素生物碱的分离和量化方法非常有选择性,敏感的和简单的。NE、E的总含量、PE和我范围从0.4毫克/克干重(麻黄foeminea,从奥地利)71.9毫克/克干重(麻黄专业,从摩洛哥)。所有的调查中被发现含有生物碱麻黄altissima。
麻黄属植物物种,草,HPLC-UV麻黄素生物碱
使用草药和植物营养素或保健品继续快速扩张在世界各地很多人求助于这些产品用于治疗各种不同国家医疗卫生挑战设置(1]。麻黄然而,被用于5000年来中医治疗哮喘、咳嗽、感冒和温和形式的支气管痉挛。在上个世纪,麻黄成为一个非常受欢迎的植物,对其提取物被用作中枢神经系统(CNS)兴奋剂,情绪增强剂以及膳食补充剂在各种健康食品在西方国家(2),声称对减肥有效或能源助推器。在传统和最近流行的用途,药理作用主要归功于六ephedrine-type生物碱(3]。虽然e .中央研究院麻黄素生物碱的主要来源,其他物种的麻黄属植物在欧亚大陆含有有效成分:大肠equisetina,e .媒介物,大肠gerardiana,大肠alata,大肠distachya,大肠botschantzevii,大肠fragilis,大肠主要,大肠minuta,大肠monosperma,大肠pachyclada,大肠likiangensis,大肠saxatilis,大肠lomatolepis,大肠lepidosperma,大肠przewalskii和大肠regeliana(4]。的药理研究表明,麻黄素生物碱是交感神经,α-和β-adrenergic绑定受体(5,6]。一般认为草药补救措施或药物非常安全,没有副作用不仅是不真实的,但同时也具有误导性。草药已被证明能够生产各种不良或不良反应的能力造成严重伤害,威胁生命的条件,甚至死亡7]。ephedrine-containing膳食补充剂的误用或滥用导致了各种各样的负面影响。不利影响的假设与冠状动脉收缩,血管痉挛,缩短心脏耐火时间允许可重入的心律失常,高血压全身的蛛网膜下腔出血、脑动脉血管收缩和全身的拟交感的血小板激活(8]。因此,美国和许多西方国家实施法规或禁止销售自1994年以来ephedrine-containing膳食补充剂。几个案例报告也证实了有关使用麻黄和Ephedra-containing膳食补充剂不良肝毒性等事件(9,10),和短暂的失明11]。因为健康和法律含义与含有麻黄素生物碱的使用,是理想的色谱方法,可以准确、量化地E和PE在植物产品和膳食补充。麻黄素生物碱的分析存在许多挑战。所有6麻黄素生物碱结构非常相似。他们非常亲水胺化合物,可怜的保留传统的反相高效液相色谱法(HPLC)系统。其基本性质往往会导致过于宽泛的峰值和峰值跟踪在色谱系统中。最后,他们有可怜的紫外吸收约210纳米以上(12]。已经使用了各种方法的量化麻黄素生物碱存在于一些麻黄属植物物种:天然气色谱法与质量光谱法检测(gc - ms)、毛细管电泳(CE), HPLC-UV [13]。在我们的工作我们使用HPLC-UV分离和量化NE、E、PE和我不同的草药麻黄属植物sp。
植物材料
地上部分干不同的麻黄属植物物种被用来确定NE的内容,HPLC-UV E、PE和我的
麻黄distachya无性系种群。helvetica c.a最大经济产量。Asch。& Graebn。奥地利(维也纳大学的植物园,金额数字:XX-0-WU-EPH130012,花园参考号22015)。
麻黄fragilisDesf。奥地利(维也纳大学的植物园,金额数字:XX-0-WU-EPH130013,花园参考号码22102;德国汉堡大学的植物园,被Finckhi施陶丁格,花园参考人数:500146人,1999;项目生物群摩洛哥01 ll0601a)。
