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Scriptaid对羊核供体卵丘细胞周期和组蛋白乙酰化的影响及其对体细胞核移植胚胎发育的支持能力

摘要

令人信服的证据表明,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)影响体细胞核移植(SCNT)胚胎的发育。本研究旨在研究用新型HDACi Scriptaid预处理供体羊卵丘细胞对细胞周期、组蛋白乙酰化和克隆胚胎发育的影响。首先,我们优化了Scriptaid在剂量(0、0.1、0.2、0.4和0.8 μmol/L)和时间(0、12、24、36和48 h)下对这些胚胎发育能力的影响。然后,我们通过免疫荧光染色定量评估了积云细胞和SCNT胚胎中组蛋白H3赖氨酸9 (acH3K9)和组蛋白H4赖氨酸12 (acH4K12)乙酰化水平的变化。此外,我们检测了G0/G1期细胞在积云细胞中的比例。我们发现,用0.2 μmol/L的Scriptaid预处理供体积云细胞24小时后,胚泡发育率显著提高(21/86 [24.39%]vs. 11/85 [12.91%]);P < 0.05)。同时,acH3K9和acH4K12在积云细胞和SCNT胚胎中的表达水平也显著提高(P<0.05)。与对照组相比,经Scriptaid预处理的积云细胞处于G0/G1期的比例更高(84.22%比75.96%,P<0.05)。综上所述,经Scriptaid处理的供体积云细胞有利于SCNT胚胎的早期发育,提高积云细胞中acH3K9/ acH4K12和G0/G1期细胞的比例。 Scriptaid can be used to improve the efficiency of somatic cell nuclear transfer in ovine.

曹辉,苏文龙,李俊杰,温炳强,田淑君,孙淑春,李璐,王汉阳,李杰新

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