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验证抗菌功效的精油组合对龋齿病原体

博士Vrushali Pulate*,Shahana撒拉族、圣彼得堡Jawal Harsha Vardhan Reddy Peddayelluka, Rukmender, Sagarla阿卡什·库马尔和Pothugunta Shravani

研究和开发部门(配方),MLN食品和饮料公司,印度海德拉巴

*通讯作者:
博士Vrushali Pulate
研究和开发部门(配方)
8-2-293/82 MLN食品和饮料公司,情节没有402
Nagar Apurupa建设公路78号,电影
建邦者禧山,海德拉巴,纳、印度- 500096
电话:9921844949
电子邮件: (电子邮件保护);(电子邮件保护)

收到的日期:20/02/2019;接受日期:14/03/2019;发布日期:21/03/2019

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文摘

目的:研究结合精油的抗菌功效(转换端)由丁香油、肉桂油、姜黄油对龋齿和印楝油病原体变异链球菌和l .嗜酸的不同浓度和不同时间间隔。材料和方法:抗菌功效龋齿的微生物进行了研究以确定的有效性结合精油减少变异链球菌的细菌生长和l .嗜酸的使用选择性富集媒体。的抗菌活性曲线端是由标准串行倾注平皿稀释的技术。精油如丁香油、肉桂油、姜黄油、印楝油是食品级(食用)。结果:转换端显示减少96.2%的变异链球菌的浓度100μl 4分钟后而减少96.8%在50 l .嗜酸的μl后4分钟。结论:很明显,现在的研究揭示的重要性转换端控制龋齿引起变异链球菌和l .嗜酸的。这科学信息可以作为一个重要的平台,廉价的安全有效的天然药物的开发。这项研究的长期目标是开发一个消耗品在口腔卫生产品的代理。

关键字

牙科龋齿,变异链球菌,l .嗜酸的、精油、抗菌

介绍

牙科疾病被认为是全世界一个主要公共卫生问题。牙齿及其支承结构胶(牙龈)受到由生龋齿的细菌感染导致腔和牙周炎,如果不及时治疗可以最终导致牙龈炎。最近的研究表明,这种慢性轻度局部感染如牙周炎导致心脏病和冠状动脉心脏病(1,2]。龋齿是一种多因素疾病饮食糖之间的相互作用造成的,口腔生物膜和主人的牙科组织在口腔环境中(3]。它是连续的累积结果周期去矿化作用和补充矿质生物膜之间的界面和齿面(4,5]。

尽管实施措施来控制和治疗龋齿与氟化,他们仍然在许多国家最普遍的牙科疾病(6]。龋齿是一种多因子的传染病造成的堆积在牙齿表面形成的生物膜(7]。症状出现时,有一个不平衡的生物膜和主机由于生物膜矩阵pH值的变化引起的饮食,微生物,或唾液流及其组件8- - - - - -10]。

口腔是许多表面组成的,每一个涂有大量的细菌,众所周知的细菌生物膜。这些细菌都牵连到龋齿和牙周炎等口腔疾病,最常见的细菌感染的人类(11]。主要生龋齿的细菌,链球菌种虫害特别变异链球菌发现更多紧随其后放线菌种虫害和乳酸杆菌spp [12,13]。变形链球菌被认为是最生龋齿的口腔链球菌(14]。变异链球菌能够在牙齿表面,产生大量额外的和胞内多糖。这种微生物也高度引起酸化的耐酸,它代谢一些唾液糖蛋白,因此负责口腔生物膜形成的初始阶段和龋齿病变15]。

龋齿是儿童最常见的慢性疾病。疾病控制和预防中心(CDC)报道称,从1999年到2004年,42%的儿童年龄在2到11年经验在他们的乳牙龋齿,年轻的趋势2到4岁的儿童增加了随着时间的推移,和59%的12到19岁的青少年经历的恒牙龋齿。关键的pH值是儿童明显高于成年人。孩子有更大的动力去矿化作用更酸性口腔环境和减少动力remineralisation在正常口腔博士这让儿童比成人更易患失矿质[16,17]。

精油也叫做挥发油,芳香油性液体从植物材料,如鲜花、花蕾、种子、树叶、嫩枝、树皮、草药、木材、水果和树根。精油估计有3000,其中300是商业上重要的香水市场(18]。精油的抗菌活性是由于一些小萜类化合物和酚类化合物。其中一些被归类为通常被认为是安全的(19- - - - - -21]。

耐药病原体的传播是最严重的威胁之一,成功的微生物疾病的治疗。自古以来,精油和其他植物提取物诱发兴趣来源的天然产物。他们一直在筛选潜在使用替代疗法治疗许多传染性疾病(22]。世界卫生组织(世卫组织)指出,相当一部分的世界人口依赖传统医学提供初级保健。许多精油一直提倡用于补充医学细菌和真菌感染包括疮、粉刺、齿龈炎和阴道念珠菌病(23,24]。