麻黄foemineaForssk。奥地利(维也纳大学的植物园,被我Racz f . Lauria,金额数字:XX-0-WU-EPHE120010,花园参考号码23028;植物园“Jevermovac”教师的生物学,塞尔维亚的贝尔格莱德大学被p .马林花园参考号:BEOU 17072)。
麻黄主要主机(奥地利维也纳大学的植物园,被我Racz f . Lauria,金额数字:XX-0-WU-EPH120009,花园参考号码23026;德国汉堡大学的植物园,被Finckhi Oldeland,花园参考号码不分配,2015年,项目生物群摩洛哥01 ll0601a)。
e .中央研究院Stapf(从中国购买草药商店在伦敦和由合肥Shenlu双钩起重机九华山制药有限公司,中国)。
麻黄monospermaJ.G. Gmel。c.a最大经济产量。奥地利(维也纳大学的植物园,金额数字:XX-0-WU-EPH1300014,花园参考号22104)。
麻黄alataDecne。(德国汉堡大学的植物园,被Finckhi施陶丁格,花园参考号:500392年,2002年,项目生物群摩洛哥01 ll0601a)。
麻黄altissimaDesf。(德国汉堡大学的植物园,被Finckhi施陶丁格,花园参考号:500044年,2001年,项目生物群摩洛哥01 ll0601a)。
麻黄foliata木香。c.a最大经济产量。(德国汉堡大学的植物园;被Finckhi施陶丁格,花园参考号:500882年,2002年,项目生物群摩洛哥01 ll0601a)。
样品制备
提取液由0.716 g月桂醇硫酸酯钠盐,58.2 ml乙腈,119μl磷酸和91毫升水(液相色谱级)。干燥和细接地植物材料(100毫克)悬浮在5毫升的解决方案,允许在室温下站了20分钟,然后用了25分钟。提取离心机,5分钟10000 rpm,上层清液过滤(膜过滤器,0.25μm)和存储在-20°C的分析。
化学物质
Acetonitril Chromasolv®(高效液相色谱)、甲醇(高效液相色谱级),methylepedrine和norephedrine标准从西格玛奥德里奇购买,o-phosphoric酸(85%,年利。)和十二烷基硫酸钠(Ph)欧元从默克公司、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱标准从巴斯夫(BASF)水(Chromasolv®另外,高效液相色谱,西格玛奥德里奇)。
仪器及色谱条件
HPLC-UV分析进行使用和修改参数王et al。组件岛津制作所发表的高效液相色谱系统由泵、真空脱气装置、流动相的储层,一个恒温器autosampler,恒温器列车厢,紫外吸光度探测器在208海里。C-18列(对称C18 100 5μm, 3.9×150毫米,水域,美国)是操作组成的流动相乙腈390毫升,610毫升水,0.8毫升o-phosphoric酸和月桂醇硫酸酯钠盐4.8克。流动相是在1.0毫升/分钟的流量。列温度保持在37°C,注入体积是10μl和运行时间是15分钟。探测器输出记录和色谱分析的软件日本岛津公司Class-VPTM。
标准制剂
盐酸麻黄碱标准(6.74毫克,等于5.53毫克麻黄素标准)在50毫升甲醇溶解。从这个解决方案,10 ml被稀释和甲醇20毫升。Norpehedrine(6, 46个毫克),甲麻黄碱(6.52毫克)和盐酸伪麻黄碱是重(7.31毫克,等于5.99毫克伪麻黄碱标准),准备以同样的方式。
量化的验证
NE的内容,使用peakarea E、PE和我计算的标准。分析物浓度表示为毫克/克干重。保留时间为NE (tR)是9.8分钟,10.4分钟为PE, 11.3分钟对我来说E和12.1分钟。注入量的检测极限(10μl)是4.2 ng NE, 4.8 ng PE、4.7 ng E和5.3 ng。
