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从酸奶废渣中分离的乳酸克鲁维菌β-半乳糖苷酶的纯化与表征

摘要

提取纯化β-半乳糖苷酶的一些性质克鲁维酵母菌属研究了从酸奶废品场分离出的乳酸。采用硫酸铵沉淀法和DEAE-Sephadex离子交换层析法对乳酸克鲁维酵母中β-半乳糖苷酶粗酶进行纯化。部分纯化酶的比活性为107.50 μmol /min/mg蛋白,产率为7%。经Bio-gel P-200凝胶过滤,酶的分子量为199 kDa。以邻硝基苯-β- d -半乳糖皮苷(oNPG)为底物的酶的Michealis-Menten常数(Km)和最大速度(Vmax)分别为3.56±0.62 mM和0.61±0.08 μmol /min/ml,以乳糖为底物的酶的Km和Vmax分别为18.01±0.23 mM和0.15±0.04 mmol/20 min/L。以oNPG和乳糖为底物纯化酶的最适pH分别为7.5和6.5。两种底物的最佳温度均为40℃。这种β-半乳糖苷酶可能应用于乳清转化为有用的产品,乳清是乳制品工业的副产品。

Tolulope T Oluwaniyi, Bridget O Omafuvbe, Femi K. Agboola

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