肉桂油(樟树):它的作用,防止牙龈炎引起的口腔卫生不良,口腔鹅口疮,牙龈疾病。它同样是一个寄生虫和抗氧化剂。的抗菌和抗真菌特性是令人难以置信的牙齿和牙龈,如果你不热衷于薄荷醇的基础油,那么这是一个完美的替代改善口腔卫生(25]。

丁香油(Eugenia caryophyllus):丁香药用应用程序已经被人类使用2000多年,咀嚼缓解牙痛的痛苦,也广泛使用作为消毒剂牙根在临时填充物和口服麻醉剂(26,27]。

姜黄油(姜黄):姜黄素的抗炎特性进行了研究,并演示了炎症显著减少。大量研究表明,姜黄漱口水可以有效地用作辅助机械菌斑控制预防牙菌斑和牙龈炎牙科应用程序(28]。

印楝油(Azadirachta indica):尼姆是一种天然抗菌剂。它已报告的活性成分包含楝树皮贴出现抑制口腔链球菌毒力因素与牙菌斑的形成(29日]。

材料和方法

精油组合(转换端)

使用精油的浓度是肉桂油- 0.6%,丁香油- 0.2%,印楝油- 0.2%,姜黄油- 0.8%。结合这些油的混合物(转换端)准备从这10μl 20μl 50μlμl 100和200μl被用于进一步分析。

样品收集

这项研究是由国家担保管理服务有限公司(NCML),孟买,印度。本研究中使用的样本收集从志愿者的牙诊断出患有龋齿。牙齿的感染区与无菌药棉和擦洗唾液转移到无菌螺旋管上限与无菌预防措施,包含0.1%的氯化钠,涡混合1分钟,驱散的细菌。

优化的唾液样本

龋齿唾液样本稀释0.1%的无菌生理盐水/实验方便106 CFU /毫升,用于进一步的研究。Mitis-Salivarius杆菌肽(MSB)琼脂变异链球菌的恢复和德曼Rogosa沙普(夫人)琼脂l .嗜酸的被用来作为选择性的媒体。熔融无菌琼脂举行45°C是倒在盘子和允许固化,然后孵化37°C 48小时。

启动实验空白1毫升唾液样本镀出来,倒在MSB和夫人琼脂培养基作为控制。实验进一步进行10μl, 20μl 50μl 100μl和镀200μl曲线端添加浓度和不同时间间隔的0分钟,2分钟,4分钟,7分钟,10分钟,2小时、4小时使用倒在MSB和夫人介质板技术。所有这些镀样本孵化在37°C 48小时。所有的实验都在一式三份。

孵化后,所有的盘子都数达到最终计数每时间占稀释因素。在不同浓度和不同时间点,细菌生长的还原率是由下列公式计算。

CFU /毫升=菌落计数*稀释系数。

减少% =[(初始CFU / ml-CFU /毫升在时间间隔)/初始CFU /毫升)* 100。

结果

变形链球菌是兼性厌氧的革兰氏阳性球菌(圆形细菌)在人类口腔中常见和蛀牙是一个重要的因素。抗菌功效的曲线端变异链球菌进行10μl 20μl 50μlμl 100和200μl在不同的时间间隔2分钟,5分钟,7分钟,10分钟,2小时,4小时和孵化37°C 48小时。CFU /毫升和%减少变异链球菌为控制和转换端在不同浓度和时间间隔所示表1

表1。CFU /毫升和%减少变异链球菌在不同浓度和时间的间隔。

变异链球菌
时间在几分钟内 浓度曲线端
控制(CFU /毫升) 10µl 20µl 50µl 100年µl 200年µl
CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少
0 692年 682年 1.45 619年 10.55 449年 35.12 391年 43.5 298年 56.94
2 694年 639年 7.93 606年 12.68 387年 44.24 87年 87.46 227年 67.29
4 692年 599年 13.44 529年 23.55 350年 49.42 55 92.05 20. 97.11
7 698年 581年 16.76 521年 25.36 308年 55.87 26 96.28 7 99年
10 701年 485年 30.81 462年 34.09 240年 65.76 16 97.72 0 One hundred.
120年 690年 23 96.67 4 99.42 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred.
240年 699年 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred.