NE的内容,E, PE和我计算使用峰面积和已知浓度的标准(图1)。这项研究的结果发表在表1。
图1:色谱标准NE (646 ng / 10μl), PE (599 ng / 10μl), E (553 ng / 10μl)和我(652 ng / 10μl)与下面的保留时间,分别为:9.8分钟,10.4分,11.3分,12.1分钟。
| 麻黄属植物sp。 | NE(毫克/克干重) | 体育(毫克/克干重) | E(毫克/克干重) | 我(毫克/克干重) | 总(毫克/克干重):东北+ PE + E +我 |
|---|---|---|---|---|---|
| 麻黄distachya无性系种群。海维提卡(奥地利) | 0.1 | 10.6 | 8.7 | 0.7 | 20.1 |
| 麻黄fragilis(奥地利) | 0.2 | 1.5 | 3.4 | 0.2 | 5.3 |
| 麻黄fragilis(摩洛哥) | 0.2 | / | 0.4 | 0.2 | 0.7 |
| 麻黄foeminea(奥地利) | 0.1 | 0.3 | / | / | 0.4 |
| 麻黄foeminea(塞尔维亚) | 0.1 | 0.5 | 0.1 | / | 0.7 |
| 麻黄主要(奥地利) | 0.1 | 8.8 | 6.9 | 0.8 | 16.5 |
| 麻黄主要(摩洛哥) | 7.3 | / | 63.4 | 1.2 | 71.9 |
| 麻黄(中国) | 0.9 | 16.6 | 28.3 | 3.3 | 49.1 |
| 麻黄monosperma(奥地利) | 0.2 | 7.0 | 2.2 | 0.3 | 9.6 |
| 麻黄alata(摩洛哥) | 0.2 | 1.5 | 6.2 | 1.0 | 8.8 |
| 麻黄foliata(摩洛哥) | 1.5 | / | 14.7 | 0.3 | 16.5 |
| 麻黄altissima(摩洛哥) | 留言。 | ||||
表1:东北的内容、PE、E和我(毫克/克干重表示)的分析麻黄属植物sp。
生物碱在东亚首次确定的内容麻黄属植物物种。在大多数欧亚麻黄素存在麻黄属植物物种,但更丰富的物种在中国(14]。美国的物种被认为是缺乏他们(4]。回顾文献显示不同的内容总生物碱的Ephedrae草的范围0.5 - -49.9毫克/克(15),E和PE账户为70 - 99%。我们的研究表明,大肠主要(摩洛哥)的总含量最高NE、E、PE和我,而不是大肠fragilis和大肠foeminea。在大肠altissima,没有麻黄素生物碱检测,符合文献报道[4]。收集到的物种来自不同的地理区域16]。草的总生物碱含量大肠主要这源于摩洛哥四倍是一样的麻黄属植物sp.来自奥地利。这种差异可能是由于不同生长条件下,土壤特性、降雨量和最有可能由于新鲜的植物材料。我们的结果证实了个体生物碱的相对比例也是变量,E和体育是所有分析的主要生物碱麻黄属植物除了在sp大肠altissima这是缺乏麻黄素生物碱。
定量分析已成为至关重要的和最常见的方法在中药制剂的质量控制和植物地面材料。东北的内容,E, PE和我在九个不同的决定麻黄属植物使用HPLC-UV物种。我们的结果表明,大肠主要(摩洛哥)的总含量最高NE、E、PE和我。麻黄foeminea总生物碱的含量很低,当他们没有发现大肠altissima在所有。个体生物碱的相对比例也是可变的。利用方法被证明是非常敏感的,有选择性的和简单的。它可以是一个有价值的工具在临床和法医毒理学需要快速分析,为减肥和麻黄素经常被误用或滥用兴奋剂。
作者感谢维也纳大学的植物园,植物园的汉堡大学(项目生物群摩洛哥01 ll0601a)和植物园“Jevermovac”,贝尔格莱德大学,请提供和确认本研究的植物材料。
