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烟曲霉CFU-01原料淀粉降解、耐酸-耐温葡萄糖淀粉酶:生物技术应用的纯化与表征

摘要

淀粉降解工业过程的改进导致了对耐热的、喜盐的研究淀粉水解酶尤其是葡萄糖淀粉酶,一种可以完全将淀粉水解为葡萄糖的酶。在本研究中,采用最佳的液体培养法制备葡萄糖淀粉酶来自烟曲霉属真菌经硫酸铵沉淀、离子交换层析和凝胶过滤纯化至均匀,纯化20倍,收率为8.19%。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定,50 kDa的葡萄糖淀粉酶在酸性区域的pH范围内高度稳定,并且具有热稳定性;在60ºC下孵育60分钟后仍保持约70%的初始活性。纯化后的酶对直链淀粉、右旋糖酐和不同淀粉均有活性和V马克斯以生木薯淀粉为底物时,分别为1.59 mg/mL和14.33 U/mg。值得注意的是,这种葡萄糖淀粉酶具有很高的耐盐特性在3.0 M NaCl溶液中孵育24 h后,活性残留约50%。一些金属离子,包括K+、钙2 +和毫克2 +2 +、铅2 +和汞2 +抑制其活性。这种葡萄糖淀粉酶独特的生化特性使它有资格用于生物技术,特别是在食品中,制药和生物燃料行业

Adeyemi O Ayodeji, Frank A Ogundolie, Olufemi S Bamidele, Ayodele O Kolawole和Joshua O Ajele

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