嗜酸乳杆菌属革兰氏阳性细菌乳酸菌l .嗜酸的homofermentative,微量需氧的物种,糖发酵成乳酸,变得容易在相当低的pH值(pH值低于5.0)。抗菌功效的曲线端l .嗜酸的进行10μl 20μl 50μlμl 100和200μl在不同的时间间隔2分钟,5分钟,7分钟,10分钟,2小时,4小时和孵化37°C 48小时。CFU /毫升和%减少L.acidophilus为控制和转换端在不同浓度和时间间隔所示表2

表2。CFU /毫升和%减少l .嗜酸的在不同浓度和时间的间隔。

l .嗜酸的
时间在几分钟内 浓度曲线端(µl)
控制(CFU /毫升) 10µl 20µl 50µl 100年µl 200年µl
CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少 CFU /毫升 %减少
0 66年 65年 1.52 54 18.18 40 39.39 27 59.09 14 78.79
2 68年 55 19.12 36 47.06 22 67.65 8 88.24 3 95.59
4 75年 49 34.67 37 50.67 3 96年 1 98.67 1 98.67
7 74年 48 35.14 8 89.19 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred.
10 69年 31日 55.07 5 92.75 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred.
120年 68年 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred.
240年 66年 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred. 0 One hundred.

讨论

精油的好处已被证明广泛用于各种口腔护理治疗。龋齿可以由几个策略控制单独或组合使用。这些策略包括涉及改变口腔菌群的方法,修改的饮食,增加牙齿的阻力搪瓷酸攻击或逆转去矿化作用的过程。天然产物的活性,特别是EO,对微生物最近证实了一些研究关注抗菌活性的EO浮游细胞。然而,细菌在生物膜表现出特定的表型,通常,但并非总是如此,更耐抗菌药物比浮游同行(30.,31日]。因此,重要的是要寻找天然产物,antibiofilm属性和抗菌活性对口腔病原体(32]。本研究旨在评估转换端反对的活动变异链球菌l .嗜酸的。肉桂油显示最高的活动变异链球菌使用琼脂扩散试验与抑制区12.51毫米100μl [24]。肉桂提取显示麦克风(最低抑制浓度)的250μl - 500μl反对变异链球菌(10]。

根据Zainal-Abidin et al。33]c . zeylanicum(肉桂油)显示出强劲的增长抑制对所有致病性口腔细菌测试。麦克风平均值是0.21±0.04,0.63±0.23μL /毫升(v / v)。肉桂醛和丁香酚对标准显示深刻的活动链球菌spp。肉桂皮精油表达最强烈的抑制作用变异链球菌0.08% (v / v) (MIC)使用一个微型的肉汤稀释法(34]。丁香油是有效的变异链球菌抑制区在7.42毫米100μl浓度(24]。丁香提取物显示22毫米的抑制区1000μl浓度变异链球菌(27]。抗菌研究使用ethanolic提取物40%执行Azadirachta indica(印楝提取物)和c·巴隆(姜黄)。印楝提取物显示区抑制在100毫克/毫升15毫米。而c·巴隆在18毫米敏感区域抑制在100毫克/毫升(2]。据李et al。35结果显示,姜黄素(姜黄)抑制浮游的增长变异链球菌麦克风125 M .治疗后与浓度高于125,不可见的变异链球菌增长是观察到的35]。印楝油浓缩的200μl是有效的对变形链球菌的抑制区28毫米直径(36]。欧元区的抑制被认为Streptoccocus变形测量27毫米直径而嗜酸乳杆菌抑制区被发现be18毫米100μl印楝油的浓度(37]。根据Gupta et al。38)最大杀菌活动被发现出现在叶的水提物答:籼稻植物对l .嗜酸的的抑制长度16±1毫米的浓度100μl [38]。10%的平均抑制值区ethanolic提取的肉桂变异链球菌被发现是9.5毫米,15.5毫米,18.5毫米μl, 10点20μl和30μl和l .嗜酸的发现7毫米,8毫米和9.5毫米分别Yadav et al。39]。印楝油和丁香油显示麦克风分别0.125μl /毫升和0.25μl /毫升L.acidophilus(40]。如果et al。41]研究了抗菌活性l .嗜酸的。丁香油在300μg /毫升的浓度显示抑制2%而肉桂油在200μg /毫升导致抑制75%41]。印楝提取物的抗菌活性变形链球菌石油醚和氯仿提取的Azardirachta籼显示更高的活动(18毫米)在500μg浓度。乙醇提取显示最低活动(14毫米)对这种病原体(42]。

上述研究显示效果异常减少龋齿的细菌的微生物种群。主要是减少微生物的决心变异链球菌l .嗜酸的。结合光电(转换端)当接触减少龋齿导致92%的变异链球菌在4分钟1雷竞技网页版00μl浓度。观察而减少96.8%l .嗜酸的在4分钟50μl浓度(表1和2)

结论

最后,转换端显示特殊的抗菌活性变异链球菌l .嗜酸的。它承认一分钟的浓度曲线端可以减少龋齿微生物无关紧要的。自古以来精油和其他植物提取物有潜在的使用作为不同的替代疗法牙科疾病。这科学信息可以作为一个重要的平台发展的廉价安全有效的天然药物。这项研究的长期目标是开发一个消耗品在口腔卫生产品的代理。

确认

作者大大承认国家抵押品管理服务有限公司(NCML)印度进行实验工作。

引用

全球技术峰会