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一种改进的样品制备方法检测恶性疟原虫的血液样本

文摘

显微镜仍然是黄金标准疟疾寄生虫的检测血液样本,而快速诊断测试(RDTs)和聚合酶链反应(PCR)的方法越来越多地用于应用程序领域,每个都有局限性。利用体外培养的恶性疟原虫的寄生虫隔离,我们分析了几种样品制备方法对pcr检测。测试样品受到低渗的溶菌作用,其次是几乎完全耗尽疟原虫色素(Hz)、血红蛋白(Hb)和随后的PCR扩增msp2基因导致的检测极限,提高样品准备在等渗缓冲条件下。此外,我们放大的几个目标基因,序列包括msp2——msp1 - 18 s rRNA, eba175寄生虫提取由低渗的溶菌作用。我们确定了一套引物,放大区域内eba175给予更大的探测极限1寄生虫/ 5×107红细胞(红血球),以及一套引物给msp2 1到5寄生虫的检测极限每5×107红血球通过标准的PCR分析。剩下的目标表现出最大20到30寄生虫检测限制每5×107红血球。这个新开发的方法是更敏感的100到500倍比目前pcr方法检测30到100每5×106寄生虫1μl血液中红血球)。此外,该方法可用于部署的pcr诊断领域,基因型和质量控制以及寄生虫的失败的方法。

Thavamani Rajapandi

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